PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。對臨床樣本進(jìn)行染色,以便樣本的進(jìn)一步篩查和檢測。湖南糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液浙江糖原染色試劑盒銷售廠家如PAS染色可顯示糖原、黏液等。
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置~
糖類染色:糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)、酸性粘液物質(zhì)、粘蛋白及粘脂質(zhì)。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變,故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。(1)肝及心肌糖原沉著癥的診斷:糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。(2)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。(3)高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別:前者為陽性、后者為陰性,做此染色較易鑒別。(4)骨內(nèi)骨外尤文氏肉瘤的診斷:此瘤80%細(xì)胞內(nèi)有較多糖原,糖原染色為陽性,所以糖原染色為陽性(大多數(shù)細(xì)胞)可以協(xié)助診斷。(5)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色。
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:1、特異性高、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法;特異、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質(zhì)。剛果紅染色作為經(jīng)典的方法,比天狼星紅、甲基紫等其他方法都要實用。淀粉樣物質(zhì)(剛果紅及天狼星紅染色)。2、染色流程相對簡便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,無論對于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問題而影響染色結(jié)果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便、省時,同時陽性著染對比度也很明顯。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。北京正規(guī)糖原染色試劑盒哪里買
常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行特殊染色。湖南糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
注意事項:染色時:①染色時必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色。②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時,務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。在染色時,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出湖南糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...