N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。儲存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時間。腸激酶能夠特異性識別并切割含有Aspartate-Aspartate-Aspartate-Lysine (DDDK) 序列的蛋白質(zhì)。Recombinant Human AMHRII Protein
糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,經(jīng)過和平空間站伊麗莎菌克隆,主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。N-糖苷酶F(PNGaseF)在酵母中重組表達(比活性:100000U/mL),可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGaseF的切割位點為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。本產(chǎn)品帶his標簽,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。另外,我司還提供其他類型的糖苷酶,包括酵母重組表達的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),內(nèi)切糖苷酶H,內(nèi)切糖苷酶S。產(chǎn)品信息產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(Chinesesynonym)N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶F英文別名(Englishsynonym)PNGaseF來源(Source)酵母重組表達分子量(Molecularweight)36kDa比活性(Specificactivity)100000U/mL緩沖液組分(Buffer)20mMTris-HClpH7.5,50mMNaCl,5mMEDTA,50%GlycerolRecombinant Human VCC-1/CXCL17在藥物篩選中,全長CB1受體可用于高通量篩選實驗,以發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化潛在的藥物候選物。
基因工程與抗體技術(shù)通過基因工程方法,可以構(gòu)建重組3C蛋白酶,并利用其切割特異性進行活性驗證。此外,通過動物實驗獲得3C蛋白酶抗體,可以探索利用抗體技術(shù)抑制3C蛋白酶活性,進而達到抑制病毒復(fù)制的目的4。研究進展與挑戰(zhàn)3C蛋白酶及其抑制劑的研究進展迅速,但仍面臨挑戰(zhàn)。例如,需要深入了解不同耐藥突變對3CLpro自身活性的影響,以及不同抑制劑之間的交叉耐藥風(fēng)險。這些研究對于開發(fā)新的廣譜抗病毒藥物具有重要意義38。結(jié)論3C蛋白酶是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶,是抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點。深入研究3C蛋白酶的結(jié)構(gòu)、功能以及耐藥機制,對于開發(fā)有效的抗病毒藥物和方法具有重要意義。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進步,3C蛋白酶的研究將為人類戰(zhàn)勝病毒性疾病提供更多的科學(xué)依據(jù)策略。
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達重組腸激酶(不帶標簽)注意事項1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,可能會有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切會受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,然后再進行酶切實驗;若不方便透析,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進行酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當(dāng)增加酶量或延長酶切時間,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對Enterokinase有很強的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會嚴重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,可用陰離子交換樹脂(如DEAE-FF)對其進行洗脫。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可適當(dāng)增加酶量,或適當(dāng)延長酶切時間。全長跨膜蛋白CB1它通過與G蛋白的相互作用,調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的第二信使系統(tǒng),如cAMP水平。
糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。儲存條件-25~-15℃保存,有效期1年。使用方法1、變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化:1)在水中加入1μLBuffer1和目標糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;加入1-2μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。2、非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化:1)在水中加入2μL的Buffer2和目標糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入2~5μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時間。注意事項1.PNGaseF建議搭配我司提供的配套緩沖液使用,按我司說明書建議的操作量配套緩沖液足夠。如您由于使用體系造成配套緩沖液不足,可咨詢當(dāng)?shù)劁N售進行購買隨著醫(yī)藥科技的發(fā)展,透明質(zhì)酸在醫(yī)藥這方面的應(yīng)用將越來越多,包括作為藥物載體和組織工程的基質(zhì)。Recombinant Cynomolgus AMIGO2 Protein,His Tag
常用的跨膜蛋白表達系統(tǒng)包括大腸桿菌表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)、昆蟲細胞表達系統(tǒng)和哺乳動物細胞表達系統(tǒng)等。Recombinant Human AMHRII Protein
利用PCR技術(shù)擴增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表達載體pGEX一4T一1的多克隆位點中,得到重組質(zhì)粒pGCPI,測序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達,超聲波破茵后,通過谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白,純度大于97%。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98%的重組CPI,ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性,體外檢測表明其促進纖溶的生物功能與天然CPI無明顯差異。Recombinant Human AMHRII Protein
在分子生物學(xué)實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,提高擴增產(chǎn)物的準確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,...