PAS染色試劑配制及染色方法：1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例，均來自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液，其配方：無水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸（HIO）溶于100mL蒸餾水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：過碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸鈉0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液（Schiff氏液）在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL，煮沸后，在保持微沸的情況下，加入堿性品紅2.5g，并不斷搖動(dòng)約5min（勿使之沸騰），使堿性品紅徹底溶解（溶解液為深紅色）。冷卻到50℃時(shí)，過濾，加入1N鹽酸50mL，再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g，塞住瓶口，搖動(dòng)容器以充分混合（此時(shí)顏色明顯變淡），然后避光放置或冰箱內(nèi)24h過碘酸氧化時(shí)間不宜過久，氧化時(shí)的溫度以18～22℃佳。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面：盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能較好地保存糖原，但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象，多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對(duì)組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存，是針對(duì)糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定，以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格加入少量活性碳并震蕩、過濾，此時(shí)溶液應(yīng)為無色。

糖原染色試劑盒（1）急性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng)；缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng)；急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、良性淋巴細(xì)胞增多癥、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)。巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等，幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng)。偶有個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。（2）幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞，巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)；霍奇金細(xì)胞呈弱陽性或陰性反應(yīng)。（3）幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞，腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。

糖原D-PAS染色液：使用方法：1、兩張相同切片，二甲苯脫蠟，梯度乙醇入水。2、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h。另一張不用淀粉酶溶液處理，入水中1h作為對(duì)照。3、流水沖洗兩張切片各5～10min。4、入過碘酸溶液，室溫放置5～8min，一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次，再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent，置于室溫陰暗處浸染10～20min。7、自來水沖洗10min。8、入Mayer蘇木素染色液，染細(xì)胞核1～2min。9、(可選)酸性乙醇分化液分化2～5s。10、自來水沖洗10～15min，更換蒸餾水清洗使其返藍(lán)。11、二甲苯透明，中性樹膠封固。適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。

染色的一般原則：因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同，因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測(cè)均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽對(duì)照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC，EGFP激發(fā)光：488nm發(fā)射光：525nm;使用面較廣，價(jià)格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm，此熒光的激發(fā)效率較佳，故此熒光得到的信號(hào)較強(qiáng)；檢測(cè)某些弱表達(dá)的抗原，推薦使用此熒光素。價(jià)格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm，發(fā)射光660nm，在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上，此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格

切取材料時(shí)刀要銳利，避免因擠壓細(xì)胞使其受到損傷。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格

GUS染色步驟：1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保溫1小時(shí)至過夜。2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次，至陰性對(duì)照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察，白色背景上的藍(lán)色小點(diǎn)即為GUS表達(dá)位點(diǎn)。注：用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如，擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片（1-3mm）。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí)，可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格