【操作步驟】 按廠商的使用指南用兩塊干凈的玻璃,平板和 0.75 mm 墊片組裝電泳裝置中的玻璃平板夾層,并固定在灌膠支架上。 按表 1 配制分離膠液體并脫氣,然后加入 10% 的 (NH4)2S2O8 和 TEMED,輕輕攪拌混勻。 ? 按所需分離的蛋白質(zhì)分子大小選擇合適的 C3H5NO 百分比濃度,一般地,5% 的凝膠可用于 60~200kDa 的 SDS 變性蛋白質(zhì)分子的分離,10% 用于 16~70kDa,15% 用于 12~45kDa。 用一根巴斯德吸管立即將分離膠液體沿夾層中一條墊片的邊緣加入于玻璃平板夾層中,離膠,并被篩分而依各自的大小得到分離。MerckWB實驗加速器可大幅度減少實驗時間。青浦區(qū)加速完成實驗時間WB實驗加速器代理商
至凝膠約 5 cm 高為止。樣品體積少于 10μl 不需灌制積層膠。 4)用另一根已斯德吸管,先從一邊的墊片,再從另一邊墊片往夾層的液面頂部緩緩加入一層水飽和 C4H10O(厚約 1 cm)。讓凝膠在室溫聚合 30 min。聚合后,可見在頂層C4H10O與凝膠的界面間有一清晰的折光線,膠的聚合失敗往往問題在于過硫酸按或 TEMED,或兩者都有。 5)傾去頂層的C4H10O,并以 1×Tris-Cl/SDS, pH8.8 緩沖液沖洗凝膠的頂部表面, 盡量用吸水紙吸干。 6)按表 2 配制積層膠液體,用吸管將液體沿一條墊片加入到玻璃平板夾層,直至夾層的頂部。黃浦區(qū)可用于IHC實驗加速WB實驗加速器一級代理上海益啟生物的加速完成WB實驗和IHC實驗詢價公司電話。
?20的tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液中制備表面活性劑,以降低表面張力并確保封閉劑在印跡架上均勻分布表面。?為確保抗體在孵育步驟中均勻分布,請在封閉液中稀釋抗體,包含Tween?20表面活性劑。 如何使用SNAPi.d.o2.0系統(tǒng) 系統(tǒng)設置 1.將SNAPi.d.92.0底座放在水平工作臺上。2.通過推動管道末端的聯(lián)接插件,將真空管道連接至系統(tǒng)背面。插入系統(tǒng)基座背面的快速斷開接頭,直至其滑動。注意:要斷開管路連接,請用食指將管路連接器下方的卡舌向上推,然后將其拉出。管出來。3.
等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運行連續(xù)添加30mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15mL)。重復洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點,并與適當?shù)臋z測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5mL(對于MultiBlot),5mL(對于Miniblot)或10mL(對于Midiblot)1X一抗(濃縮液)通常在只在運行時將毛坯用于堵塞空腔印跡SNAPi.d.@2.0迷你吸盤座接受多達7.5倍8.4厘米墨跡SNAP2BHMN0100SNAPi.d.02.0Midi吸筆架接受多達8.5x13.5厘米的污點。MerckWB實驗加速器可半天完成WB實驗。
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要抗erbB2(04-291)和次要HRP-共軛山羊抗小鼠(AP124P)在以下條件下如上所示。印跡暴露于X射線膠片5分鐘。 圖3.Tau-1蛋白的免疫檢測:SNAPi.d.2.0系統(tǒng)(MultiBlot,Midi和Mini)與標準免疫檢測b。SNAPi.d.o2.0C。SNAPi.d.82.01.標準一種。SNAPid.o2.0MutiBlot迷你印跡Midi污點免疫檢測AzheimersbranHeathybran,Alheimer'sbrain健康大腦。_AzheimeP-共軛山羊抗小鼠(AP124P)在以下條件下如上所示。印跡與Luminata“mForte一起孵育將HRP基板放在X射線膠片上15分鐘。標準檢測系統(tǒng)迷你印跡系統(tǒng)首先代,單井免疫檢測用A431EGF刺激的細胞裂解液(20至0.08ug)轉(zhuǎn)移到Immobilong-P膜上。印跡是用TBST中制備的0.5%NFDM封閉,并進行探測具有主青浦區(qū)加速完成實驗時間WB實驗加速器代理商
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