IgA 消化酶的 IgASAP 家族特異性消化血清和分泌型人 IgA 以生成 Fab 和 Fc 片段。IgASAP Sub1 特異性消化人 IgA1,而 IgASAP Sub1+2 同時(shí)消化人 IgA1 和 IgA2m1。 Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1。兩種酶都產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段。為了獲得純和完整的Fab片段,使用Genovis的GingisKHAN Fab Kit進(jìn)行人IgG1的消化和抗體片段的后續(xù)純化。通過與 GingisKHAN 孵育,然后在 CaptureSelect? 人 CH1 離心柱上親和純化,在曲妥珠單抗上證明了完整的片段生成。樣品的酶和Fc部分存在于色譜柱的流通中,F(xiàn)ab很容易通過降低pH洗脫。使用該試劑盒,可以制備 0.5 mg 至 2 mg 人 IgG1 的 Fab 片段。Genovis同時(shí)提供IdeS酶的純化試劑盒。可用于如單價(jià)結(jié)合、二硫鍵擾亂和配對(duì)Fc糖基化等。四川GlySERIASIdeS蛋白酶抗體酶切
對(duì)于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說,F(xiàn)ab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰(zhàn)性。Genovis的GingisKHAN酶在鉸鏈上方一個(gè)可觸及的賴氨酸位點(diǎn)消化人IgG1,在足夠溫和的還原條件下保留鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵,從而產(chǎn)生完整的Fab和Fc片段。對(duì)于融合蛋白,消化通常在鉸鏈上方獲得,但融合伴侶的結(jié)構(gòu)和氨基酸序列可能導(dǎo)致其他暴露的消化位點(diǎn)。如果去除保守的 Fc N-聚糖,F(xiàn)c 中的第二個(gè)切割位點(diǎn)也可能被GingisKHAN酶切。將精選的單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白與 GingisKHAN 在 37°C 下孵育 1 小時(shí),并通過 HPLC 進(jìn)行分析。遼寧IgGZEROIdeS蛋白酶抗體酶切鉸鏈上方的單個(gè)暴露賴氨酸殘基,生成的片段可用于結(jié)晶和高階(HOS)NMR研究、結(jié)合研究等。
與IdeS不同,Genovis的IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性蛋白酶,可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。該酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人IgM進(jìn)行中級(jí)分析,從而促進(jìn)疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨(dú)特-可實(shí)現(xiàn)IgM的中級(jí)表征和質(zhì)量控制;快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的F(ab')2和Fc片段;高度特異性–人IgM重鏈中的一個(gè)消化位點(diǎn)。IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性酶,可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM,產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。消化在30分鐘內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時(shí)間延長,則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為5.5至9.0時(shí)具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為38kDa。
Genovis的FabRICATOR是一種半胱氨酸蛋白酶,它對(duì)許多不同的物種和IgG亞類都有活性,包括人IgG亞類1-4以及猴子、兔子、大鼠和綿羊IgG的一些亞類。FabRICATOR在鉸鏈下方的單個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行消化,生成F(ab’)2和Fc/2子基,可以進(jìn)一步還原生成Fd’,輕鏈和F/2子基是必需的。FabRICATOR(IdeS)通過蛋白-蛋白相互作用與目標(biāo)抗體工作,這說明了它的高特異性。事實(shí)上,它在單個(gè)位點(diǎn)消化意味著使用FabRICATOR時(shí)沒有過度消化的風(fēng)險(xiǎn),其高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺(tái)方法應(yīng)用于許多不同的抗體。FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來獲得良好活性,也不需要任何額外的輔助因子,它將在不同生理緩沖中發(fā)揮作用。這意味著按照下面的鉸鏈消解,您將生成F(ab’)2和Fc/2片段用于分析或其他應(yīng)用。有助于監(jiān)測(cè)多種CQA,例如糖基化、氧化和C端賴氨酸剪切。
Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種獨(dú)特的酶,可在鉸鏈區(qū)域下方的特定位點(diǎn)消化IgG,產(chǎn)生均勻的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內(nèi)消化,如果孵育時(shí)間延長,則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。由于FabRICATOR在生理反應(yīng)條件下消化IgG,因此保留了免疫反應(yīng)性。在37°C下獲得良好的活性,但也可以在室溫下使用較長的反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對(duì)小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由GenovisAB開發(fā),用于需要高標(biāo)準(zhǔn)和一致性的生物技術(shù)應(yīng)用。有一種檢測(cè)FabRICATOR酶的方法。了解有關(guān)山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。Blinatumomab(一種對(duì) CD19 和 T 細(xì)胞標(biāo)志物 CD3 具有特異性的 BiTE 分子)。北京FabRICATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
可用于抗體高階結(jié)構(gòu)(HOS)結(jié)晶和NMR研究、雙抗或多抗的表征、單價(jià)結(jié)合研究或完整Fc聚糖分析。四川GlySERIASIdeS蛋白酶抗體酶切
與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時(shí)內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時(shí)間延長,則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性?;钚允窃?7°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個(gè)單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。四川GlySERIASIdeS蛋白酶抗體酶切
Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人IgG1,并在兩小時(shí)內(nèi)生成均質(zhì)的Fab和F...
【詳情】Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中...
【詳情】蛋白酶用于生成肽,用于質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)。這些應(yīng)用包括蛋白質(zhì)組學(xué)和生物制藥的深度表征。由于遺漏了切割和樣...
【詳情】抗體 Fc 糖基化譜是一種重要的 CQA,因?yàn)樗鼤?huì)影響療效、和免疫原性。因此,需要從早期開發(fā)、工藝開...
【詳情】在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域,倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)...
【詳情】Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動(dòng)消化IgG。FabRICATOR(IdeS)...
【詳情】與IdeS不同,Genovis的IgASAP是IgA消化酶家族。IgASAPSub1是一種IgA1特...
【詳情】如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子,現(xiàn)在有了Genovis的一些新產(chǎn)品(IgA酶,IgM酶),其...
【詳情】Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對(duì)IgG進(jìn)行柱上消化的...
【詳情】其他基于 IgG 的生物制藥需要仔細(xì)表征和監(jiān)測(cè)關(guān)鍵質(zhì)量屬性,例如氧化、糖基化和其他翻譯后修飾。與抗體...
【詳情】對(duì)于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說,F(xiàn)ab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰(zhàn)性。Genov...
【詳情】與IdeS不同,在蛋白質(zhì)zhiliao藥物的質(zhì)量控制過程中,詳細(xì)分析和識(shí)別質(zhì)量屬性非常重要。對(duì)于具有...
【詳情】