MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free):RNA電泳的理想選擇在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,RNA電泳是研究基因表達(dá)、RNA結(jié)構(gòu)和功能的重要技術(shù)。然而,RNA的穩(wěn)定性較差,容易被RNase降解,因此在RNA電泳中使用無(wú)RNase污染的緩沖液至關(guān)重要。MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free)憑借其穩(wěn)定的pH值、高分辨率和無(wú)RNase污染的特點(diǎn),成為RNA電泳的理想選擇。產(chǎn)品特點(diǎn)無(wú)RNase污染:MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free)經(jīng)過(guò)特殊處理,確保無(wú)RNase污染,能夠有效保護(hù)RNA樣品免受降解。穩(wěn)定pH值:MOPS緩沖液的pH值接近中性(pH 6.5-7.9),能夠維持穩(wěn)定的電泳環(huán)境,避免RNA在電泳過(guò)程中發(fā)生降解。高分辨率:MOPS緩沖液具有較低的粘度和較高的緩沖能力,能夠有效提高電泳分辨率,確保RNA條帶清晰。兼容性強(qiáng):該緩沖液適用于多種檢測(cè)方法,如銀染、考馬斯亮藍(lán)染色或Northern blot。使用方法配制緩沖液:將MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free)粉末溶解于去離子水中,攪拌至完全溶解。配制好的1×緩沖液pH值約為7.7±0.2。電泳操作:使用1×MOPS緩沖液制備瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠,將RNA樣品加入凝膠孔中進(jìn)行電泳。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用合適的染料(如EB或GoldView)對(duì)凝膠進(jìn)行染色,并在紫外透射儀下觀察結(jié)果。
10×MOPSRNA緩沖液是一種專為RNA電泳設(shè)計(jì)的緩沖液,通常用于瓊脂糖凝膠電泳中。以下是關(guān)于10×MOPSRNA緩沖液的一些詳細(xì)信息:1.主要成分:-MOPS(3-(N-嗎啉代)丙磺酸):一種緩沖劑,提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,適合RNA電泳。-EDTA:螯合金屬離子,防止RNase酶的活性。-其他成分:可能包括一些鹽類,如醋酸鈉或硼酸,以維持適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度。2.用途:-用于RNA電泳,包括總RNA、mRNA、小RNA等的分離和分析。-適用于甲醛變性的或非變性的瓊脂糖凝膠電泳。3.特點(diǎn):-溫和的pH環(huán)境:MOPS緩沖液的pH值通常在7.0左右,適合RNA的穩(wěn)定和遷移。-減少RNase污染:含有EDTA,有助于減少RNase酶的活性,保護(hù)RNA樣品。4.使用說(shuō)明:-稀釋:在使用前,通常將10×MOPSRNA緩沖液稀釋至1×工作濃度。-制備凝膠:將瓊脂糖粉末與1×MOPSRNA緩沖液混合,加熱至瓊脂糖完全溶解,然后倒入凝膠模具中。-電泳:將RNA樣品與適當(dāng)?shù)纳蠘泳彌_液混合后,加入凝膠孔中,接通電源進(jìn)行電泳。5.保存條件:-通常建議在室溫下保存,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中,防止水分蒸發(fā)或污染。-也可以在4℃下保存,延長(zhǎng)其穩(wěn)定性和使用壽命。人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)適用于多種類型的血液樣本,包括全血、血漿和血清等。
漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)是一種新型的酵母菌表達(dá)平臺(tái),它具有高密度培養(yǎng)和高效表達(dá)外源蛋白的能力。在臨床前研究中,漢遜酵母被用于表達(dá)瘤病毒(HPV)病毒樣顆粒(VLPs),這為開(kāi)發(fā)HPV疫苗提供了一種有希望的策略。HPVB19是一種高度傳染性的病毒,對(duì)免疫功能低下者和胎兒可能造成嚴(yán)重后果。目前,尚無(wú)針對(duì)HPVB19的批準(zhǔn)疫苗或抗病毒藥物,因此開(kāi)發(fā)有效的疫苗顯得尤為重要。漢遜酵母表達(dá)的VLPs,特別是VP1與VP2共組裝的VLP(VP1/VP2VLP),可能成為HPVB19疫苗開(kāi)發(fā)的候選免疫原。在一項(xiàng)研究中,漢遜酵母成功表達(dá)了HPV68bL1蛋白,并形成了VLPs。這些VLPs在小鼠模型中顯示出良好的免疫原性,能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生較高滴度的中和抗體,并且對(duì)HPV68a型也表現(xiàn)出一定的交叉保護(hù)作用。這表明漢遜酵母表達(dá)的HPV68bVLPs可能作為多價(jià)HPV疫苗的組分,用于疫苗生產(chǎn)。漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)還提供了一整套從表達(dá)載體構(gòu)建到產(chǎn)業(yè)化發(fā)酵和蛋白純化的通用技術(shù)平臺(tái),適合不同規(guī)模的企業(yè)使用。在HPV68bL1蛋白的VLPs研究中,通過(guò)高密度發(fā)酵和系列純化步驟,獲得了純度超過(guò)95%的VLPs,這些VLPs在形態(tài)上與天然病毒顆粒相似,并通過(guò)假病毒體外中和試驗(yàn)證明了其免疫學(xué)效果。
重組蛋白表達(dá)服務(wù)在臨床前研究中扮演著重要角色,其中畢赤酵母(Pichiapastoris)表達(dá)系統(tǒng)因其多種優(yōu)勢(shì)而被廣泛應(yīng)用。以下是畢赤酵母表達(dá)服務(wù)在臨床前研究中的一些關(guān)鍵應(yīng)用和優(yōu)勢(shì):1.真核表達(dá)系統(tǒng):畢赤酵母作為真核細(xì)胞,能夠進(jìn)行復(fù)雜的蛋白質(zhì)折疊、翻譯后修飾(如糖基化、二硫鍵形成)等,這與哺乳動(dòng)物細(xì)胞相似,因此非常適合表達(dá)具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的外源蛋白。2.高表達(dá)水平:畢赤酵母擁有強(qiáng)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子AOX1,其蛋白表達(dá)水平可達(dá)到g/L水平,遠(yuǎn)高于其他表達(dá)系統(tǒng)。3.分子水平策略:通過(guò)優(yōu)化密碼子、使用高拷貝數(shù)外源基因、選擇合適的啟動(dòng)子和信號(hào)肽、敲除蛋白酶基因、共表達(dá)促折疊因子等策略,可以顯著提高外源蛋白的表達(dá)效率。4.服務(wù)內(nèi)容:提供從基因合成、篩選陽(yáng)性克隆、表達(dá)小試到比較好克隆表達(dá)純化交付蛋白樣品的全套服務(wù),以及詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告,確保客戶可以根據(jù)自身需求進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。5.多種菌株選擇:提供多種畢赤酵母菌株,如X33、GS115、KM71等,每種菌株具有不同的特性,適用于不同類型的蛋白表達(dá)。6.優(yōu)化發(fā)酵技術(shù):通過(guò)發(fā)酵條件的優(yōu)化,如溫度、溶氧量、培養(yǎng)時(shí)間、pH值和碳源等,進(jìn)一步提高蛋白表達(dá)量和細(xì)胞活力。Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)通過(guò)其獨(dú)特的酶體系和優(yōu)化配方,為長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增提供便捷的解決方案。
酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)在藥物發(fā)現(xiàn)中的具體應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.蛋白質(zhì)工程和藥物篩選:酵母表面展示(YSD)技術(shù)是生物技術(shù)中的重要工具,它通過(guò)將基因型與表型聯(lián)系起來(lái),用于蛋白質(zhì)工程和高通量篩選,特別是在生物藥物發(fā)現(xiàn)和診斷領(lǐng)域中克服YSD挑戰(zhàn)的創(chuàng)新方法。2.開(kāi)發(fā)新型表達(dá)系統(tǒng):通過(guò)合成生物學(xué)技術(shù),研究人員設(shè)計(jì)并開(kāi)發(fā)了新型的酵母表達(dá)系統(tǒng),如華東理工大學(xué)蔡孟浩課題組開(kāi)發(fā)的可響應(yīng)用戶自定義信號(hào)的高效畢赤酵母蛋白表達(dá)平臺(tái),這一平臺(tái)通過(guò)簡(jiǎn)單地“插拔”已知或篩選得到的低強(qiáng)度啟動(dòng)子,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定信號(hào)的嚴(yán)謹(jǐn)調(diào)控和高效響應(yīng)。3.疫苗開(kāi)發(fā):酵母表達(dá)系統(tǒng)被用于病毒樣顆粒(VLPs)疫苗的開(kāi)發(fā),這些VLPs因其高安全性和免疫原性,成為疫苗開(kāi)發(fā)中的重要平臺(tái)。例如,上市的VLPs疫苗Gardasil(佳達(dá)修)就是通過(guò)在酵母中表達(dá)HPV的主要衣殼蛋白L1并自組裝成VLPs。4.藥物遞送系統(tǒng):VLPs由于其內(nèi)部空腔,可作為藥物遞送載體,酵母表達(dá)系統(tǒng)在這一領(lǐng)域的應(yīng)用為藥物發(fā)現(xiàn)提供了新的策略。DL50的清晰條帶能夠清晰地指示目標(biāo)片段的位置,從而為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解讀提供重要依據(jù)。吉林純化工藝服務(wù)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
Pfu DNA Polymerase在多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色,尤其適用于高保真PCR、基因克隆、定點(diǎn)突變和DNA測(cè)序等。上海重組人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)
DL3000 DNA Marker:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DL3000 DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠?yàn)镈NA分析提供精確的分子量參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:DL3000 DNA Marker 包含9條線狀雙鏈DNA片段,片段大小分別為100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、2500 bp和3000 bp。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,使用時(shí)無(wú)需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻,其中750 bp條帶亮度加倍,便于觀察。穩(wěn)定性高:在2-8℃可保存6個(gè)月,長(zhǎng)期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量:建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。電泳條件:推薦使用1.0%-2.0%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5×TBE緩沖液,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,在紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時(shí)應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。電泳緩沖液:及時(shí)更換電泳緩沖液并使用新制備的凝膠,以免影響電泳結(jié)果。上海重組人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)
ris-硼酸電泳粉劑(5×TBE):高效、經(jīng)濟(jì)的DNA電泳緩沖液在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的關(guān)鍵技術(shù)之一。Tris-硼酸電泳粉劑(5×TBE)作為一種高效、經(jīng)濟(jì)的緩沖液原料,因其出色的性能和便捷性,成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-硼酸電泳粉劑(5×TBE)是一種高濃度的緩沖液原料,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強(qiáng)度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶...