1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。更多產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑的主要分子量是多少呢?SigmaPEI轉染試劑生產商
細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因,無論哪一種都需要特定的設備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都相對較高。近期還有PEIfree申請活動,歡迎咨詢上海曼博生物!歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“申請PEI”,即可參加活動!更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!福建PEI轉染試劑為什么PEI轉染試劑配制的過程中要加酸?
KyforaBiobyPolysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產品,因其較高的轉染效果,已廣泛應用于工業(yè)化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量為25000的線性PEI即KyforaBiobyPolysciences23966(PEI25K)轉染效率表現(xiàn)優(yōu)良。請關注我們的公眾號:Mine-bio
PEI在于可以應用于體內試驗。當初試驗經費很有限,被逼無奈只能放棄脂質體2000,選擇PEI,以至于相當長的時間內,轉染試驗都不順利。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書,所用質粒盡量去內2.轉染時,一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中,順序不可錯,輕微混勻,靜止20min3.轉染后4小時,一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當提高。PS:事實證明,PEI是可行的,已經做出穩(wěn)定細胞系了。近期還有PEIfree申請活動,歡迎咨詢上海曼博生物!歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“申請PEI”,即可參加活動!更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!有人知道PEI轉染試劑的價格嗎?
產品簡介Transporter5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉染試劑)溶液,由PEIMAX配置而成,采用0.1umPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞,并且Transporter5-DNA復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,有效提高轉染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產。Transporter5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲(SF9、SF21)等真核細胞系,可作用于大到135,000個核苷酸的質粒,所以較大的質粒也可以成功地轉染。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間,加快項目進度。經過嚴格的性能檢測,確保品質,在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產的轉染試劑。更多關于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物!使用PEI轉染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因?高性價比PEI轉染試劑使用比例
PEI轉染試劑主要包括25K和40K的分子量?SigmaPEI轉染試劑生產商
材料:質粒DNA指數生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆谩7椒ǎ?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當的完全培養(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。歡迎咨詢上海曼博生物。SigmaPEI轉染試劑生產商
抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產品,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,...
【詳情】注意事項質粒質量:請務必使用高質量轉染級無內質粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒...
【詳情】KyforaBiobyPolysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethyleni...
【詳情】產品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimine...
【詳情】瞬時轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化...
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