N-糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,經(jīng)過(guò)和平空間站伊麗莎菌克隆,主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。酵母重組表達(dá)N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGaseF的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時(shí)將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。另外,我司還提供其他類型的糖苷酶,包括酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F,糖苷內(nèi)切酶H,糖苷內(nèi)切酶S。產(chǎn)品信息產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(Chinesesynonym)N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶F英文別名(Englishsynonym)PNGaseF來(lái)源(Source)酵母重組表達(dá)分子量(Molecularweight)36kDa比活性(Specificactivity)750000U/mL緩沖液組分(Buffer)20mMTris-HClpH7.5,50mMNaCl,5mMEDTA,50%Glycerol在蛋白質(zhì)表達(dá)體系中,腸激酶常用于切割融合標(biāo)簽,從而釋放出目的蛋白,特別是在pET表達(dá)系統(tǒng)中。Recombinant Human DHH Protein
透明質(zhì)酸酶,英文名稱Hyaluronidase,一類能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸活性的酶的總稱,結(jié)構(gòu)上由4個(gè)相同亞基構(gòu)成,每個(gè)亞基分子量接近14kDa,該酶是一種糖蛋白,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上該酶可隨機(jī)裂解透明質(zhì)酸、軟骨素和硫酸軟骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷鍵。常與膠原酶聯(lián)合使用于降解細(xì)胞外基質(zhì),從而從組織中分離活細(xì)胞。本品來(lái)源于牛睪丸,活力值為400–1,000units/mg,合適的pH值為4.5–6.0。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(ChineseSynonym)玻璃糖醛酸酶;玻璃酸酶英文別名(EnglishSynonym)Hyaluronoglucosaminidase;Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS號(hào)(CASNO.)37326-33-3來(lái)源(Source)牛睪丸分子量(MolecularWeight)~55kDa類型(Type)I-S外觀(Appearance)淡黃色至米黃色至褐色粉末Recombinant Human Siglec-3/CD33 Protein,His-Avi Tag凝血酶是由大小分別為31 KD和6 KD的兩條肽鏈通過(guò)二硫鍵組成的一種絲氨酸蛋白水解酶。
抑肽酶(Aprotinin),一種絲氨酸蛋白酶抑制劑,廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。本研究探討了利用大腸桿菌(E. coli)表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)重組抑肽酶的方法,及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的優(yōu)勢(shì)。引言抑肽酶,又稱胰蛋白酶抑制劑,是一種小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細(xì)胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)研究中,抑肽酶的使用對(duì)于防止非特異性蛋白水解至關(guān)重要。傳統(tǒng)的抑肽酶主要來(lái)源于動(dòng)物,如牛肺,但存在外源病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。因此,利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行重組抑肽酶的生產(chǎn),可以提供一種無(wú)動(dòng)物源、高純度、質(zhì)量穩(wěn)定的替代品。材料與方法基因克隆與表達(dá)載體構(gòu)建:人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構(gòu)建到適合大腸桿菌表達(dá)的質(zhì)粒載體中。大腸桿菌表達(dá)菌株的構(gòu)建:通過(guò)轉(zhuǎn)化,將構(gòu)建好的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌宿主菌中,構(gòu)建表達(dá)菌株。發(fā)酵培養(yǎng):利用發(fā)酵罐進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng),以提升重組抑肽酶的產(chǎn)量。蛋白純化:通過(guò)多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。
α-凝血酶(α-Thrombin)是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶,由凝血酶原(Prothrombin,II因子)經(jīng)蛋白水解活化而來(lái)。它在凝血過(guò)程中起著非常重要的作用,不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生,還負(fù)責(zé)提供反饋信號(hào)來(lái)尋找前輔因子:V因子和VIII因子。也可以用作血管收縮劑。在體內(nèi),活化的X因子(FactorXa)切割凝血酶原,釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈(Achain)(Mw~6,000)和一條重鏈(Bchain)(Mw~31,000)通過(guò)二硫鍵連接而成。某些情況下,α-凝血酶會(huì)發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對(duì)α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點(diǎn)的小片段(B1,B2)組合而成。除了用于凝血研究之外,α-凝血酶還常用來(lái)位點(diǎn)特異性切割融合蛋白?;蛑亟M時(shí)將凝血酶識(shí)別位點(diǎn)插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達(dá)的多肽或者蛋白之間,通過(guò)凝血酶切割表達(dá)的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過(guò)親和層析技術(shù)快速去除。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子,Va因子和磷脂活化而得,經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)確保凝血酶原的完全活化,并以NIH凝血酶的標(biāo)準(zhǔn)品為參考,提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,簡(jiǎn)稱HA)是一種存在于人體和動(dòng)物組織中的天然高分子多糖,稱為糖醛酸或玻尿酸。
膠原蛋白是哺乳動(dòng)物體內(nèi)含量多的功能性蛋白[1]。膠原蛋白由3條α鏈的多肽鏈亞基組成,α鏈自身構(gòu)型為左手螺旋,三條α鏈又互相纏繞成右手螺旋結(jié)構(gòu),即膠原蛋白的“膠原域”[2]。膠原蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示,其肽鏈由(Gly-X-Y)n組成,其中X通常是脯氨酸,Y通常是羥脯氨酸[3]。按照膠原蛋白發(fā)現(xiàn)的先后順序,可將其分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型等28種膠原蛋白[4],Ⅰ型膠原蛋白分子組成為[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ),主要分布于骨骼中[5];Ⅱ型膠原蛋白由[α1(Ⅱ)]3組成,主要由軟骨細(xì)胞產(chǎn)生,因其含有大量賴氨酸殘基,因而糖基化率較高[6];Ⅲ型膠原蛋白分子組成為[α1(Ⅲ)]3,因含半胱氨酸所以肽鏈間形成二硫鍵,因此其本身就可形成細(xì)纖維,Ⅲ型膠原蛋白血管中含量較高,主要存在于肺泡間質(zhì)中且分布雜亂,因而形成復(fù)雜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),正是這種結(jié)構(gòu)使得肺組織具有良好的柔韌性與彈性,并且可以為細(xì)胞提供充足養(yǎng)分,使得皮膚飽滿透亮[7]。透明質(zhì)酸及其衍生物由于其生物相容性和生物降解性,被用作藥物的控釋載體。Kallikrein Inhibitor
內(nèi)分泌腺衍生的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF),也稱為(PK1),是分泌蛋白的原蛋白蛋白家族的成員。Recombinant Human DHH Protein
Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.產(chǎn)品性質(zhì)別名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.純度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制劑Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.Recombinant Human DHH Protein
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,...