DNA Marker II:高效、精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker II 是一種廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳的即用型DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),用于快速估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠?yàn)镈NA分析提供清晰、準(zhǔn)確的分子量參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:DNA Marker II 通常包含6-8條不同長度的DNA片段,覆蓋從100 bp到2000 bp的范圍。具體片段長度可能因品牌而異,但常見的片段包括100 bp、200 bp、500 bp、1000 bp和2000 bp。即用型設(shè)計(jì):預(yù)混了1×Loading Buffer,無需額外添加,直接上樣,節(jié)省時間和操作步驟。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻,便于在紫外燈下觀察。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存6個月,長期保存建議置于-20℃,避免反復(fù)凍融。使用方法上樣量:建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-2.0%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5×TBE緩沖液,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融,以防止核酸酶污染導(dǎo)致條帶降解。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。DL3000 DNA Marker憑借其準(zhǔn)確的分子量范圍、清晰的條帶和便捷的操作,成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具。浙江抗體表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
除了畢赤酵母,還有幾種常用的表達(dá)系統(tǒng)可以用來提高重組蛋白的表達(dá)量和純度:1.大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng):大腸桿菌是常用的原核表達(dá)系統(tǒng),具有遺傳背景清晰、培養(yǎng)簡單、成本低廉等優(yōu)點(diǎn),適合快速表達(dá)和生產(chǎn)目的蛋白。但是,它不能進(jìn)行復(fù)雜的翻譯后修飾。2.釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng):釀酒酵母是一種真核表達(dá)系統(tǒng),具有蛋白質(zhì)翻譯后加工能力,適合于表達(dá)真核的蛋白,且培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化操作簡便,適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。3.昆蟲/桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng):這種系統(tǒng)可以對真核的蛋白進(jìn)行翻譯后加工,適合于表達(dá)復(fù)雜糖蛋白,且具有較高的表達(dá)量和純度。4.哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):如HEK293細(xì)胞,能夠進(jìn)行與人類相似的翻譯后修飾,適合表達(dá)需要復(fù)雜糖基化等修飾的蛋白,但成本相對較高。5.枯草桿菌表達(dá)系統(tǒng):枯草桿菌具有蛋白分泌能力強(qiáng)、培養(yǎng)簡單等優(yōu)點(diǎn),適合于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)。6.粟酒裂殖酵母:其生理特性接近高等生物,適合表達(dá)真核膜蛋白。每種表達(dá)系統(tǒng)都有其獨(dú)特的優(yōu)勢和局限性,選擇時需要考慮目標(biāo)蛋白的特性、所需的翻譯后修飾、成本、產(chǎn)量以及純化路線等因素。通過優(yōu)化表達(dá)載體設(shè)計(jì)、position:absolute;left:269px;top:94px;">大腸桿菌表達(dá)技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)通過其獨(dú)特的酶體系和優(yōu)化配方,為長片段PCR擴(kuò)增提供便捷的解決方案。
確保CHO細(xì)胞株在大規(guī)模生產(chǎn)中的穩(wěn)定性和產(chǎn)量涉及到多個方面的優(yōu)化和控制策略:1.細(xì)胞株開發(fā):構(gòu)建高表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞株是生物制藥工藝的關(guān)鍵步驟。通過使用GS篩選系統(tǒng)原理,利用谷氨酰胺合成酶(GS)抑制劑MSX,篩選含有額外GS基因的細(xì)胞,以獲得高表達(dá)的細(xì)胞株。2.宿主細(xì)胞選擇:工業(yè)上主要使用CHO-K1和GS缺陷型細(xì)胞,如CHOK1SV-KO、CHOZN和HD-BIOP3。這些細(xì)胞株的選擇對后續(xù)的表達(dá)和穩(wěn)定性有重要影響。3.細(xì)胞株篩選:通過轉(zhuǎn)染和Minipools篩選,選取表達(dá)量高的細(xì)胞群體,然后進(jìn)行單克隆化,篩選出比較好的單克隆細(xì)胞株。4.個性化產(chǎn)量優(yōu)化:根據(jù)細(xì)胞株的生長特性,優(yōu)化培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,包括流加表達(dá)工藝和調(diào)糖培養(yǎng)基的使用,以提高產(chǎn)量和調(diào)節(jié)糖型比例。5.質(zhì)量評估系統(tǒng):建立完善的抗體質(zhì)量評估系統(tǒng),包括效價、活性、聚體分析、糖基化分析和效能分析,確保產(chǎn)品質(zhì)量。6.穩(wěn)定性分析:進(jìn)行基因型和表型穩(wěn)定性分析,包括傳代穩(wěn)定性分析,以確保細(xì)胞株在長期生產(chǎn)中的穩(wěn)定性。7.氨基酸優(yōu)化:優(yōu)化氨基酸的組成和濃度,特別是天冬酰胺、谷氨酰胺和半胱氨酸,以支持細(xì)胞的高密度生長和產(chǎn)物的高表達(dá)。
0×TAE粉劑是一種高濃度的緩沖液原料,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、醋酸鈉和EDTA(乙二胺四乙酸)。它是一種廣用于瓊脂糖凝膠電泳的緩沖液,能夠?yàn)镈NA片段的分離和分析提供穩(wěn)定的環(huán)境。50×TAE粉劑的優(yōu)勢高效分離:TAE緩沖液在低濃度下具有較低的離子強(qiáng)度,特別適合分離大分子量的DNA片段。它能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA在電泳過程中保持完整結(jié)構(gòu)。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:50×TAE粉劑以高濃度形式提供,用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求自行配制不同體積的工作液,降低了成本,同時也減少了儲存空間。穩(wěn)定性高:粉劑形式的TAE在保存和運(yùn)輸過程中更加穩(wěn)定,不易受環(huán)境因素影響。使用時只需按照說明溶解于去離子水中,即可得到所需的緩沖液。使用方法使用50×TAE粉劑時,需按照以下步驟配制緩沖液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,稱取適量的50×TAE粉劑。將粉劑溶解于適量的去離子水中,攪拌至完全溶解。定容至所需體積,得到50×TAE濃縮液。使用時,將50×TAE濃縮液按1:49的比例稀釋至1×TAE工作液,即可用于瓊脂糖凝膠電泳。保存與注意事項(xiàng)50×TAE粉劑應(yīng)保存在干燥、陰涼處,避免受潮和污染。配制好的緩沖液可在室溫或4℃條件下保存,但需注意定期檢查其pH值和透明度,確保緩沖液的穩(wěn)定性。GoldenView II廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如基因克隆、PCR產(chǎn)物分析和質(zhì)粒提取等。
DL1000 Plus:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的高效工具在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker是分析DNA片段大小的關(guān)鍵工具之一。DL1000 Plus作為一款經(jīng)典的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),憑借其精細(xì)的條帶分布和便捷的操作,為實(shí)驗(yàn)人員提供了可靠的參考。DL1000 Plus是一種即用型DNA Marker,已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。它由7-10條不同長度的線狀雙鏈DNA片段組成,覆蓋100 bp到1000 bp或更寬范圍,具體條帶包括100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp、700 bp、800 bp、900 bp和1000 bp。其中部分條帶(如400 bp或500 bp)的濃度較高,顯示為亮帶,便于快速定位。該產(chǎn)品具有條帶清晰、亮度均勻的特點(diǎn),即使在反復(fù)凍融后仍能保持良好的穩(wěn)定性。其保存條件為-20℃長期保存,融化后可在4℃保存,避免反復(fù)凍融。使用時,推薦取5-10 μL進(jìn)行電泳,適用于2%-3%的瓊脂糖凝膠。DL1000 Plus不僅適用于常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳,還可用于非變性PAGE膠的分析。其優(yōu)化的Loading Buffer染料不會遮擋DNA條帶的熒光亮度,確保電泳圖像清晰??傊?,DL1000 Plus憑借其精細(xì)的分子量范圍、清晰的條帶和便捷的操作,成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的得力助手。該產(chǎn)品預(yù)混了電泳指示劑,PCR產(chǎn)物可直接進(jìn)行電泳分析,無需額外添加Loading Dye進(jìn)一步提高了實(shí)驗(yàn)的便捷性。遼寧HPV病毒樣顆粒表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)臨床前研究
DNA Marker I是一種即用型產(chǎn)品,已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接取5-10 μL用于電泳,無需額外處理。浙江抗體表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)的密碼子優(yōu)化是提高外源蛋白表達(dá)效率的重要策略之一。密碼子優(yōu)化主要涉及以下幾個方面:1.密碼子使用偏好:通過檢查畢赤酵母基因組的密碼子偏好譜,可以確定密碼子翻譯效率和使用頻率之間的直接相關(guān)性。2.密碼子優(yōu)化策略:對目的基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化,以適應(yīng)畢赤酵母的密碼子使用偏好。這通常包括將基因中的密碼子修改為畢赤酵母偏好的密碼子,從而提高mRNA的翻譯效率。3.GC含量調(diào)整:密碼子優(yōu)化過程中,需要考慮外源基因的GC含量,以避免由于GC含量過高或過低導(dǎo)致的mRNA結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定或轉(zhuǎn)錄提前終止的問題。4.避免稀有密碼子:去除或替換那些在畢赤酵母中使用頻率較低的稀有密碼子,以減少翻譯過程中可能出現(xiàn)的障礙。5.提高表達(dá)水平:通過密碼子優(yōu)化,可以顯著提高外源蛋白在畢赤酵母中的表達(dá)水平,有時甚至可以提高數(shù)倍到數(shù)十倍。6.基因工程應(yīng)用:在實(shí)際應(yīng)用中,例如人溶菌酶基因的密碼子優(yōu)化,通過使用畢赤酵母偏好的密碼子替換原有密碼子,成功提高了基因在畢赤酵母中的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平。浙江抗體表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
ris-硼酸電泳粉劑(5×TBE):高效、經(jīng)濟(jì)的DNA電泳緩沖液在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的關(guān)鍵技術(shù)之一。Tris-硼酸電泳粉劑(5×TBE)作為一種高效、經(jīng)濟(jì)的緩沖液原料,因其出色的性能和便捷性,成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢Tris-硼酸電泳粉劑(5×TBE)是一種高濃度的緩沖液原料,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強(qiáng)度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶...