HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān)，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí)，伊紅著色由淺變深。HE染色是組織學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ)、使用比較普遍的技術(shù)方法之一。湖北推薦的HE染色哪家好

HE染色觀察細(xì)胞凋亡，凋亡檢測中形態(tài)學(xué)方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后，在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察，通過觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備：對于貼壁細(xì)胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細(xì)胞長于玻片上，然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細(xì)胞，用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后，離心1000r/min收集細(xì)胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5min；在光學(xué)顯微鏡下，貼壁細(xì)胞由原來的梭形或多角形變小、變圓，核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色，胞漿呈淡紅色，核固縮、破碎，形成凋亡小體等。懸浮細(xì)胞，整個(gè)細(xì)胞皺縮，核固縮，破碎，形成凋亡小體，染色質(zhì)顏色加深等。湖北結(jié)果客觀的HE染色外包HE染色，優(yōu)先南京英瀚斯生物。

HE染色組織樣本水化：將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min，使脫蠟時(shí)用的二甲苯可以被洗脫出去，使水可以進(jìn)入組織中；再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡５min以達(dá)到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍(lán)：將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗，每次浸泡５min，總共清洗３次。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液，每個(gè)組織切片滴加100ul，充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化，使細(xì)胞核中結(jié)合過多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍(lán)色，使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中，讓細(xì)胞核染藍(lán)色。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。

HE染色常見問題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?；蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。南京英瀚斯，專業(yè)的技術(shù)提供專業(yè)的HE染色服務(wù)。

HE染色實(shí)驗(yàn)步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后，中性樹膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則染色時(shí)間相應(yīng)延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。云南比較好的HE染色價(jià)格

冰凍切片是否可以做HE染色？湖北推薦的HE染色哪家好

HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟，將待包埋的組織樣本放入石蠟中，確保組織位置規(guī)整。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后，進(jìn)行降溫冷凍，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片，厚度在４-８um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測組織樣本切片放于二甲苯中，充分浸泡10min，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解，這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候，染液可以充分進(jìn)入組織種，同時(shí)，二甲苯還可以起到透明的作用，使切片更容易觀察。湖北推薦的HE染色哪家好