PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置。過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家供應(yīng)
特染的應(yīng)用價值:現(xiàn)代病理學中免疫組織化學技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細胞及分子生物學技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學技術(shù)則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學診斷中具有重要的應(yīng)用價值。比如,當細胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現(xiàn)均一化學物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學技術(shù)區(qū)別起來很簡單,所以組織化學技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術(shù)。上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家供應(yīng)骨骼肌活檢臨床操作及染色質(zhì)量控制。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動到細胞一側(cè)的現(xiàn)象,多數(shù)人認為是由于固定劑把細胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學實驗技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等。細胞核、染色體以及基因表達的研究。
注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時,務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。在染色時,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家供應(yīng)
無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化。上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家供應(yīng)
纖維染色:彈力纖維是結(jié)締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維,在創(chuàng)傷修復中一般在4—5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大,容易伸展,在結(jié)締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成,新鮮時呈黃色又稱黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng),折光性強,含量多時在HE染片上呈折光性強的粉紅色,量少的不顯色。故量多時與膠原纖維不易區(qū)別,量少則不能觀察。彈力纖維染色主要用于觀察彈力纖維有無增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變上??诒玫奶窃旧噭┖袕S家供應(yīng)
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標,尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...