慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入,在美國已經(jīng)開展了臨床研究,效果非常理想,因此具有廣闊的應(yīng)用前景。慢病毒也被guang fan地應(yīng)用于表達RNAi的研究中。由于有些類型細胞轉(zhuǎn)染試劑瞬時轉(zhuǎn)染效果差,轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對基因表達的抑制作用通常是短暫的,因而使其應(yīng)用受到較大的限制。近幾年LentiBOOST作為一種無毒性的化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑guang fan引起關(guān)注。LentiBOOST通過與細胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。研究證實LentiBOOST在不影響轉(zhuǎn)導(dǎo)細胞存活、增殖及分化能力的前提下,提高小鼠T細胞、HSCs和人HSCs的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負責(zé)。加入什么試劑可以提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率?增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案
人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,歡迎咨詢官方代理商上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bioHSC細胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強策略新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,是原病毒。
慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入,在美國已經(jīng)開展了臨床研究,效果非常理想,因此具有廣闊的應(yīng)用前景。慢病毒也被guang fan地應(yīng)用于表達RNAi的研究中。由于有些類型細胞轉(zhuǎn)染試劑瞬時轉(zhuǎn)染效果差,轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對基因表達的抑制作用通常是短暫的,因而使其應(yīng)用受到較大的限制。采用事先在體外構(gòu)建能夠表達siRNA的載體,然后轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄siRNA的策略,不但使脂質(zhì)體有效轉(zhuǎn)染的細胞種類增加,而且對基因表達抑制效果也不遜色于體外合成siRNA,在長期穩(wěn)定表達載體的細胞中,甚至可以發(fā)揮長期阻斷基因表達的作用。
在病毒附著到宿主細胞后,病毒RNA滲透進宿主細胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,RNA的兩端都進行了復(fù)制,產(chǎn)生了長末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。原病毒在細胞周期過程中復(fù)制,然后傳遞給子細胞。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,慢病毒可以有效地ganran不分裂的細胞,這使它們更有吸引力用于基因zhiliao。Zuihou,子代病毒基因組從整合的DNA轉(zhuǎn)錄到細胞質(zhì)中。病毒粒子從質(zhì)膜出芽獲得其脂質(zhì)包膜。在出芽過程中,病毒蛋白被病毒蛋白酶裂解,產(chǎn)生成熟的ganranxingbing毒粒子。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可使用LentiBOOST產(chǎn)品。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑是用來干什么的?
LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細胞類型,包括CD34+造血干細胞(HSCs),間充質(zhì)干細胞(MSCs),神經(jīng)干細胞,原代T細胞,NK細胞和成纖維細胞等,對于難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠T細胞亦有效。已成為改進體外基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的理想選擇。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!用什么試劑可以做慢病毒轉(zhuǎn)染么?Sirion慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)怎么樣
慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑是什么呢?增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案
慢病毒ganran效率受到多種因素的影響,首先,考慮病毒包裝制備是否存在問題,比如外源基因是否正確,病毒滴度是否合格等。其次,考慮病毒運輸和保存方式是否得當,解凍病毒一定要在冰上進行,避免反復(fù)凍融,否則會影響病毒滴度;-80℃保存半年以上需要重新測定滴度。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長狀態(tài)是達到高ganran效率的保證,一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細胞進行g(shù)anran可提高ganran效率。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,...
【詳情】人間充質(zhì)干細胞(MSCs)的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大...
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【詳情】慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層...
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【詳情】為了達到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。近幾年LentiBOOST作為一種...
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