人類疾病實驗動物模型是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的實驗對象和相關(guān)材料。人類各種疾病的發(fā)生、發(fā)展是十分復(fù)雜的,但以人作為實驗對象來研究是有局限性的,許多實驗在道義上也受到限制,不可能也不允許在人體上進(jìn)行實驗,但利用動物復(fù)制疾病模型加以研究,克服這些不足。在復(fù)制動物模型時,所采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟原則。靈長類動物與人近似,復(fù)制的疾病模型相似性好,但稀少昂貴,即使獼猴也不可多得,更不用說猩猩、長臂猿。除了在動物選擇上要考慮易行性和經(jīng)濟性原則外,而且在模型復(fù)制的方法上、指標(biāo)的觀察上也都要注意這一原則。英瀚斯生物,實驗動物模型多年經(jīng)驗積累!黑龍江構(gòu)建實驗動物模型多少錢
肝纖維化模型實驗動物模型
1.誘導(dǎo)方法:1)成年雄性小鼠40%CCL4,皮下注射或灌胃5mL/kg。每三天/次,連續(xù)8周。成年雄性大鼠皮下注射60%CCl4(3ml/kg),每周2次,共9周。2)成年雄性大鼠1%二甲基亞硝胺DMN(10mg/kg),1次/d,2次/周,連續(xù)4周。3)成年雄性大鼠腹腔注射硫代乙酰胺(100mg/kg)隔日腹腔注射1次,連續(xù)13周。4)成年大鼠,灌胃給白酒7g/kg體重,每日晨1次,連續(xù)24周。
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裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細(xì)胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。
造模方法:
1、細(xì)胞是貼壁細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細(xì)胞傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞長至80-90%時,去除培養(yǎng)基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化,將消化的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。倒掉上清后,加入3ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。
2、將長到培養(yǎng)皿80%-90%的細(xì)胞用胰酶消化下來,1000rpm離心,去除上清,加入完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,將細(xì)胞分別種在6孔板中,每孔種1×105個細(xì)胞。
3、將細(xì)胞進(jìn)行擴增培養(yǎng),對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),將數(shù)量調(diào)整為2×107個細(xì)胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后,隨機分為3組,每組分別在右腋皮下接種2×106(100ul/只)細(xì)胞。接種約兩周后出現(xiàn)結(jié)節(jié),每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠,取裸鼠瘤拍照凍存。
研究衰老的物理損傷實驗動物模型。動物腦血流量老年期較成年期減少20%以上,腦部慢性缺血、缺氧使腦的正常功能受損,出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙等AD病理性改變。由此理論在實驗研究中通過長久結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈血管(2VO)建立的缺血性癡呆動物模型,表現(xiàn)出認(rèn)知功能障礙明顯,淀粉樣蛋白前體升高、神經(jīng)元和腦細(xì)胞死亡、tau蛋白過度磷酸化、氧化應(yīng)激反應(yīng)和產(chǎn)生慢性炎癥等AD病理特征。該動物模型病程較長,在行為學(xué)表現(xiàn)上如認(rèn)知功能障礙與AD比較一致,病理上也高度相似,但引起AD的外因在該動物模型中不能體現(xiàn)出來,另外,2VO動物模型手術(shù)操作具有一定難度,模型復(fù)制后動物存活率低且時間短,不適合給藥周期長的實驗研究。另外,還有長久性結(jié)扎單側(cè)頸總動脈、去胸腺衰老模型和γ射線致衰老模型、控制性皮質(zhì)撞擊模型、液壓腦損傷模型等,由于這些模型在造模方法上復(fù)雜、難度高、造模后動物容易死亡、且結(jié)果不理想,只在個別特殊目的實驗中有所應(yīng)用。實驗動物模型,常見問題匯總。
實驗動物模型的分類。人類疾病動物模型種類很多,可按不同情況進(jìn)行分類,按產(chǎn)生原因分類,按系統(tǒng)范圍分類,按模型對象分類,按中醫(yī)體系分類。這里只列舉按產(chǎn)生原因分類的情況。按產(chǎn)生的原因可分為自發(fā)性動物模型和誘發(fā)性動物模型。
自發(fā)性動物模型:突變性動物模型(mutantanimalmodels):指未經(jīng)任何人工處理,利用動物在自然條件下發(fā)生疾病來用作模型。抗病性動物模型(negativeanimalmodels):是指特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生,從而探討為何這種動物對該病有天然的抵抗力。異構(gòu)性動物模型(differentconstructanimalmodels):是指利用健康動物生物學(xué)特征來提供疾病模型。培育性動物模型(breedinganimalmodels):是指通過遺傳育種手段將基因突變異常表現(xiàn)保留下來用作疾病模型。 實驗動物模型的常見問題解答。構(gòu)建實驗動物模型要多久
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研究老年癡呆癥的實驗動物模型之化學(xué)損傷法中的東莨菪堿誘導(dǎo)模型。東莨菪堿(SCOP)為膽堿能拮抗劑,通過腹腔注射SCOP引起模型動物膽堿能系統(tǒng)功能障礙引起由于氧化應(yīng)激增加的認(rèn)知能力的下降。由SCOP 誘導(dǎo)的癡呆模型被認(rèn)為是揭示AD相關(guān)認(rèn)知功能障礙的理想癡呆模型和金標(biāo)準(zhǔn)。由于此種模型造模方法簡單、費用相對較少、所以在對AD認(rèn)知功能研究中應(yīng)用比較范圍很廣,缺點是動物模型缺乏AD神經(jīng)元變性、Aβ沉積等典型病理改變。
IBO 誘導(dǎo)模型,IBO 能對大腦產(chǎn)生毒性作用。特別是對大腦神經(jīng)元的毒性作用比較大,可以導(dǎo)致腦內(nèi) SP 沉積,行動呆慢,學(xué)習(xí)記憶能力衰退等病理表現(xiàn)。將IBO注入ChE傳遞和學(xué)習(xí)記憶能力的主要位Meynert基底核,通過谷氨酸受體特異激動膽堿能神經(jīng)元引起神經(jīng)元損傷、ACh 含量和ChAT活性降低,信號通路隨之調(diào)節(jié)異常,認(rèn)知功能障礙等。在實驗研究中,IBO聯(lián)合Aβ 復(fù)制AD動物模型其臨床病理特征更明顯。 黑龍江構(gòu)建實驗動物模型多少錢