1、細(xì)胞分盤(pán)：通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿，使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。2、制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應(yīng)總體積為例。準(zhǔn)備兩支1.5mL離心管，一管將質(zhì)粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲(chǔ)存液稀釋成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)基中，輕輕搖動(dòng)平皿混勻，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲(chǔ)存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致。3、培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預(yù)熱的含有血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)，16h左右可以觀(guān)測(cè)到報(bào)告基因的表達(dá)?？缮暾?qǐng)PEI試用裝，曼博生物公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！哪里可以買(mǎi)到23966-1？上海PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝無(wú)批次差異

PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)勢(shì)：高質(zhì)量的R&D和cGMP等級(jí)產(chǎn)品l高轉(zhuǎn)染效率，低細(xì)胞毒性；MAXgene符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)和ISO13485質(zhì)量管理體系；經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的生產(chǎn)工藝；全合成，無(wú)動(dòng)物源成分；高性?xún)r(jià)比，適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段l嚴(yán)格控制批間穩(wěn)定性；國(guó)內(nèi)外已有多個(gè)項(xiàng)目進(jìn)入臨床階段l具備殘留檢測(cè)方法。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑，大量科學(xué)家選擇PEI MAX ，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái)，經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開(kāi)研究和出版文獻(xiàn)表明，在HEK293、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強(qiáng)。PEI MAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio，相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences，后續(xù)購(gòu)買(mǎi)請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。廣東商業(yè)化PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種穩(wěn)定的具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子。

PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)勢(shì)：高質(zhì)量的R&D和cGMP等級(jí)產(chǎn)品l高轉(zhuǎn)染效率，低細(xì)胞毒性；MAXgene符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)和ISO13485質(zhì)量管理體系；經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的生產(chǎn)工藝；全合成，無(wú)動(dòng)物源成分；高性?xún)r(jià)比，適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段l嚴(yán)格控制批間穩(wěn)定性；國(guó)內(nèi)外已有多個(gè)項(xiàng)目進(jìn)入臨床階段l具備殘留檢測(cè)方法。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑，大量科學(xué)家選擇PEI MAX ，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái)，經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開(kāi)研究和出版文獻(xiàn)表明，在HEK293、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強(qiáng)。PEI MAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請(qǐng)PEI試用裝，歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！

1.對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。歡迎關(guān)注：Mine-bio，回復(fù)“申請(qǐng)PEI”即可申領(lǐng)試用裝！有哪些不錯(cuò)的PEI轉(zhuǎn)染試劑？

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品，因其較高的轉(zhuǎn)染效果，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子，每相隔二個(gè)碳原子，即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。有實(shí)驗(yàn)證明，分子量為25000的線(xiàn)性PEI即Polysciences23966（PEI25K）轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良。產(chǎn)品特點(diǎn)：適用于生產(chǎn)mABs、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV、LV、BEV)；在HEK293、CHO和Sf9細(xì)胞系中高度有效；適用于從研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段；可預(yù)測(cè)，可大規(guī)模生產(chǎn)；兩周內(nèi)即可生成大量目標(biāo)蛋白或病毒；高轉(zhuǎn)染效率；大量已發(fā)表的文獻(xiàn)支持。如想申請(qǐng)PEI試用裝，歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！如何優(yōu)化PEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染時(shí)的比例？上海PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝無(wú)批次差異

有誰(shuí)用過(guò)Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑？上海PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝無(wú)批次差異

PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮，可制備大量轉(zhuǎn)染試劑Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品，因其較高的轉(zhuǎn)染效果，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子，每相隔二個(gè)碳原子，即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線(xiàn)性聚乙烯亞胺瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學(xué)家選擇PEIMAX，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái)，經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開(kāi)研究和出版文獻(xiàn)表明，在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強(qiáng)。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達(dá)細(xì)胞體系，實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過(guò)度。而且與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本（部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本）。關(guān)注公眾號(hào)可申請(qǐng)?jiān)囉茫篗ine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！上海PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝無(wú)批次差異