免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法,英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確、對比度好、染色標(biāo)本可長期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法(過氧化物酶-抗過氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶)、即用型二步法(聚合物鏈接)等。常見的免疫組化方法有哪些?河南大鼠免疫組化要多久
細(xì)胞屬性的判定,免疫組化也可以進行這方面的臨床應(yīng)用。通過特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分,來判定細(xì)胞的屬性,確定cancer的來源。如細(xì)胞角蛋白(CK)是上皮性標(biāo)記,CK陽性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標(biāo)記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽性則提示膠質(zhì)cancer;CD20和CD79a陽性則提示B細(xì)胞淋巴瘤;平滑肌肌動蛋白(Actin)陽性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質(zhì)瘤中原cancer基因蛋白產(chǎn)物CD117陽性;血管源性cancer中內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD34陽性等等。如果您需要做實驗外包,可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。新疆細(xì)胞免疫組化推薦免疫組化如何得到好的效果?
關(guān)于免疫組化的封閉:用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min,然后甩去封閉用血清,勿洗;注意:封閉時間根據(jù)具體實驗調(diào)整;封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清,切記是BSA,不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了。①使用血清好還是BSA好?答:***是待檢樣本會非特異性的和蛋白結(jié)合,從而導(dǎo)致背景過高,因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合,從這點看,BSA和血清沒有明顯區(qū)別。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體,可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合,與抗體特異性無關(guān),封閉血清中有抗體,因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合。BSA則無法封閉Fc受體。
免疫組化實驗所用的抗體
免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。
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免疫組化常用的染色方法
根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標(biāo)法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 英瀚斯生物,可做免疫組化定量分析。
免疫組化臨床應(yīng)用中,可以對傳染性疾病診斷。應(yīng)用抗病毒、細(xì)菌、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進行免疫組化染色,可以檢測和診斷許多傳染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、細(xì)小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS)等等,由于免疫組化在傳染性疾病診斷中具有及時性、低風(fēng)險性、高敏感性、特異性、有效性等特點,可以用于(1)用于人類新病原微生物的識別;(2)提供快速的形態(tài)學(xué)診斷,使嚴(yán)重傳染性疾病得以早期醫(yī)療;(3)在無法取得新鮮組織或尚無培養(yǎng)方法的情況下,提供診斷并對發(fā)病機制進行研究和認(rèn)識。英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務(wù),一站式醫(yī)學(xué)科研平臺。南京有靠譜的能做免疫組化的公司嗎?湖北小鼠免疫組化實驗
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免疫組化中免疫膠體金技術(shù),英瀚斯生物小編為您說明介紹。免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就能對組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進行定性、定位,甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色,因此也適合進行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。河南大鼠免疫組化要多久