因?yàn)橹谱鞴に嚦墒旌彤a(chǎn)量大的原因,實(shí)驗(yàn)室常備血清一般都為牛血清。而牛血清種類也因適合培養(yǎng)不同種類的細(xì)胞分很多種了,同屬于牛血清為什么它們價(jià)格卻有天壤之別。我們就拿市面上應(yīng)用較為廣的胎牛血清和新生牛血清為例。除了生產(chǎn)成本和供應(yīng)來源不一樣外,兩種血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時(shí),將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可較為大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。二者的成分也很不一樣。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,還含有豐富的胚胎生長促進(jìn)因子以及各種還未完全鑒定的成分,可滿足所培養(yǎng)細(xì)胞的特殊的代謝需求。胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。揚(yáng)州標(biāo)準(zhǔn)級血清廠家
很好的胎牛血清:好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。國產(chǎn)血清,大多高于ph7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于ph7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來初步鑒別血清的來源。揚(yáng)州標(biāo)準(zhǔn)級血清廠家小牛血清取自出生10-30天的小牛。
避免產(chǎn)生沉淀物:請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。
血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁。
血清的保存應(yīng)該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點(diǎn)"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染,一般情況下,此小黑點(diǎn)不會影響細(xì)胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。揚(yáng)州標(biāo)準(zhǔn)級血清廠家
血清可提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì)。揚(yáng)州標(biāo)準(zhǔn)級血清廠家
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?來源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。揚(yáng)州標(biāo)準(zhǔn)級血清廠家
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胎牛血清在使用過程中可能對環(huán)境產(chǎn)生一定的影響。在生物醫(yī)學(xué)研究和生物制藥工業(yè)中,胎牛血清通常用作培養(yǎng)基的組成部分,用于細(xì)胞培養(yǎng)和病毒繁殖。然而,胎牛血清的使用可能會導(dǎo)致一些問題。首先,胎牛血清的質(zhì)量和成分可能存在一定的差異,這可能會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果和產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生影響。其次,胎牛血清的使用可能會引入一些未知的病原體,從而對實(shí)驗(yàn)室安全和產(chǎn)品安全構(gòu)成潛在威脅。此外,大量使用胎牛血清會導(dǎo)致胎牛的需求量增加,進(jìn)一步加劇了胎牛的飼養(yǎng)和養(yǎng)殖壓力。針對以上問題,有一些可能的解決方案可以被采取。首先,可以通過改進(jìn)胎牛血清的生產(chǎn)過程來減少對環(huán)境的影響。例如,可以采用有機(jī)飼料和無農(nóng)藥的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方式,減少對土壤和水源的污染。...