糖原染色(PAS):(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷通過(guò)顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。北京品牌糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無(wú)需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì),在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來(lái)很簡(jiǎn)單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒平均價(jià)格過(guò)碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過(guò)染。
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類。過(guò)碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等。
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過(guò)碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎┎籗chiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來(lái)催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。
彈力染色應(yīng)用:(1)動(dòng)靜脈的辨認(rèn):在血管病變時(shí)是動(dòng)脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認(rèn)時(shí),彈力纖維染色有助于辨認(rèn)。有彈力板者為動(dòng)脈,有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強(qiáng),故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見(jiàn)瘤樣病變內(nèi)有大量彈力纖維增生,非真性。(3)心血管先天性彈力組織增生,這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動(dòng)脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。(4)彈力纖維損傷性疾?。哼@組疾病有肺氣腫、、大動(dòng)脈中層炎癥等,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷。取材必須新鮮,這一點(diǎn)對(duì)于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要。哪家提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。北京品牌糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無(wú)色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。北京品牌糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過(guò)程,對(duì)疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來(lái)鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...