細(xì)胞冷凍的原理：細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。隨著細(xì)胞凍存數(shù)量增加，凍存流程簡化也成為必然趨勢，因此無血清非程序降溫凍存液應(yīng)運(yùn)而生。徐州天津無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”，這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多用二甲基亞砜（DMSO）作為保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性；緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶對細(xì)胞的物理損傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。血清完全細(xì)胞凍存液，通用于各種動物細(xì)胞株。特別配方有效提高細(xì)胞存活率和活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等污染，確保凍存細(xì)胞安全。適合用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。上海武漢無血清細(xì)胞凍存液無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。

使用方法：1)細(xì)胞超凈臺無菌環(huán)境，1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞，細(xì)胞終濃度為5×106個/ml，混懸液體積為200μl。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷，逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl，細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫，降溫速率為1℃/min，較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對比，具體結(jié)果如附圖1所示，可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率。其他實(shí)施例通過與比較例1進(jìn)行比較，也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率，同時還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體，細(xì)菌，朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染。

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：凍存細(xì)胞系以備將來之用時，必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明，以便獲得較佳結(jié)果。在細(xì)胞處于生長期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請注意較佳凍存條件取決于所用細(xì)胞系。細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器，使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護(hù)劑無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲。

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞凍存的原理：細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。無血清細(xì)胞凍存液：降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量。鄭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦

細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求。徐州天津無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似，機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成，但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜，內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細(xì)胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡，這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度的降低，細(xì)胞外部的水分會首先結(jié)冰，從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，在復(fù)溫時，大量水分會因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。徐州天津無血清細(xì)胞凍存液