HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過(guò)度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液。或在流動(dòng)自來(lái)水(一般自來(lái)水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過(guò)久。對(duì)策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。河北靠譜的HE染色外包

HE染色：在組織病理學(xué)中，蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法。常規(guī)蘇木素染色的對(duì)比染色是用伊紅，也有采用焰紅，因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明，還有采用橘黃G，比布里希猩紅，波爾多紅等作為對(duì)比染色。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料，本身溶于醇而不溶于水，為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶。配方：伊紅Y（水溶）0.5-1g，蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y（醇溶性）應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸，可以加速其染色過(guò)程，使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色，胞質(zhì)、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色。福建推薦的HE染色分析石蠟組織切片的HE染色。

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改變組織等電點(diǎn)，促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合，其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高，很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí)，可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過(guò)2%)，抑制蘇木素染色效能，方便控制染色時(shí)間，同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度?，F(xiàn)在有商用的HE染色液賣(mài)，但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶，這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。

HE染色細(xì)胞質(zhì)過(guò)染分析及應(yīng)對(duì)原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過(guò)的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對(duì)策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時(shí)間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí)，停留時(shí)間相對(duì)均勻。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對(duì)原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上。對(duì)策：每天染色前仔細(xì)過(guò)濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過(guò)多的金屬膜產(chǎn)生。HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟。

HE染色觀(guān)察細(xì)胞凋亡，凋亡檢測(cè)中形態(tài)學(xué)方法是**直觀(guān)、可靠的方法之一。對(duì)組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后，在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀(guān)察，通過(guò)觀(guān)察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類(lèi)型來(lái)判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備：對(duì)于貼壁細(xì)胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)于玻片上，然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。對(duì)于懸浮細(xì)胞，用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后，離心1000r/min收集細(xì)胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5min；在光學(xué)顯微鏡下，貼壁細(xì)胞由原來(lái)的梭形或多角形變小、變圓，核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色，胞漿呈淡紅色，核固縮、破碎，形成凋亡小體等。懸浮細(xì)胞，整個(gè)細(xì)胞皺縮，核固縮，破碎，形成凋亡小體，染色質(zhì)顏色加深等。HE染色，一站式實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺(tái)。結(jié)果客觀(guān)的HE染色哪家好

HE染色是常見(jiàn)的病理染色，是比較基礎(chǔ)是病理染色之一。河北靠譜的HE染色外包

HE染色反藍(lán)的原理：蘇木素染液，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化：蘇木素染色之后，用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液，但是在細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明，把這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離，分化不可過(guò)度。藍(lán)化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，而呈藍(lán)色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色，稱(chēng)藍(lán)化作用，一般多用自來(lái)水浸洗即可變藍(lán)，也可用溫水（50度溫水比較好）變藍(lán)。河北靠譜的HE染色外包