Genovis提供具有低水平內(nèi)Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,用于IgG的鉸鏈以下消化。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規(guī)格:2000和5000單位,分別用于消化2mg或5mgIgG。該產(chǎn)品配方每瓶的內(nèi)Du素含量較低,2000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.04EU/瓶,5000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.10EU/瓶。有效消化,內(nèi)DU素水平低;適用于靈敏的體內(nèi)或基于細(xì)胞的檢測??上彼釟埢?C 末端蛋白質(zhì),包括難以與其他酶消化的 Arg-Pro 鍵。云南FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1和IgA2m1,產(chǎn)生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長,因此IgA1和IgA2m1之間來自消化位點的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時間為過夜(16-18小時),并且由于酶的特異性,沒有過度消化的風(fēng)險。該酶在pH值為6.0至8.0時具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可產(chǎn)生活性。活性為37°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。云南FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶Genovis還提供了在瓊脂糖樹脂上固定化的酶,在隨時可用的離心柱中,這可以大限度地減少在樣品中殘留的酶。
Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并在兩小時內(nèi)生成均質(zhì)的Fab和Fc片段(Genovis的IdeS在鉸鏈區(qū)下方的單個位點進(jìn)行消化)。生成的片段可用于結(jié)晶和高階結(jié)構(gòu)(HOS)的NMR研究、結(jié)合研究等。突變的鉸鏈區(qū)域是zhiliao性候選抗體的常見修飾,以降低效應(yīng)器功能。這些突變可能會影響具有高底物特異性的酶的抗體消化效率。例如,高度特異性的FabRICATOR(IdeS)消化效率對含有常見LALA突變的抗體產(chǎn)生負(fù)面影響。FabDELLO作用于人IgG1鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基,能夠?qū)哂型蛔冦q鏈區(qū)域的抗體進(jìn)行流行的中級LC-MS分析。例如,用FabDELLO消化市售的IgG1risankizumab,在下鉸鏈區(qū)域具有LALA突變,并通過反相LC-MS進(jìn)行分析。消化產(chǎn)生均勻的Fab和Fc片段。用20mMDTT還原片段,用于中級LC-MS分析,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了均相的Fc/2、輕鏈(LC)和Fd片段。用FabDELLO消化后觀察到的定義峰顯示出均勻的片段生成和酶的穩(wěn)健性能。
Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對處理兔IgG感興趣,請聯(lián)系Genovis團(tuán)隊,我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡單性、速度和可重復(fù)性也意味著這種酶可以被用于質(zhì)量控制應(yīng)用。 QC方法需要執(zhí)行簡單,易于訓(xùn)練,高度可重復(fù),數(shù)據(jù)易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因為它適用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進(jìn)行QC工作的客戶將能夠在未來的產(chǎn)品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。中級分析已成為分析單克隆抗體療法的標(biāo)準(zhǔn)方法,并為產(chǎn)品質(zhì)量屬性提供特定領(lǐng)域的信息。
大多數(shù)zhiliao抗體攜帶人 IgG1 骨架,雙特異性或多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性,例如單價結(jié)合、二硫鍵擾亂和配對 Fc 糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和 Lys-C 的酶消化,這需要優(yōu)化以大限度地減少過度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE) 在鉸鏈上方的一個特定位點消化人 IgG1,以產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段。該酶在大多數(shù)人IgG1 上也具有活性,其中鉸鏈區(qū)域以下的突變已被引入。為了證明FabALACTICA的性能,我們消化了不同的人IgG1抗體,并使用RP-HPLC分析了所得片段。用FabALACTICA消化后觀察到的定義峰顯示了不同人IgG1抗體的均質(zhì)片段生成和強(qiáng)大的酶性能。FabALACTICA 酶也可用于生成完整的 Fc 片段。FabRICATOR Magic自動平行抗體酶切和亞基生成,用于處理與克隆選擇。江蘇GlycINATORIdeS蛋白酶
小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,不被 FabRICATOR Z 消化。云南FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
Genovis集團(tuán)由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達(dá)克上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關(guān)系。Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進(jìn)和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產(chǎn)品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。通過在2020年收購QEDBioscience,產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關(guān)QED的更多信息Genovis研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系,使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學(xué)術(shù)團(tuán)體的合作同樣有價值。云南FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
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