x @ -FAgo過(guò)濾器（或等效過(guò)濾器）建議在保溫瓶和真空源之間使用，例如o保護(hù)真空源免受污染?！駥⒄婵掌窟B接到真空源的真空管●前肢●封閉劑，例如脫脂/低脂干奶（0.5％以下），酪蛋白，牛血清白蛋白（BSA）或其他市售的封閉劑，例如blok * -CH緩沖液（請(qǐng)參閱表5）抗體（單克隆和/或多克?。瑱z測(cè)試劑●洗滌緩沖液：Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液，pH 7.4，補(bǔ)充了Tween @ 20表面活性劑（TBST）或PBST）●轉(zhuǎn)移蛋白的印跡吸筆座尺寸比較大印跡尺寸（厘米）多印跡4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般準(zhǔn)則●如果蛋白質(zhì)已經(jīng)轉(zhuǎn)移到已經(jīng)干燥的PVDF膜上，請(qǐng)用100％重新潤(rùn)濕印跡甲醇，然后在組裝前用蒸餾水沖洗。如果蛋白質(zhì)已轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜干燥后，用蒸餾水重新上海益啟生物超濾杯訂購(gòu)方便。黃浦區(qū)Merck儀器代理價(jià)

15分鐘。圖4.擴(kuò)展孵化（過(guò)夜）：SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測(cè)b。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測(cè)將A431細(xì)胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）轉(zhuǎn)移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5％NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒，標(biāo)準(zhǔn)印跡為分鎖了1個(gè)小時(shí)。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，對(duì)于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔（AP132P），將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后，將標(biāo)準(zhǔn)印跡孵育1小時(shí)。 圖5.擴(kuò)展孵化（1小時(shí)）：，SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時(shí)協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議與標(biāo)準(zhǔn)免黃浦區(qū)Merck儀器代理價(jià)Merck樣本制備儀上海授權(quán)代理商。

疫檢測(cè)對(duì)照，茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細(xì)胞裂解液（10-0.63 ug）被轉(zhuǎn)移到Immobilon8-P膜上。印跡被阻止補(bǔ)充有0.5％脫脂奶粉（NFDM）的Tris緩沖鹽水含0.1％Tweeno 20表面活性劑（TBST），并用一級(jí)抗B-Tubulin進(jìn)行探測(cè)（MAB3408）和次級(jí)HRP偶聯(lián)的山羊螞蟻（AP1 24P）在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。維護(hù)SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)清理去除協(xié)議每次使用時(shí)應(yīng)清潔SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)。清理去除鹽堿中的鹽或污染物和管道，抽吸真空并通過(guò)系統(tǒng)沖洗散去的水。注：請(qǐng)勿對(duì)SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)進(jìn)行高壓滅菌?？梢圆鹦犊蚣?，并用中性清潔劑洗滌，然后用蒸餾水徹底沖洗。風(fēng)干。要拆卸框架，請(qǐng)使用右側(cè)的藍(lán)色夾子調(diào)整框架的方

PO緩沖液WBAVDP零零15零零毫升BLOT-QuickBlockerTM試劑WB57-175GM175克;Probumin@牛血清白蛋白8204731零零克5％堿溶性酪蛋白225毫升免疫組織化學(xué)（IHC）程序的組件SNAPi.d.@2.0免疫組織化學(xué)框架SNAP2FRIHC1個(gè)SNAPi.d.92.0IHC幻燈片固定器SNAP2SH2個(gè)配件過(guò)濾鉗，鈍端，不銹鋼XX62零零零零6P31L真空過(guò)濾瓶XX10047051個(gè)SNAPi.d.@2.0墨粉輥SNAP2RL1個(gè)高輸出泵，115伏，60赫茲WP621156零1個(gè)高輸出泵，100伏，50/60HzWP62100601個(gè)高輸出泵，220伏，50赫茲WP6222零5零1個(gè)真空管，內(nèi)徑6.4毫米x3m（內(nèi)徑4/4英寸x10英尺）MS上海益啟生物Merck儀器訂購(gòu)方便。

中移出并在恒定的溫度下孵育顫抖。如果需要過(guò)度保溫，建議冷藏。雖然表面上的污點(diǎn)支架可能看起來(lái)部分干燥，印跡不會(huì)變干，因?yàn)槿芤喊诳蚣苤?。注意：如果長(zhǎng)時(shí)間處理多個(gè)印跡，則可以堆疊印跡固定框架減少工作空間?？蛇x：如果要回收一抗，請(qǐng)先將抗體回收盤(pán)放入底座，然后再繼續(xù)執(zhí)行步驟4。4.延長(zhǎng)孵育時(shí)間后，將框架放回底座上，卸下蓋子，然后按照步驟8進(jìn)行操作。通用議定書(shū)第12條。注意：SNAP i.d不需要延長(zhǎng)二抗的孵育時(shí)間。 2.0系統(tǒng)。建議使用5倍濃度的二抗，持續(xù)10分鐘?？贵w回收1.執(zhí)行《通用議定書(shū)》的步驟1至5，但將真空時(shí)間增加到2分鐘，以確保所有的封閉溶液都已從框架的凹槽和通道中移除。2.從底座上取下印跡固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有殘留液體。紙巾。3.將抗體收集盤(pán)放入底座，確?？贵w上的定上海益啟生物的微流控細(xì)胞芯片分析儀公司電話。黃浦區(qū)Merck儀器代理價(jià)

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位孔收集盤(pán)與底座中的定位銷對(duì)齊。注意：對(duì)于Mini和Midi框架，將單個(gè)清潔托盤(pán)放置在底座的**。對(duì)于多印跡如圖所示，在框架上放置兩個(gè)收集托盤(pán)。在MultiBlot框架中運(yùn)行單點(diǎn)印跡時(shí)，將空白的卡放在空的孔中，然后將孔下方的收集盤(pán)上有污點(diǎn)。4.將污漬固定框架放回底座上的位置。5.按照《通用規(guī)程》第6步和第7步中的指示，應(yīng)用一抗并進(jìn)行孵育。6.孵育10分鐘后，打開(kāi)真空并等待一分鐘，以確保所有螞蟻都具有被收集。注意：當(dāng)同時(shí)處理兩個(gè)框架時(shí)，請(qǐng)先對(duì)一側(cè)進(jìn)行吸塵，然后再對(duì)另一側(cè)進(jìn)行吸塵。這確保在每個(gè)框架上具有完全的真空力，并改善體積回收率。7.關(guān)閉真空并卸下框架。卸下抗體收集盤(pán)。8.將抗體轉(zhuǎn)移到合適的容器中進(jìn)行存儲(chǔ)或分析。9.將印跡保持架放回原位，并繼續(xù)執(zhí)行通用規(guī)程的步驟9。 性能證明圖1. B-管蛋黃浦區(qū)Merck儀器代理價(jià)