相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:·能夠有效區(qū)分濃度差異微小的樣品:更好的準(zhǔn)確度、精密度和重復(fù)性,可以用于精確測定靶基因的相對表達(dá),基因拷貝數(shù)變異分析等?!?shù)字PCR可開發(fā)針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環(huán)境提供檢測解決方案,該技術(shù)的應(yīng)用范圍廣,尤其在液體活檢領(lǐng)域,已開發(fā)針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個(gè)位點(diǎn)檢測試劑盒,可精細(xì)指導(dǎo)臨床***的診斷,以便患者在后續(xù)得到更及時(shí)并且適當(dāng)?shù)?**方案提供。準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率。南京永諾數(shù)字PCR品牌
數(shù)字PCR檢測及分析原理在上世紀(jì)90年代就被提出來了,但是無奈受限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件,樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的,受到很多因素的干擾和限制;并且結(jié)果分析對于研究者來說也十分枯燥與繁瑣,因此在很長一段時(shí)間dPCR發(fā)展停滯不前。后來由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過程中的幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù)問題,推動(dòng)了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式,基本可分為三大類,一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片;第二種是使用微反應(yīng)室/孔板;第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式,其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或者微滴當(dāng)中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過PCR擴(kuò)增之后,有一個(gè)核酸分子的模板的反應(yīng)器就會給出熒光信號,沒有模板的反應(yīng)器沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應(yīng)器的體積,可以推算出原始溶液的核酸濃度。上海流式數(shù)字PCR現(xiàn)貨國內(nèi)擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀。
無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率 。而精細(xì)有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當(dāng)厲害了。
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR是具有國內(nèi)自主知識產(chǎn)權(quán)的第三代JUE對定量PCR系統(tǒng),整套系統(tǒng)由MicroDrop-100A微滴生成儀、MicroDrop-100B微滴檢測儀以及結(jié)果數(shù)據(jù)分析設(shè)備等構(gòu)成。系統(tǒng)通過自主設(shè)計(jì)的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時(shí)間內(nèi)將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個(gè)體系為的PCR反應(yīng)體系,體積約為0.2nL,單次實(shí)驗(yàn)一次可生成8個(gè)樣本的油包水體系 。由于油包水體系的分割效應(yīng),使得數(shù)字PCR受PCRYi制物的影響相對較小,有利于復(fù)雜環(huán)境樣本的實(shí)驗(yàn)操作。區(qū)別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數(shù)字PCR結(jié)果判讀為終點(diǎn)法,故其對PCR擴(kuò)增效率的依賴也相對較小。支持多重?cái)?shù)字PCR,可選全中文分析軟件。
CNV(CopyNumberVariations,拷貝數(shù)變異)研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異,測序方法適用于高于30%的變異率檢測,而qPCR的比較**辨在1.5倍左右,數(shù)字PCR通過直接計(jì)數(shù)目標(biāo)基因與參照基因(拷貝數(shù)為1的基因,例如RNaseP)的數(shù)目, 計(jì)算比值,直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達(dá)到極高的拷貝數(shù)分辨精度。除此之外,dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達(dá)研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待,而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標(biāo)準(zhǔn)品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應(yīng)用方向上,已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能。液體活檢:早篩、用藥、監(jiān)測、復(fù)發(fā)。上海永諾數(shù)字PCR解決方案
檢測數(shù)量一次可達(dá)96個(gè)樣品。南京永諾數(shù)字PCR品牌
數(shù)字PCR為juedui定量,qPCR為相對定量,數(shù)字PCR較qPCR更精細(xì)、更靈敏。所以說,未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補(bǔ)充,在部分領(lǐng)域逐步替代熒光定量PCR。未 來這些領(lǐng)域?qū)V泛應(yīng)用到數(shù)字PCR:科研:高校(生命科學(xué)學(xué)院、環(huán)境學(xué)院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院)等。醫(yī)院:病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗(yàn)科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心:研究院單位、疾控中心、海關(guān)(出入境檢驗(yàn)檢疫)、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè):第三方檢測機(jī)構(gòu)、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。南京永諾數(shù)字PCR品牌
浚和(上海)儀器科技有限公司依托可靠的品質(zhì),旗下品牌YAMATO,KASHIYAMA,HORIBA,KEM以高質(zhì)量的服務(wù)獲得廣大受眾的青睞。業(yè)務(wù)涵蓋了真空泵,噴霧干燥機(jī),高溫?zé)o氧烘箱,滅菌器等諸多領(lǐng)域,尤其真空泵,噴霧干燥機(jī),高溫?zé)o氧烘箱,滅菌器中具有強(qiáng)勁優(yōu)勢,完成了一大批具特色和時(shí)代特征的儀器儀表項(xiàng)目;同時(shí)在設(shè)計(jì)原創(chuàng)、科技創(chuàng)新、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范等方面推動(dòng)行業(yè)發(fā)展。隨著我們的業(yè)務(wù)不斷擴(kuò)展,從真空泵,噴霧干燥機(jī),高溫?zé)o氧烘箱,滅菌器等到眾多其他領(lǐng)域,已經(jīng)逐步成長為一個(gè)獨(dú)特,且具有活力與創(chuàng)新的企業(yè)。值得一提的是,浚和儀器致力于為用戶帶去更為定向、專業(yè)的儀器儀表一體化解決方案,在有效降低用戶成本的同時(shí),更能憑借科學(xué)的技術(shù)讓用戶極大限度地挖掘YAMATO,KASHIYAMA,HORIBA,KEM的應(yīng)用潛能。