HE染色實(shí)驗(yàn)步驟:(1)樣品制備:對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞,胰酶消化,調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后,取出細(xì)胞爬片,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,每次1min。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,自來(lái)水洗滌。(4)分色:鏡下觀察,若細(xì)胞核染色過(guò)深,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,自來(lái)水洗滌。(5)染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,自來(lái)水洗滌。(6)吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后,中性樹(shù)膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,則染色時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng),蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可海馬組織HE染色如何觀察。四川質(zhì)量好的HE染色哪家好
HE染色是目前國(guó)內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞,可直接影響疾病診斷的及時(shí)與準(zhǔn)確性。因此,能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,固定狀態(tài)良好后,嚴(yán)格按照本單位病理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SOP程序進(jìn)行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或?yàn)g覽數(shù)字切片,在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況,對(duì)切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血、出血、水腫、變性、壞死、增生、纖維化、機(jī)化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述,并反映出片子之間的差異。對(duì)典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識(shí)。江西推薦的HE染色價(jià)格HE染色取材、染色以及分析方法介紹。
HE染色細(xì)胞質(zhì)過(guò)染分析及應(yīng)對(duì)原因:(1)伊紅染色液濃度太高,特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在;(2)切片在伊紅染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng);(3)切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過(guò)的太快,而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對(duì)策:適當(dāng)稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時(shí)間,或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí),停留時(shí)間相對(duì)均勻。同樣,也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對(duì)原因:蘇木精染色液中的金屬膜,黏附在玻片上。對(duì)策:每天染色前仔細(xì)過(guò)濾蘇木精染色液,或建議使用半氧化蘇木精染色液,如Gill蘇木精染色液,可以避免過(guò)多的金屬膜產(chǎn)生。
HE染色堿染料染主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色。學(xué)上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法。蘇木精 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡(jiǎn)稱(chēng)HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白液體呈粉紅色。HE染色是病理實(shí)驗(yàn)中比較用的一種基礎(chǔ)染色方法。
HE染色觀察細(xì)胞凋亡,凋亡檢測(cè)中形態(tài)學(xué)方法是**直觀、可靠的方法之一。對(duì)組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后,在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過(guò)觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類(lèi)型來(lái)判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備:對(duì)于貼壁細(xì)胞,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,讓培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)于玻片上,然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。對(duì)于懸浮細(xì)胞,用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后,離心1000r/min收集細(xì)胞,用PBS洗2次,收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml,涂片或用離心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,貼壁細(xì)胞由原來(lái)的梭形或多角形變小、變圓,核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色,胞漿呈淡紅色,核固縮、破碎,形成凋亡小體等。懸浮細(xì)胞,整個(gè)細(xì)胞皺縮,核固縮,破碎,形成凋亡小體,染色質(zhì)顏色加深等。腦組織HE染色如何觀察?江西推薦的HE染色價(jià)格
HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng)。四川質(zhì)量好的HE染色哪家好
HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細(xì)胞的種類(lèi)有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。四川質(zhì)量好的HE染色哪家好