研究方向低豐度及稀有序列的精確定量目前對于低豐度目標(biāo)序列的檢測,定量PCR、雜交、毛細(xì)管測序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾,使得檢測靈敏度及精確性都達(dá)不到精細(xì)定量的要求(如定量PCR檢測中Ct值大于33的情況下,其重復(fù)性就不是很高),而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過**的微滴化處理,使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來,從而提高了檢測的靈敏度及重復(fù)性。此外,由于樣品微滴化處理的同時,也將樣品中可能存在的***劑進(jìn)行了分裝,提高了數(shù)字PCR擴(kuò)增對于***劑的耐受程度,因此可具體應(yīng)用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對**核酸標(biāo)記物的檢測。一般而言,毛細(xì)管電泳和定量PCR的檢測靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達(dá)到1%;而ddPCR的檢測下限為0.001%??墒褂玫谌絇CR反應(yīng)液,配備PCR A300(溫度范圍4°C-98°C,擴(kuò)增模塊溫控精度±0.2°C)。寧波流式數(shù)字PCR代理商
研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學(xué)研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析,現(xiàn)階段有不同的方法或技術(shù)來進(jìn)行研究:如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統(tǒng)計(jì)法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學(xué)的問題而不能獲得精確的定量,而微滴式 數(shù)字PCR系統(tǒng)通過對樣品的微滴化處理及目標(biāo)因子的***拷貝數(shù)定量,為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新的技術(shù)。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標(biāo)本中的DNA,有正常脫落體細(xì)胞和病變脫落細(xì)胞兩種來源,前者的量遠(yuǎn)大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細(xì)胞DNA的干擾,實(shí)現(xiàn)**標(biāo)記物的有效檢測,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴(kuò)增檢測等,應(yīng)用于**精細(xì)醫(yī)學(xué)的伴隨診斷。上海永諾數(shù)字PCR解決方案采用微滴式技術(shù)高達(dá)100,000個的微滴。
數(shù)字PCR(DigitalPCR-dPCR)技術(shù)是一種新的核酸檢測和定量方法,與傳統(tǒng)定量PCR(qPCR)技術(shù)不同,數(shù)字PCR采用***定量的方式,不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本,直接檢測目標(biāo)序列的拷貝數(shù)。由于這種檢測方式具有比傳統(tǒng)qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性,dPCR迅速得到***的應(yīng)用,這項(xiàng)技術(shù)在極微量核酸樣本檢測、復(fù)雜背景下稀有突變檢測和表達(dá)量微小差異鑒定方面變現(xiàn)出的優(yōu)勢已被普遍認(rèn)可,而其在基因表達(dá)研究、microRNA研究、基因組拷貝數(shù)鑒定、**標(biāo)志物稀有突變檢測、致病微生物鑒定、轉(zhuǎn)基因成分鑒定、NGS測序文庫精確定量和結(jié)果驗(yàn)證等諸多方面具有的廣闊應(yīng)用前景已經(jīng)受到越來越多的關(guān)注。
數(shù)字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測的新興技術(shù)手段,于20世紀(jì)由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中,使每個反應(yīng)單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴(kuò)增的同時,加入可檢測熒光。待擴(kuò)增結(jié)束時,使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采集每個反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測樣本中的核酸濃度?;诜忠悍绞降牟煌?,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)。FAM、VIC雙通道熒光檢測。
數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對每個單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。 單張芯片一次可處理8個樣本。寧波微流控芯片數(shù)字PCR現(xiàn)貨
MicroDrop?數(shù)字PCR平臺是由永諾生物自主研發(fā)并已投入生產(chǎn)的微滴式數(shù)字PCR檢測系統(tǒng)。寧波流式數(shù)字PCR代理商
MicroDrop-100數(shù)字PCR有什么優(yōu)勢?1.MicroDrop-100數(shù)字PCR所產(chǎn)生的微滴數(shù)是目前市面微滴式數(shù)字PCR里相對較高的產(chǎn)品,可將樣品分割為10萬份,更符合泊松分布數(shù)學(xué)模型,可以忽略更多的誤差因素;此外,高微滴數(shù)在多重?cái)?shù)字PCR上的優(yōu)勢也會更大。2.數(shù)字PCR可選全中文界面,對國內(nèi)用戶十分友好,可以說,拿到即可上手。3.數(shù)字PCR是一個開放性的平臺,在試劑方面除了產(chǎn)品列表上的檢測試劑盒,還有通用的反應(yīng)預(yù)混液,客戶自行設(shè)計(jì)引物探針即可進(jìn)行新項(xiàng)目的檢測。此外,永諾非常歡迎進(jìn)行定制、合作開發(fā)檢測試劑盒。寧波流式數(shù)字PCR代理商
浚和(上海)儀器科技有限公司依托可靠的品質(zhì),旗下品牌YAMATO,KASHIYAMA,HORIBA,KEM以高質(zhì)量的服務(wù)獲得廣大受眾的青睞。業(yè)務(wù)涵蓋了真空泵,噴霧干燥機(jī),高溫?zé)o氧烘箱,滅菌器等諸多領(lǐng)域,尤其真空泵,噴霧干燥機(jī),高溫?zé)o氧烘箱,滅菌器中具有強(qiáng)勁優(yōu)勢,完成了一大批具特色和時代特征的儀器儀表項(xiàng)目;同時在設(shè)計(jì)原創(chuàng)、科技創(chuàng)新、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范等方面推動行業(yè)發(fā)展。隨著我們的業(yè)務(wù)不斷擴(kuò)展,從真空泵,噴霧干燥機(jī),高溫?zé)o氧烘箱,滅菌器等到眾多其他領(lǐng)域,已經(jīng)逐步成長為一個獨(dú)特,且具有活力與創(chuàng)新的企業(yè)。值得一提的是,浚和儀器致力于為用戶帶去更為定向、專業(yè)的儀器儀表一體化解決方案,在有效降低用戶成本的同時,更能憑借科學(xué)的技術(shù)讓用戶極大限度地挖掘YAMATO,KASHIYAMA,HORIBA,KEM的應(yīng)用潛能。