糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應(yīng),染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,SO濃度高,染色時間適當(dāng)縮短;環(huán)境溫度高,染色時間也應(yīng)適當(dāng)縮短,反之則需適當(dāng)延長反應(yīng)時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。將動物殺死后迅速取出所需要的組織。江蘇咨詢糖原染色試劑盒報價
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高)。其中較為常用的是組織化學(xué)法。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒量大從優(yōu)亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥。
纖維染色:彈力纖維是結(jié)締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維,在創(chuàng)傷修復(fù)中一般在4—5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大,容易伸展,在結(jié)締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成,新鮮時呈黃色又稱黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng),折光性強(qiáng),含量多時在HE染片上呈折光性強(qiáng)的粉紅色,量少的不顯色。故量多時與膠原纖維不易區(qū)別,量少則不能觀察。彈力纖維染色主要用于觀察彈力纖維有無增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變。
PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化。
糖原染色――檢查項目的注意細(xì)節(jié):其判斷標(biāo)準(zhǔn)隨細(xì)胞不同而異,一般分為5級,即0~4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項目結(jié)果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。糖原染色應(yīng)用的范圍比較廣。福建哪家提供糖原染色試劑盒服務(wù)電話
過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過染。江蘇咨詢糖原染色試劑盒報價
糖原染色(過碘酸-雪夫反應(yīng))原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)粒系:原粒細(xì)胞糖原含量很低,隨著細(xì)胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細(xì)胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細(xì)胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆粒或團(tuán)塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細(xì)胞白血?。涸剂<?xì)胞呈陰性或弱陽性反應(yīng),以彌散性為主;急性淋巴細(xì)胞白血病原、幼淋巴細(xì)胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應(yīng)。江蘇咨詢糖原染色試劑盒報價
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...