糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細胞內多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊伍,保證實驗快速、有效的完成。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產廠家
糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應用唾液江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產廠家生物膜與細胞器的研究。
糖原染色(過碘酸-雪夫反應)原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細胞的染色反應粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆?;驂K狀。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應呈粗大的紫色顆?;驁F塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應,以彌散性為主;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應。
糖原染色生物技術優(yōu)勢:(1)擁有針對不同組織的特殊固定液;(2)擁有日本進口的各種染料,保證切片染色效果;(3)擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊伍,保證實驗快速、有效的完成。實驗樣本要求:(1)植物材料在選擇時須盡可能不損傷植物體或所需要的部分;(2)動物材料取用時需對動物施以麻醉,常用的麻醉劑有氯仿和,或將動物殺死后迅速取出所需要的組織;(3)取材必須新鮮,這一點對于從事細胞生物學研究尤為重要,應該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液,固定液與組織塊的體積比應在10:1;(4)切取材料時刀要銳利,避免因擠壓細胞使其受到損傷;(5)切取的材料應小而薄,便于固定液迅速滲入內部。一般厚度不超過3mm,大小不超過5×5m㎡。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
注意事項:染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時,較好一張玻片撈一個組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時也利于脫蠟(有時二甲苯的液面低于組織片的時候,達不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時,一定要注意組織切片脫蠟務必要徹底(脫蠟時間不能太少)以使脫蠟后的組織達到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時染色液未能充分與組織接觸,較終導致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙,以避免脫蠟時把標簽紙也浸沒,致使標簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。動物材料取用時需對動物施以麻醉,常用的麻醉劑有氯仿和。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產廠家
取材必須新鮮,這一點對于從事細胞生物學研究尤為重要。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產廠家
糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內容十分普遍,主要包括。①細胞核、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究。③細胞骨架體系的研究。④細胞增殖及其調控。⑤細胞分化及其調控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化。⑧細胞工程。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質,因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質和某些酸性物質,以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強氧化劑。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產廠家
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網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內,血管周圍以及造血部位,內分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標,尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...