實驗動物模型的灌注取材方法:
小鼠灌注灌流
固定小鼠時我一般采用輸液器的針頭(4號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進針,刺入心尖3~4毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約40毫升生理鹽水,后再灌流約20毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
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大鼠灌注
按大鼠體重,用2%戊巴,比妥鈉(0.25ml/100g)進行腹腔注射麻醉,開胸暴露心臟,向左心室內(nèi)注射1%肝素鈉0.2ml后經(jīng)左心室行主動脈插管,血管鉗固定后剪開右心耳,先以生理鹽水150ml快速沖洗血管,然后用4%多聚甲醛的0.01mol/LPBS(4℃,PH7.40)250ml灌注固定,先快后慢,共需時間為50min,之后取材,置4%多聚甲醛固定液后固定,在4℃冰箱內(nèi)保存。多聚甲醛進入大鼠體內(nèi),大鼠會出現(xiàn)四肢、尾的抽搐,**終以肝臟發(fā)白、內(nèi)臟鼓起即灌注好。 關(guān)于實驗動物模型,你想知道的都在這里。內(nèi)蒙古實驗動物模型外包
一型糖尿病實驗動物模型構(gòu)建:
胰腺中的胰島β細胞變性和壞死,分泌的胰島素不足。
誘導方法一:STZ誘導糖尿病模型。注射前用0.05mol/L檸檬酸(pH4.5)配成2%的STZ溶液,新鮮使用。大鼠糖尿病STZ的劑量為40~75mg/kg(靜脈注射或腹腔注射)。小鼠對此藥敏感性較差,常用量為100~200mg/kg(靜脈注射或腹腔注射)。
誘導方法二:四氧嘧啶糖尿病動物模型四氧嘧啶糖一次腹腔注射150~200mg/kg或靜脈注射40~100mg/kg。用藥后2~3小時后出現(xiàn)初期高糖,持續(xù)6~12小時后進入低血糖期,動物出現(xiàn)痙攣,24小時后一般為持續(xù)性高糖期,β細胞呈現(xiàn)不可逆性壞死,發(fā)生糖尿病。
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5XFAD轉(zhuǎn)基因?qū)嶒瀯游锬P汀?XFAD小鼠在小鼠Thy1.2啟動子的控制下過度表達人類APP和PSEN1蛋白,共有5個AD連鎖突變,分別是APP中的瑞典(K670N/M671L)、佛羅里達(I716V)和倫敦(V717I)突變,以及PSEN1中的M146L和L286V突變。1.5個月大的5XFAD小鼠就開始出現(xiàn)Aβ沉積。5XFAD小鼠在大腦中積累的Aβ42多于Aβ40,這表明5個FAD突變累積影響Aβ42的產(chǎn)生。然而,在5XFAD小鼠中未觀察到tau過度磷酸化和NFTs的形成。2個月大時出現(xiàn)星形膠質(zhì)細胞增生和小膠質(zhì)細胞增生,表明神經(jīng)炎癥發(fā)生在該模型早期。5XFAD小鼠再現(xiàn)了人類AD的病理學,類似于Tg2576、APP23和APPPS1模型。
消化系統(tǒng)疾病動物模型
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1胃黏膜對卵白蛋白過敏引起的胃潰瘍
【操作步驟】3月齡以上的多**鼠,雄雌不限,3μg卵白蛋白和1mg氫氧化鋁的混合物溶解于0.2ml鹽水,腹腔注射。
【結(jié)果分析】非洲多**鼠的過敏性潰瘍的大體形態(tài)與人類的消化性潰瘍極為相似。多**鼠對研究胃病也是一種合適的動物,因為它還存在另外兩種與人類相似的情況,即有發(fā)生類*與腺*的傾向。多**鼠可從日、美等國的實驗動物供應商處獲得。
2十二指腸潰瘍
【操作步驟】成年SD大鼠,雄雌不限,皮下注射丙腈或羥基乙胺200mg/kg,迅速引起進行性十二指腸潰瘍?!窘Y(jié)果分析】使用該方法制備的模型病理形態(tài)改變與人類患者相似,潰瘍見于球部前壁,直徑2~4mm,常引起穿孔或穿透到內(nèi)臟,小的潰瘍常位于球部后壁,穿透至胰腺。模型可用于十二指腸潰瘍的發(fā)病機理、實驗***的研究。 英瀚斯專業(yè)團隊負責實驗動物模型研究。
裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。
造模方法:
1、細胞是貼壁細胞,細胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細胞傳代培養(yǎng):當細胞長至80-90%時,去除培養(yǎng)基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化,將消化的細胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。倒掉上清后,加入3ml培養(yǎng)基重懸細胞,1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。
2、將長到培養(yǎng)皿80%-90%的細胞用胰酶消化下來,1000rpm離心,去除上清,加入完全培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞分別種在6孔板中,每孔種1×105個細胞。
3、將細胞進行擴增培養(yǎng),對細胞進行計數(shù),將數(shù)量調(diào)整為2×107個細胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應性飼養(yǎng)7天后,隨機分為3組,每組分別在右腋皮下接種2×106(100ul/只)細胞。接種約兩周后出現(xiàn)結(jié)節(jié),每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠,取裸鼠瘤拍照凍存。 實驗動物模型的造模方法?河南小鼠實驗動物模型要多久
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承接過的部分動物模型:消化系統(tǒng)胃潰瘍模型大鼠胃炎模型新生鼠壞死性結(jié)腸炎模型慢性脂肪肝模型肝纖維化模型急性肝損傷模型肝硬化模型大鼠急性肝損傷模型肝切除模型肝缺血再灌注模型肝纖維化模型肝部分切除模型;呼吸系統(tǒng)OVA***模型慢性肺阻塞模型慢性阻塞性肺模型肺纖維化模型急性肺炎模型窘迫呼吸癥模型泌尿生殖系統(tǒng)腎纖維化模型嘌呤霉素誘導的腎病模型急性腎衰竭模型尿毒癥模型單側(cè)腎切除模型大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型卵巢早衰模型腎小管壞死小鼠模型心血管系統(tǒng)小鼠***模型動脈鈣化模型腦卒中模型(腦缺血再灌注模型)心肌缺血模型蛛網(wǎng)膜下腔出血模型腦出血模型肺動脈高壓模型股動脈血管炎模型失血性貧血動物模型心肌梗死模型神經(jīng)系統(tǒng)抑郁模型帕金森模型尼古丁戒斷模型睡眠剝奪模型大鼠癲癇模型阿爾茲海莫(AD)癥模型大(小)鼠水迷宮實驗內(nèi)分泌系統(tǒng)糖尿病模型(Ⅰ、Ⅱ糖尿病)卵巢早衰模型、多囊卵巢模型大鼠甲狀腺功能亢進癥免疫疾病小鼠關(guān)節(jié)炎模型(CIA)橋本甲狀腺炎模型(HT)多樣硬化模型(EAE)裸鼠成瘤模型裸鼠皮下成瘤模型腎原位*模型肝原位*模型胃原位*模型腸原位*模型膀胱原位*模型肺原位*模型其他模型骨質(zhì)疏松模型股骨頭壞死模型骨性關(guān)節(jié)炎模型 內(nèi)蒙古實驗動物模型外包