胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn)和用途:1.**成分**:該培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉幫助維持滲透壓。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:主要用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性增菌培養(yǎng),也可用于MPN值測(cè)定和消毒劑消毒效果的測(cè)試。4.**添加劑**:在使用時(shí),需要添加多粘菌素B以抑制雜菌的生長(zhǎng),促進(jìn)目標(biāo)微生物蠟樣芽孢桿菌的生長(zhǎng)。多粘菌素B的添加量根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行,例如每100ml培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培養(yǎng)基添加1支多粘菌素B(2.25萬(wàn)單位)。5.**制備方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后冷卻至50℃左右,加入多粘菌素B,混勻后無(wú)菌分裝于滅菌試管中備用。6.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在30℃下培養(yǎng)48小時(shí),應(yīng)觀察到良好的生長(zhǎng)和溶液混濁,以驗(yàn)證培養(yǎng)基的有效性。
半固體儲(chǔ)存培養(yǎng)基是一種在微生物學(xué)研究和細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域中扮演重要角色的培養(yǎng)基。它主要用于觀察微生物的動(dòng)力、菌種的保藏與運(yùn)輸、厭氧菌的培養(yǎng)、菌種鑒定、細(xì)胞培養(yǎng)、噬菌體效價(jià)測(cè)定以及微生物趨化性研究等。半固體培養(yǎng)基通常由液體培養(yǎng)基加入少量凝固劑制成,例如瓊脂的用量在0.2~0.7%之間。在具體應(yīng)用上,半固體培養(yǎng)基可以用于以下方面:1.**微生物動(dòng)力觀察**:通過(guò)推測(cè)細(xì)菌是否有鞭毛來(lái)進(jìn)行鑒定。2.**菌種保藏與運(yùn)輸**:便于菌種的短時(shí)間保存和長(zhǎng)途運(yùn)輸。3.**厭氧菌培養(yǎng)**:適用于厭氧菌的培養(yǎng),對(duì)于研究厭氧微生物的生長(zhǎng)和代謝至關(guān)重要。4.**菌種鑒定**:通過(guò)觀察菌落的形態(tài)和生長(zhǎng)特性來(lái)區(qū)分不同的微生物種類。5.**細(xì)胞培養(yǎng)**:在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,半固體培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞、細(xì)胞克隆、細(xì)胞表達(dá)和細(xì)胞毒性等實(shí)驗(yàn)。6.**噬菌體效價(jià)測(cè)定**:用于雙層平板法測(cè)定噬菌體的效價(jià),是研究病毒與宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趨化性研究**:幫助研究微生物的趨化性,即微生物對(duì)化學(xué)物質(zhì)的定向移動(dòng)反應(yīng)。沙氏葡萄糖瓊脂平板水瓊脂培養(yǎng)基主要由瓊脂和水組成,是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,可以為微生物提供生長(zhǎng)所需的基本環(huán)境。
四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無(wú)水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時(shí),每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長(zhǎng)。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng)。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)是一種常用的微生物固體培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種細(xì)菌的分離和培養(yǎng)。以下是TSA培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化鈉(5g/L)和瓊脂(15g/L),這些成分為細(xì)菌提供氮源、維生素、生長(zhǎng)因子以及維持滲透壓和凝固培養(yǎng)基。2.**pH值**:TSA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.3±0.2(25℃),以滿足大多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的需要。3.**用途**:TSA培養(yǎng)基適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng),包括非選擇性增菌培養(yǎng)及用于阪崎腸桿菌的純化培養(yǎng)和產(chǎn)黃色素試驗(yàn)。4.**制備方法**:將TSA培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解,通常分裝到試管或平皿中,經(jīng)過(guò)高壓滅菌后備用。5.**保存條件**:未開(kāi)封的TSA培養(yǎng)基通常在室溫下避光保存,保質(zhì)期可達(dá)三年。開(kāi)封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長(zhǎng)保存期。6.**注意事項(xiàng)**:在稱量和操作過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免微生物污染。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。粉塵可能引起呼吸道不適,操作時(shí)應(yīng)佩戴口罩。7.**應(yīng)用**:TSA培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測(cè)和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。GAM肉湯培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于菌種的生長(zhǎng)、保存和實(shí)驗(yàn)操作。它支持多種微生物的生長(zhǎng),并在菌種冷凍保存中。
酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,尤其是在酵母菌的培養(yǎng)中。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養(yǎng)基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調(diào)節(jié)在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致培養(yǎng)基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養(yǎng),也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數(shù)測(cè)定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲(chǔ)存條件**:液體YPDA培養(yǎng)基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個(gè)月。7.**微生物生長(zhǎng)特征**:不同細(xì)菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。NA頭孢菌素酶平板
TSFA主要用于乳制品中嗜冷菌菌落總數(shù)和需氧芽孢總數(shù)的測(cè)定,對(duì)于確保乳制品的質(zhì)量和安全至關(guān)重要 。STAA瓊脂培養(yǎng)皿
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)(PalcamAgarBase)是一種用于分離單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的特點(diǎn)如下:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、檸檬酸鐵銨、七葉苷、氯化鋰、酚紅和瓊脂等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為李斯特氏菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌,從而提高對(duì)李斯特氏菌的選擇性。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**配制方法**:通常稱取71.9g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。使用時(shí),冷卻至50℃,加入配套的添加劑,混勻后傾入無(wú)菌培養(yǎng)皿。6.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。