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企業(yè)商機
技術(shù)服務基本參數(shù)
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技術(shù)服務企業(yè)商機

M-MLVAdvanceFastReverseTranscriptase(200U/μL)是一種高效的逆轉(zhuǎn)錄酶,用于將RNA模板轉(zhuǎn)換成cDNA。這種酶是從MoloneyMurineLeukemiaVirus(M-MLV)衍生而來,經(jīng)過基因工程改造,以提高其熱穩(wěn)定性和合成效率。以下是該產(chǎn)品的一些關(guān)鍵特點和應用:1.**高濃度**:提供200U/μL的高濃度,便于進行各種規(guī)模的實驗。2.**熱穩(wěn)定性**:該酶具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高達55°C的溫度下進行逆轉(zhuǎn)錄反應,這有助于打開RNA的二級結(jié)構(gòu),提高長鏈cDNA的合成效率。3.**低RNaseH活性**:與野生型M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶相比,這種酶的RNaseH活性較低,有助于保護RNA模板不被降解,從而提高長鏈cDNA的合成。4.**合成長鏈cDNA的能力**:能夠合成長達7kb的cDNA,適合于需要合成長片段cDNA的實驗。5.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA鏈,適用于實時熒光定量RT-PCR、3'-和5'-RACE等實驗。6.**儲存條件**:建議在-20°C下保存,以保持酶的活性和穩(wěn)定性。7.**使用方便**:通常,該酶會與5XFirst-StrandBuffer、0.1MDTT等組分一起提供,方便用戶進行逆轉(zhuǎn)錄反應。8.**產(chǎn)品規(guī)格**:提供不同規(guī)格的產(chǎn)品,以滿足不同實驗規(guī)模的需求。通過基因工程技術(shù),將編碼抗體的基因插入到表達載體中,并在適當?shù)谋磉_系統(tǒng)中進行高效表達。上海HPV病毒樣顆粒表達服務技術(shù)服務研發(fā)

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使用M-MLVUltraReverseTranscriptase(200U/μL)進行逆轉(zhuǎn)錄時,通常需要以下緩沖液和其他組分:1.**反應緩沖液**:通常提供的5XFirst-StrandBuffer,使用時需稀釋成1X工作濃度。例如,5XReverseTranscriptaseM-MLVBuffer的組成可能包含Tris-HCl(pH8.3)、KCl、MgCl2、DTT等。2.**dNTP混合物**:包含四種去氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP),通常為10mM的濃度,使用時稀釋至反應所需的濃度(如0.5-1mM)。3.**引物**:可以是Oligo(dT)引物、隨機六聚體引物(RandomPrimers)或基因特異性引物(GeneSpecificPrimers),用于與RNA模板退火并啟動cDNA合成。4.**RNA模板**:可以是總RNA或mRNA,根據(jù)實驗需求確定使用量,一般為10pg至5μg。5.**RNase抑制劑**:如RNaseInhibitor(40U/μl),用于防止RNA模板被RNase酶降解。6.**水**:RNase-free的水,確保反應體系中沒有核酸酶污染。7.**逆轉(zhuǎn)錄酶**:M-MLVUltraReverseTranscriptase(200U/μL),通常在反應中加入,使用量根據(jù)模板RNA的量和酶的活性單位來確定。上海HPV病毒樣顆粒表達服務技術(shù)服務研發(fā)膠原蛋白有較長的半衰期、機械強度、組裝成纖維和網(wǎng)絡的能力、生物相容性,并且可從廢棄的動物組織中獲取。

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熱敏感性雙鏈脫氧核糖核酸酶(ThermolabiledsDNase)是一種用于快速、安全地去除RNA樣品中基因組DNA污染的重組表達的酶。以下是其主要特點和應用:1.**dsDNA特異性**:ThermolabiledsDNase能夠特異性剪切雙鏈DNA中的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生帶有5’-磷酸與3’-羥基末端的寡核苷酸,而對單鏈DNA(如cDNA)和RNA幾乎無酶切活性。在鎂離子存在的情況下,對dsDNA的酶切活性比對ssDNA的酶切活性高約5000倍。2.**熱不穩(wěn)定性**:該酶在55℃加熱5分鐘即可被不可逆地失活,這使得它非常適合在反轉(zhuǎn)錄之前快速去除RNA樣品中的基因組DNA污染。3.**活性強**:ThermolabiledsDNase在20-40℃保持高活性狀態(tài),比牛DNaseI的活力約高30倍。2分鐘孵育即可將RNA樣品中所含有的基因組DNA或1μg基因組DNA消化完畢。4.**用途**:主要用于制備不含DNA的RNA樣品;在反轉(zhuǎn)錄前去除RNA樣品中的基因組DNA污染;以及在體外T3、T7、SP6等RNAPolymerases催化的RNA合成后消化去除模板DNA。5.**來源**:通過_Pichiapastoris_重組表達ThermolabiledsDNase基因。6.**分子量**:43kDa。7.**純度**:不含其他DNA內(nèi)切酶與外切酶活性,不含RNA酶活性。

TthDNAPolymerase(5U/μL)在分子生物學實驗中的應用非常廣,主要包括以下幾個方面:1.**常規(guī)PCR擴增**:TthDNAPolymerase能夠在74°C下進行DNA復制,具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′核酸外切酶活性,適用于常規(guī)PCR反應,可以高效地擴增目標DNA片段。2.**逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)**:在Mn2+存在的條件下,TthDNAPolymerase表現(xiàn)出較強的逆轉(zhuǎn)錄活性,可以用于一步法RT-PCR反應,有效地將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,并進行后續(xù)的PCR擴增。這種特性使得TthDNAPolymerase在RNA樣本檢測中非常有用,尤其是在需要快速從RNA得到cDNA的實驗中。3.**熱啟動PCR(HotStartPCR)**:TthDNAPolymerase可以用于熱啟動PCR,這是一種提高PCR反應特異性的技術(shù)。通過在低溫下封閉DNA聚合酶的活性部位,避免非特異性擴增,然后在高溫下解除封閉,從而保證只產(chǎn)生特異性擴增。4.**耐受PCR抑制成分**:TthDNAPolymerase對于血液、肌肉等生物組織中含有的肌紅蛋白等PCR抑制成分具有較強的耐受性,十分適用于粗樣本快速檢測。5.**高靈敏度檢測**:TthDNAPolymerase的PCR擴增檢測靈敏度可達100pg,這使得它在需要高靈敏度檢測的實驗中非常有用。

根據(jù)目標蛋白的特性,選擇合適的表達系統(tǒng),如原核(如大腸桿菌)、真核(如酵母、)或無細胞系統(tǒng)。

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熱敏感性雙鏈脫氧核糖核酸酶(ThermolabiledsDNase)的熱穩(wěn)定性是指該酶在特定溫度條件下能夠保持其活性的能力。然而,ThermolabiledsDNase的一個特性是其熱敏感性,即該酶在相對較高的溫度下(通常為55°C)可以被快速且不可逆地失活。這種特性對于實驗操作非常有利,因為它允許在消化雙鏈DNA后,通過簡單的熱處理步驟來確保酶的完全失活,從而避免對后續(xù)實驗步驟的干擾。具體來說,ThermolabiledsDNase在20-40°C的溫度范圍內(nèi)保持高活性狀態(tài),其對雙鏈DNA的酶切活性比對單鏈DNA高出約5000倍。此外,該酶的活性比牛DNaseI的活力高出約30倍。然而,ThermolabiledsDNase的熱敏感性意味著它可以通過55°C加熱5分鐘而完全且不可逆地滅活。這種熱敏感性與熱穩(wěn)定性是兩個不同的概念。熱穩(wěn)定性通常描述一個酶在高溫下保持其結(jié)構(gòu)和功能的能力,而ThermolabiledsDNase的熱敏感性則強調(diào)了該酶在特定溫度下失活的特性。這種熱敏感性使得ThermolabiledsDNase成為一個非常有用的工具,特別是在需要快速去除RNA樣品中的基因組DNA污染,而又不希望引入額外的抑制劑或保護劑的實驗中。評估抗體的免疫原性,包括其在實驗動物體內(nèi)誘發(fā)的免疫反應。這通常涉及對抗體藥物的抗藥抗體進行檢測。黑龍江人源膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務技術(shù)服務

探索生產(chǎn)人體膠原蛋白的新方法對于其生物醫(yī)學和臨床應用至關(guān)重要。上海HPV病毒樣顆粒表達服務技術(shù)服務研發(fā)

ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一種一步法反轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR(qRT-PCR)試劑盒,它整合了反轉(zhuǎn)錄和PCR步驟,簡化了操作流程。除了用于qRT-PCR,這種試劑盒還可以應用于多種分子生物學實驗,包括但不限于:1.**基因表達分析**:通過實時監(jiān)測PCR反應過程,廣泛應用于基因表達分析,可以準確檢測和量化基因表達靶標。2.**基因分型和基因變異分析**:用于分析單核苷酸多態(tài)性(SNP)、拷貝數(shù)變異(CNV)和其他遺傳變異。3.**病原體和微生物檢測**:以高靈敏度和高特異性檢測細菌和病毒靶標。4.**多重檢測**:可以在單個反應孔中進行多重檢測,不同基因?qū)煌结槪煌结槍煌瑹晒鈽擞?,進行多重熒光定量PCR檢測。5.**防污染操作**:通過添加UNG酶,該試劑盒還可進行防污染操作,有效消除PCR擴增過程中帶來的產(chǎn)物污染問題。6.**RNA病毒或低表達mRNA的檢測**:由于其高靈敏度,該試劑盒適合于檢測RNA病毒或表達水平較低的mRNA。7.**cDNA合成**:在生成cDNA、進行northern印跡分析、S1核酸酶檢測、RNase保護檢測、逆轉(zhuǎn)錄PCR和差異顯示PCR之前,可以快速準確測量RNA。

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