糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。北京咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽性反應(yīng)的程度也很強。有時紅細(xì)胞也呈陽性反應(yīng)。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高。有時紅細(xì)胞也可呈陽性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),有時*個別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)湖南品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。
PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞或Reed-Sternberg細(xì)胞,前者呈強陽性反應(yīng),后者呈弱陽性或陰性反應(yīng)。②幫助鑒別戈謝細(xì)胞和尼曼-匹克細(xì)胞,前者呈強陽性反應(yīng),后者呈弱陽性反應(yīng),且空泡中心為陰性反應(yīng)。③幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,后者呈強陽性反應(yīng),陽性反應(yīng)物質(zhì)為紅色細(xì)顆粒狀或粗顆粒狀,有時呈紅色塊狀。白細(xì)胞系統(tǒng):急性淋巴細(xì)胞白血病時白血病性原始淋巴細(xì)胞的陽性反應(yīng)物質(zhì)為紅色粗顆粒狀或紅色塊狀,底色不紅;急性粒細(xì)胞白血病時,白血病性原始粒細(xì)胞的陽性反應(yīng)物質(zhì)呈均勻分布的紅色細(xì)顆粒狀或呈均勻紅色;急性單核細(xì)胞白血病時,白血病性原始單核細(xì)胞的陽性反應(yīng)物質(zhì)呈紅色細(xì)顆粒狀,彌散分布,有時在胞漿的邊緣處顆粒較粗大。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團或沒有氣味,則不能用,配制時使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過對比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時氧化時間適當(dāng)縮短;如果染色時環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時間長,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此,室溫較高時可適當(dāng)縮短反應(yīng)時間??梢杂^察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。
GUS染色步驟:1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保溫1小時至過夜。2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次,至陰性對照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察,白色背景上的藍(lán)色小點即為GUS表達位點。注:用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。巨幼紅細(xì)胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性。天津糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹
可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。北京咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。北京咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
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網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...