TthDNAPolymerase的熱穩(wěn)定性TthDNAPolymerase具有出色的熱穩(wěn)定性,能在高溫環(huán)境下維持活性。在PCR反應中,面對反復的高溫變性步驟,其結構依然穩(wěn)固,酶活性不易受影響。例如在95℃左右的高溫下長時間孵育,依然能夠有效地催化DNA鏈的合成,保證PCR擴增的順利進行,這使得它在需要高溫條件的核酸擴增實驗中表現(xiàn)好,為復雜基因組的研究和檢測提供了可靠的酶工具,提高了實驗結果的準確性和重復性。TthDNAPolymerase的逆轉錄活性該酶具備獨特的逆轉錄活性,除了DNA聚合功能外,還能以RNA為模板合成cDNA。在RT-PCR實驗中,它可以一步完成逆轉錄和PCR擴增過程,簡化了實驗步驟,減少了樣本損失和污染的風險。像在檢測病毒RNA時,TthDNAPolymerase能夠精細地將病毒RNA逆轉錄為cDNA并進行擴增,提高了檢測的靈敏度和效率,為RNA相關的分子生物學研究和臨床診斷開辟了便捷的途徑。Pfu DNA Polymerase具有3′-5′外切酶活性能夠在擴增過程中糾正錯誤摻入的堿基其保真性是普通Taq酶的6-8倍.吉林酶定向進化技術服務技術服務
10×MOPSRNA緩沖液是一種專為RNA電泳設計的緩沖液,通常用于瓊脂糖凝膠電泳中。以下是關于10×MOPSRNA緩沖液的一些詳細信息:1.主要成分:-MOPS(3-(N-嗎啉代)丙磺酸):一種緩沖劑,提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,適合RNA電泳。-EDTA:螯合金屬離子,防止RNase酶的活性。-其他成分:可能包括一些鹽類,如醋酸鈉或硼酸,以維持適當?shù)碾x子強度。2.用途:-用于RNA電泳,包括總RNA、mRNA、小RNA等的分離和分析。-適用于甲醛變性的或非變性的瓊脂糖凝膠電泳。3.特點:-溫和的pH環(huán)境:MOPS緩沖液的pH值通常在7.0左右,適合RNA的穩(wěn)定和遷移。-減少RNase污染:含有EDTA,有助于減少RNase酶的活性,保護RNA樣品。4.使用說明:-稀釋:在使用前,通常將10×MOPSRNA緩沖液稀釋至1×工作濃度。-制備凝膠:將瓊脂糖粉末與1×MOPSRNA緩沖液混合,加熱至瓊脂糖完全溶解,然后倒入凝膠模具中。-電泳:將RNA樣品與適當?shù)纳蠘泳彌_液混合后,加入凝膠孔中,接通電源進行電泳。5.保存條件:-通常建議在室溫下保存,避免長時間暴露在空氣中,防止水分蒸發(fā)或污染。-也可以在4℃下保存,延長其穩(wěn)定性和使用壽命。安徽重組蛋白表達服務技術服務技術服務Pfu Master Mix (2x)(With Dye)提供高保真DNA擴增,適用于克隆、突變分析等需要高精度結果的實驗。
酵母表達高通量篩選技術在藥物發(fā)現(xiàn)中的具體應用主要體現(xiàn)在以下幾個方面:1.蛋白質(zhì)工程和藥物篩選:酵母表面展示(YSD)技術是生物技術中的重要工具,它通過將基因型與表型聯(lián)系起來,用于蛋白質(zhì)工程和高通量篩選,特別是在生物藥物發(fā)現(xiàn)和診斷領域中克服YSD挑戰(zhàn)的創(chuàng)新方法。2.開發(fā)新型表達系統(tǒng):通過合成生物學技術,研究人員設計并開發(fā)了新型的酵母表達系統(tǒng),如華東理工大學蔡孟浩課題組開發(fā)的可響應用戶自定義信號的高效畢赤酵母蛋白表達平臺,這一平臺通過簡單地“插拔”已知或篩選得到的低強度啟動子,實現(xiàn)對特定信號的嚴謹調(diào)控和高效響應。3.疫苗開發(fā):酵母表達系統(tǒng)被用于病毒樣顆粒(VLPs)疫苗的開發(fā),這些VLPs因其高安全性和免疫原性,成為疫苗開發(fā)中的重要平臺。例如,上市的VLPs疫苗Gardasil(佳達修)就是通過在酵母中表達HPV的主要衣殼蛋白L1并自組裝成VLPs。4.藥物遞送系統(tǒng):VLPs由于其內(nèi)部空腔,可作為藥物遞送載體,酵母表達系統(tǒng)在這一領域的應用為藥物發(fā)現(xiàn)提供了新的策略。
DL2000 Plus DNA Marker:精細的DNA分子量標準DL2000 Plus DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標準,廣應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠為DNA分析提供精確的分子量參考。產(chǎn)品特點組成:DL2000 Plus DNA Marker 由8條線狀雙鏈DNA片段組成,條帶大小分別為100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、2000 bp、3000 bp和5000 bp。其中750 bp條帶濃度較高,顯示為亮帶。即用型設計:已預混1×Loading Buffer,使用時無需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存三個月,長期保存建議置于-20℃。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融,以防止核酸酶污染導致條帶降解。避免加熱:使用前無需加熱,直接上樣。電泳緩沖液:及時更換電泳緩沖液,使用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用GenGreen等安全染料,染色效果更佳。應用場景DL2000 Plus DNA Marker 適用于常規(guī)PCR產(chǎn)物、基因組DNA片段等的大小鑒定,特別適合需要精確測定DNA片段大小的實驗,如基因編輯驗證、小片段插入/缺失分析等。Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在定量PCR中的兼容性 預混染料可直接用于實時熒光定量PCR,無需額外添加染料。
除了His標簽和GST標簽,還有多種融合伴侶技術可以用于提高蛋白的表達和純度,包括但不限于以下幾種:1.Flag標簽:Flag是一個八肽序列(DYKDDDDK),可以通過抗Flag標簽的抗體進行免疫沉淀或西方印跡分析,有助于提高蛋白的純度。2.Fc融合蛋白:Fc標簽是免疫球蛋白的恒定區(qū),可以提高蛋白在哺乳動物細胞中的溶解性和穩(wěn)定性,并且可以通過蛋白A親和層析進行純化。3.人血清白蛋白(HSA):HSA作為融合伴侶可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,延長半衰期,并通過其固有的結合特性進行純化。4.轉鐵蛋白:轉鐵蛋白可以作為融合伴侶,利用其與鐵的高親和力進行純化,并且有助于提高蛋白的穩(wěn)定性。5.XTEN聚合物:XTEN是一種柔性的多肽聚合物,可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,有助于防止聚集。6.彈性蛋白樣多肽(ELP):ELP具有可逆的熱響應性質(zhì),可以通過溫度誘導的相分離進行純化,有助于提高純度。7.Strep標簽:Strep標簽是一個短肽序列,可以通過Strep-Tactin親和層析進行高效率的純化。8.MBP融合蛋白:麥芽糖結合蛋白(MBP)可以作為融合伴侶,提高蛋白的溶解性,并通過親和層析進行純化。。TBE緩沖液因其穩(wěn)定的pH值和良好的導電性,能夠為DNA電泳提供理想的條件。安徽大腸桿菌表達技術服務臨床前研究
Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在多重PCR中的潛力 其高效擴增能力和染料兼容性支持多重PCR反應,適合多靶點。吉林酶定向進化技術服務技術服務
使用10×MOPSRNA緩沖液進行RNA電泳后,染色和檢測是關鍵步驟,以下是詳細的染色和檢測流程:1.電泳完成:-確保RNA樣品已經(jīng)在瓊脂糖凝膠中完成電泳,RNA條帶已經(jīng)形成。2.染色:-染色劑選擇:常用的核酸染料包括溴乙錠(EthidiumBromide,EtBr)和SYBRGreen。EtBr是一種熒光染料,可以與核酸分子結合,使其在紫外光下發(fā)出熒光;SYBRGreen也是一種熒光染料,但比EtBr更安全,毒性較低。-染色方法:-EtBr染色:將凝膠浸入含有0.5-2.0μg/mLEtBr的1×TAE或1×TBE緩沖液中,染色10-30分鐘。注意EtBr具有毒性,操作時應佩戴手套和防護眼鏡。-SYBRGreen染色:將凝膠浸入含有1:10000稀釋的SYBRGreen溶液中,染色10-30分鐘。3.去染色劑:-染色完成后,將凝膠從染色劑中取出,用1×MOPS緩沖液或其他適當?shù)木彌_液輕輕沖洗,去除多余的染色劑。4.檢測:-紫外光照射:將染色后的凝膠放置在紫外光照射箱中,使用紫外光源照射凝膠。-觀察和記錄:在紫外光下觀察RNA條帶,使用凝膠成像系統(tǒng)或紫外光相機記錄電泳結果。RNA條帶會發(fā)出明亮的熒光,便于觀察和分析。吉林酶定向進化技術服務技術服務
ris-硼酸電泳粉劑(5×TBE):高效、經(jīng)濟的DNA電泳緩沖液在分子生物學實驗中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的關鍵技術之一。Tris-硼酸電泳粉劑(5×TBE)作為一種高效、經(jīng)濟的緩沖液原料,因其出色的性能和便捷性,成為實驗室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點與優(yōu)勢Tris-硼酸電泳粉劑(5×TBE)是一種高濃度的緩沖液原料,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶...