HE染色主要是為通細胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細胞的,并不是直接通過顏色來區(qū)分的,HE染色細胞壞死的三種改變:(1)細胞核的改變:這是細胞壞死的主要形態(tài)標志,表現為核濃縮,核碎裂,核溶解。(2)細胞質的改變:由于胞質發(fā)生凝固或溶解,HE染色呈深紅色顆粒狀,如肝細胞壞死出現的嗜酸性小體醫(yī)學|教育網搜集整理。(3)間質的改變:由于各種溶解酶的作用,基質崩解、膠原纖維腫脹、斷裂或液化,與壞死的細胞融合成一片,呈紅染的顆粒狀無結構物質。南京英瀚斯生物HE染色,南京英瀚斯,專業(yè)的實驗外包公司。黑龍江專業(yè)的HE染色外包
HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法,是**基本的病理學染色技術。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來。質量好的HE具備條件1.細胞核與細胞漿藍紅相映,鮮艷亮麗;2.胞核鮮明、核膜、核染色質顆粒均清晰可見;3.組織或一般結構特點及假物質成分均能顯示出來。青海靠譜的HE染色服務專業(yè)的HE染色服務平臺,南京英瀚斯生物。
HE染色切片中出現類似色素樣的點狀結晶和黑色光滑的細胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發(fā)現氧化過度應及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間。
HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,樣品處理:a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片:蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據染色結果和要求調整時間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液,約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據染色結果和要求調整時間)。此時,如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。比較常見的病理染色HE染色?
HE染色注意事項:1.組織切片的脫蠟步驟應徹底,否則無論進行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分,若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時間后表面易出現亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍色時應及時更換新液。 3.染色的時間長短需依據:染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進行調節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。 4.分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵,若分化失當則必然引起染色不勻或過淡,過深等現象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復染后,組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。 南京英瀚斯,專業(yè)的技術提供專業(yè)的HE染色服務。云南性價比高的HE染色哪家好
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HE染色不管怎么操作,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸。對于已經固定的組織可考慮再次固定;對于已經制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,然后自來水漂洗5min,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補充染色媒介,增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。黑龍江專業(yè)的HE染色外包