與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時(shí)內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時(shí)間延長(zhǎng),則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個(gè)單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。Genovis提供凍干和固定化的FabRICATOR(IdeS),為客戶提供了許多選擇,滿足他們的需求。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
抗體由于其大小和復(fù)雜性,是一種難以表征的分子。偶聯(lián)藥物有效載荷是對(duì)抗Ai癥等疾病的一種有吸引力的方法,但進(jìn)一步增加了異質(zhì)性的復(fù)雜性和風(fēng)險(xiǎn)??贵w藥物偶聯(lián)物 (ADC) 需要像任何其他基于 IgG 的生物制藥一樣進(jìn)行仔細(xì)和詳細(xì)的表征,并且需要適當(dāng)?shù)姆治龉ぷ髁鞒?。Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶將ADC消化成其亞基,可以詳細(xì)表征這類復(fù)雜的藥物。Genovis的內(nèi)切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 還可以研究完整的 ADC,但降低復(fù)雜性并提高分辨率。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶Genovis的FabRICATOR(IdeS) MagIC 以較少的用戶交互減少實(shí)驗(yàn)和操作時(shí)間。
Genovis提供具有低水平內(nèi)Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,用于IgG的鉸鏈以下消化。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規(guī)格:2000和5000單位,分別用于消化2mg或5mgIgG。該產(chǎn)品配方每瓶的內(nèi)Du素含量較低,2000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.04EU/瓶,5000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.10EU/瓶。有效消化,內(nèi)DU素水平低;適用于靈敏的體內(nèi)或基于細(xì)胞的檢測(cè)。
經(jīng)過多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀,倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中,細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級(jí)MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級(jí)膠原酶、AAV滴度檢測(cè)產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù)、QED抗體對(duì)、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。上海倍篤生物科技有限公司(簡(jiǎn)稱“倍篤生物”)代理Genovis的IdeS酶等。
Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人IgG1,并在兩小時(shí)內(nèi)生成均質(zhì)的Fab和Fc片段(Genovis的IdeS在鉸鏈區(qū)下方的單個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行消化)。生成的片段可用于結(jié)晶和高階結(jié)構(gòu)(HOS)的NMR研究、結(jié)合研究等。突變的鉸鏈區(qū)域是zhiliao性候選抗體的常見修飾,以降低效應(yīng)器功能。這些突變可能會(huì)影響具有高底物特異性的酶的抗體消化效率。例如,高度特異性的FabRICATOR(IdeS)消化效率對(duì)含有常見LALA突變的抗體產(chǎn)生負(fù)面影響。FabDELLO作用于人IgG1鉸鏈上方的單個(gè)暴露賴氨酸殘基,能夠?qū)哂型蛔冦q鏈區(qū)域的抗體進(jìn)行流行的中級(jí)LC-MS分析。例如,用FabDELLO消化市售的IgG1risankizumab,在下鉸鏈區(qū)域具有LALA突變,并通過反相LC-MS進(jìn)行分析。消化產(chǎn)生均勻的Fab和Fc片段。用20mMDTT還原片段,用于中級(jí)LC-MS分析,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了均相的Fc/2、輕鏈(LC)和Fd片段。用FabDELLO消化后觀察到的定義峰顯示出均勻的片段生成和酶的穩(wěn)健性能。Genovis的GingisKHAN和FabALACTICA可酶切人 IgG1,獲得完整Fab和Fc抗體片段。江蘇FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)
IgASAP Sub1+2 在脯氨酸 (P) 和纈氨酸 (V) 之間消化 IgA1 和 IgA2m1。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
與IdeS不同,為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產(chǎn)物,用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白質(zhì)消化該蛋白質(zhì),該蛋白由與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GlySERIAS酶組成。通過將酶偶聯(lián)到樹脂上,可以增加酶與蛋白質(zhì)的比率,從而可以進(jìn)一步加速反應(yīng),以獲得更完整的連接子消化。此外,該酶不會(huì)存在于樣品制備中,可能會(huì)干擾樣品分析。為了進(jìn)行比較,度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化過夜,或用GlySERIAS凍干1小時(shí)并在37°C下過夜消化。 為了降低樣品復(fù)雜性,使用內(nèi)切糖苷酶GlycINATOR凍干去除Fc聚糖,并減少鏈間二硫鍵。通過反相LC-MS對(duì)樣品的分析表明,GlySERIAS Immobilized幾乎完全消化了Fc結(jié)構(gòu)域中的連接子,留下了接近均質(zhì)的Fc/2產(chǎn)物,其中含有來自連接子的一個(gè)絲氨酸殘基。用 GlySERIAS 凍干 1 小時(shí)或過夜消化,兩者都會(huì)產(chǎn)生幾種 Fc 產(chǎn)物,并附著不同數(shù)量的絲氨酸和甘氨酸殘基。GLP-1肽在所有三個(gè)樣品中以兩種變體存在。使用GlySERIAS固定化消化的均質(zhì)Fc/2能夠詳細(xì)研究特定于Fc區(qū)域的質(zhì)量屬性。此外,在樣品中未觀察到干擾分析的酶峰。作為補(bǔ)充,F(xiàn)c/2 產(chǎn)物在用 GlySERIAS 凍干消化后殘留部分連接子,有助于研究位于 GS 連接子的修飾。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
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