Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對(duì)IgG進(jìn)行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、質(zhì)譜或其他分析方法分析片段。抗體消化和亞基生成的自動(dòng)化使生物反應(yīng)器的在線監(jiān)測(cè)應(yīng)用成為可能,例如,作為2D-LC-MS設(shè)置的一部分,將反應(yīng)器直接耦合到MS。這種自動(dòng)化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時(shí)間、樣品處理時(shí)間并提高了通量。度拉糖肽的使用GlySERIAS酶切后,HPLC分析后,還鑒定了GLP-1肽的氧化。云南FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)
與IdeS不同,Romiplostim 由四個(gè)相同的血小板生成素 (TPO) 受體結(jié)合肽和一個(gè) Fc 片段組成,通過(guò)柔性聚甘氨酸序列連接在一起。與度拉糖肽類(lèi)似,用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 在 37°C 下過(guò)夜,或用 GlySERIAS 凍干 1 小時(shí)并在 37°C 下過(guò)夜消化該蛋白質(zhì)。 鏈間二硫鍵被還原,以便于通過(guò)反相LC-MS進(jìn)行以下分析。與度拉糖肽的觀察結(jié)果類(lèi)似,用固定化酶消化產(chǎn)生均質(zhì)的 Fc/2,剩下一個(gè)連接子殘基,此處為甘氨酸殘基。這有助于識(shí)別專(zhuān)門(mén)位于Fc區(qū)域的修改。用凍干酶消化 1 小時(shí)得到 Fc/2,剩余 4 個(gè)甘氨酸殘基和少量的 Fc/2 仍與一個(gè) TPO 肽連接。另一方面,這使得研究 Fc/2 和第yi個(gè)肽之間的連接區(qū)域成為可能,而不會(huì)受到第二個(gè)肽的干擾。用 GlySERIAS 凍干液過(guò)夜消化產(chǎn)生 2 個(gè) Fc/2 變體,分別剩下 4 個(gè)和 1 個(gè)甘氨酸殘基。根據(jù)消化時(shí)間的不同,使用凍干產(chǎn)物釋放的肽以五或七種變體存在,接頭中殘留的甘氨酸殘基數(shù)量不同,而使用固定化產(chǎn)物釋放的肽以四種變體存在。浙江GlySERIASIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶Genovis的IdeS蛋白酶是IgG特異性半胱氨酸蛋白酶。
與IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在來(lái)自多個(gè)不同物種和亞類(lèi)的IgG的鉸鏈區(qū)域消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點(diǎn)是......KTHT...例如,制備的Fab片段可用于親和力研究、Fab糖基化研究和結(jié)構(gòu)研究。對(duì)來(lái)自多個(gè)物種和亞類(lèi)的IgG有活性–上鉸鏈區(qū)域的消化物;快速-在一小時(shí)內(nèi)生成Fab和Fc片段;有效消化小鼠IgG1。FabULOUS來(lái)源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達(dá)。FabULOUS的分子量為29kDa,該酶含有His標(biāo)簽。
與IdeS不同,融合蛋白是通過(guò)將兩種或多種蛋白質(zhì)或肽的功能組合成一個(gè)量身定制的分子來(lái)創(chuàng)造的,以專(zhuān)門(mén)應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn)。連接此類(lèi)蛋白質(zhì)或肽結(jié)構(gòu)域的常見(jiàn)方法是包含柔性連接子。這些連接子通常富含甘氨酸,例如甘氨酸殘基(G),或甘氨酸殘基散布絲氨酸殘基(GS)以形成重復(fù)序列。這為連接子提供了足夠的靈活性,不會(huì)干擾連接蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域的功能。然而,這些新模式帶來(lái)了新的分析挑戰(zhàn),需要新的工具來(lái)促進(jìn)表征和產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)。中級(jí)分析已成為分析單克隆抗體療法的標(biāo)準(zhǔn)方法,涉及將分子消化成幾個(gè)定義的亞基。它們足夠小,可以獲得高質(zhì)量的質(zhì)譜圖,并為產(chǎn)品質(zhì)量屬性提供特定領(lǐng)域的信息。由于G和GS連接子對(duì)常見(jiàn)蛋白酶的降解具有抗性,因此很難分離結(jié)構(gòu)域以進(jìn)行深入分析。因此,Genovis開(kāi)發(fā)了GlySERIAS,不同于IdeS酶,一種消化柔性富含甘氨酸的連接子的酶。GlySERIAS可以分離不同的功能域,并實(shí)現(xiàn)對(duì)融合蛋白、多特異性抗體和含有富含甘氨酸的連接子的各種mAb片段進(jìn)行詳細(xì)表征的中級(jí)方法。可以用Genovis的GlySERIAS固定化酶(瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián))消化度拉糖肽。
在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域,倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動(dòng)物造模用陽(yáng)性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,品牌有瑞典Genovis、德國(guó)BASF、美國(guó)QED、中國(guó)君研生物、中國(guó)金傳生物、中國(guó)毫厘科技、中國(guó)再帆生物等。這些國(guó)產(chǎn)品牌都具有國(guó)內(nèi)自研、自產(chǎn)能力,批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質(zhì)可控,為行業(yè)發(fā)展提供更多國(guó)產(chǎn)選擇。剩下一個(gè)連接子殘基(甘氨酸殘基),這有助于識(shí)別位于Fc區(qū)域的修飾。北京FabDELLOIdeS蛋白酶
FabRICATOR Magic磁珠化IdeS酶切的自動(dòng)抗體亞基分析可減少操作人員的時(shí)間和樣品處理錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)。云南FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)
抗體的氧化是可能影響抗體功能的關(guān)鍵質(zhì)量屬性,需要密切定量和表征。它可能導(dǎo)致mAb的體內(nèi)半衰期、功效和穩(wěn)定性降低。Genovis的FabRICATOR(IdeS)消化產(chǎn)生的抗體亞基是研究抗體氧化的理想選擇。酶解的穩(wěn)健性允許在受監(jiān)管的環(huán)境中監(jiān)測(cè)抗體亞基氧化。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。該酶用于基于抗體的療法(如mAb、ADC、生物類(lèi)似藥和Fc融合蛋白)的表征、質(zhì)量控制、穩(wěn)定性測(cè)試、生產(chǎn)監(jiān)測(cè)和克隆選擇。高度特異性-鉸鏈下方的一個(gè)消化位點(diǎn)快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的片段池實(shí)現(xiàn)基于抗體的生物zhiliao藥物的表征和質(zhì)量控制可固定在即用型離心柱中云南FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)
Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人IgG1,并在兩小時(shí)內(nèi)生成均質(zhì)的Fab和F...
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