HE染色不管怎么操作，始終無(wú)法染色或淡染答：這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長(zhǎng);或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救：防患于未然，要么使用新鮮的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對(duì)于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定；對(duì)于已經(jīng)制出的片子，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上，然后自來(lái)水漂洗5min，可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中，補(bǔ)充染色媒介，增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上，單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。HE染色(脫蠟、水化、染色、脫水、封片) - 實(shí)驗(yàn)方法。黑龍江專(zhuān)業(yè)的HE染色公司

HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無(wú)水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來(lái)水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。福建比較好的HE染色公司HE染色是病理實(shí)驗(yàn)中比較用的一種基礎(chǔ)染色方法。

HE染色構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類(lèi)很多，它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱(chēng)為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱(chēng)為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度，pH值升高時(shí)，則原來(lái)被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時(shí)，原來(lái)被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說(shuō)染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。

HE染色知識(shí)點(diǎn)1：對(duì)送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的，應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明，有特殊要求（如細(xì)菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等）應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系，并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理。知識(shí)點(diǎn)2：組織取材要求在對(duì)送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上，根據(jù)診斷的需要，確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號(hào)或標(biāo)記，以便鏡檢時(shí)核對(duì)。另外，盡可能在取材前對(duì)有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影，并編號(hào)存檔南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。HE染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊约皩?shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

HE染色實(shí)驗(yàn)步驟：（1）樣品制備：對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來(lái)水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過(guò)深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來(lái)水洗滌。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來(lái)水洗滌。（6）吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后，中性樹(shù)膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則染色時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可HE染色是組織學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ)、使用比較普遍的技術(shù)方法之一。黑龍江專(zhuān)業(yè)的HE染色公司

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HE染色分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過(guò)多結(jié)合的染色劑脫去，這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為分化作用，所用的溶液稱(chēng)為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后，必須用0.5%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過(guò)多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去，在進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此，在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步。返藍(lán)作用：分化之后，蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色，故分化之后，立即用水出去組織切片上的酸而終止分化，再用弱堿性水（0.2%氨水）使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來(lái)水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán)，但所需時(shí)間較長(zhǎng)。黑龍江專(zhuān)業(yè)的HE染色公司