HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內的核糖體和細胞質染色的方法。H:Hematoxylin，蘇木精E:Eosin，伊紅蘇木精（Hematoxylin,H）是一種堿染料，可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色，被堿染料染色的結構具有嗜堿。伊紅（，E）是一種酸染料，能將細胞質染成紅色或淡紅色，被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精，***入蒸餾水，就可染色。 很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當其衰老時或發(fā)生退行變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。 膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變時，伊紅著色由淺變深。HE染色是病理實驗中比較用的一種基礎染色方法。江蘇病理HE染色公司
HE染色等常規(guī)染色，組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因：石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好，并且對抗原基本無影響。脂質染色（油紅O染**odipy染色，尼羅紅染色）必須做冰凍切片，不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片：ROS染**-半乳糖甘酶染色，ATP染色，膽固醇染色。如果標本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片，將標本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內固定（在固定液內邊解凍邊固定）。組織形態(tài)結構保存完好順序：新鮮組織立即投入固定液內固定石蠟切片＞組織-80°冷凍后投入固定液內固定石蠟切片＞新鮮組織立即投入固定液內固定冰凍切片＞組織-80°冷凍后直接冰凍切片。江蘇病理HE染色公司肺部組織HE染色如何觀察。
HE染色注意事項：1、染色時調節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關鍵，應在顯微鏡下控制進行，一般以細胞核染色清楚（晰）而細胞質基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導致染色太淺，應重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應將切片退回無水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前，切片周邊均應擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當，樹脂封固時不能有氣泡。
HE染色是目前國內外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質量的好壞，可直接影響疾病診斷的及時與準確性。因此，能制作出一張高質量的HE染色切片，是必須掌握的技術之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定，固定狀態(tài)良好后，嚴格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數(shù)字切片，在不同倍數(shù)下詳細觀察組織切片情況，對切片中基本病理改變如充血、淤血、出血、水腫、變性、壞死、增生、纖維化、機化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述，并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標識。HE染色結果如何分析和讀片？
HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細胞，胰酶消化，調整細胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應時間后，取出細胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。（5）染胞質：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細胞爬片后，中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定，則染色時間相應延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可石蠟組織切片的HE染色。天津靠譜的HE染色
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HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少，幅度太小；可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久，導致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進去，在切片染色完成后留下了點狀的不著**域）：更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質量不佳（偶有試劑瓶內裝的試劑與試劑名不相符）：換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯：需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯：需重新配置驗證。8)烤片時間短，切片上水分沒有烤干，也會導致著色不勻，出現(xiàn)點狀發(fā)白區(qū)域。江蘇病理HE染色公司
