錳鹽營養(yǎng)瓊脂(ManganeseNutrientAgar)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗。以下是它的一些主要特點和用途:1.**成分**:通常包含硫酸錳、蛋白胨、牛肉粉、氯化鈉和瓊脂。其中,硫酸錳的含量為0.0308g/L,蛋白胨為10.0g/L,牛肉粉為3.0g/L,氯化鈉為5.0g/L,瓊脂為15.0g/L。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗,也可用于芽孢桿菌或梭菌的培養(yǎng)和孢子的形成。4.**檢驗原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂作為培養(yǎng)基的凝固劑;硫酸錳可促進芽孢的生成。5.**使用方法**:稱取本品33.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。需要注意的是,由于培養(yǎng)基中含有少量硫酸錳,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。6.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株,如短小芽孢桿菌CMCC(B)63202、枯草芽孢桿菌黑色變種ATCC9372等,放置于55℃需氧培養(yǎng)48小時,以驗證培養(yǎng)基的性能。巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。尿素瓊脂(pH7.2)預裝培養(yǎng)皿
改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)是一種用于微生物學研究和診斷的培養(yǎng)基,它具有一些特定的特點和用途:1.**選擇性分離培養(yǎng)基**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)主要用于李斯特氏菌的選擇性分離。它通過添加特定的抗生物質(zhì)或化學物質(zhì),抑制其他非目標微生物的生長,從而促進目標微生物——在這種情況下是李斯特氏菌的生長。2.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括酪胨、多價胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、甘氨酸、氯化鋰和瓊脂等。這些成分為微生物提供了生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境。3.**pH值**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)的pH值通??刂圃?.3±0.2(25℃),這為李斯特氏菌的生長提供了適宜的酸堿環(huán)境。4.**添加物**:在使用時,每升培養(yǎng)基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg環(huán)乙酰亞胺或30mg復達欣,這些添加物有助于抑制其他微生物的生長,提高李斯特氏菌分離的選擇性。5.**高壓滅菌**:在制備過程中,需要將培養(yǎng)基加熱至完全溶解,然后進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保培養(yǎng)基的無菌性。6.**冷卻和添加抗生物質(zhì)**:滅菌后,培養(yǎng)基需要冷卻至50℃,然后在無菌環(huán)境下加入抗生物質(zhì),備用。
腦心浸出液肉湯(BHI/BHIB)是一種微生物培養(yǎng)基,特別適用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細菌。以下是BHI培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點:1.**配方組成**:-蛋白胨:10.0g-脫水小牛腦浸粉:12.5g-脫水牛心浸粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:2.0g-磷酸氫二鈉:2.5g-pH值:7.4±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取38.5gBHI培養(yǎng)基粉末,加入1000ml蒸餾水。-加熱攪拌至完全溶解,通常在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:-用于培養(yǎng)各種苛養(yǎng)型致病微生物,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌。-用于培養(yǎng)單增李斯特菌,可極大的增加李斯特菌培養(yǎng)時的OD值。-加入腹水后,可用于淋球菌的培養(yǎng)。-用于葡萄球菌的血漿凝固酶試驗。-作為檢測培養(yǎng)基,用于檢測水、廢水、肉類和食品。-作為藥敏實驗的接種用培養(yǎng)基。-可用來配制血液培養(yǎng)基。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)。5.**保存條件**:-2-8°C保存。6.**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。-使用前請檢查平板內(nèi)是否干裂或染菌,若長菌請勿使用。-4°C儲存的平板出現(xiàn)冷凝水屬正?,F(xiàn)象,請在潔凈環(huán)境下將水倒出后使用。-請在潔凈環(huán)境下操作,開封后請盡快使用,避免雜菌干擾。
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點和配制方法:**特點**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時應(yīng)在通風櫥中進行,并佩戴適當?shù)膫€人防護裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。PK瓊脂培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和分離特定的微生物,如腸道桿菌等。它也可用于微生物的鑒定,通過觀察菌落形態(tài)等。
SH培養(yǎng)基(Schenk&HildebrandtMedium)是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于單子葉和雙子葉植物細胞的懸浮培養(yǎng)。它含有相對較低的銨鹽和較高的硝酸鹽,以及豐富的維生素和無機鹽,適合許多植物種類的生長。**配方組成**:-硝酸鉀(KNO3):2500.00mg/L-磷酸二氫銨(NH4H2PO4):300.00mg/L-氯化鈣(CaCl2·2H2O):200.00mg/L-硫酸鎂(MgSO4):195.34mg/L-硫酸錳(MnSO4·H2O):10.00mg/L-硼酸(H3BO3):5.00mg/L-碘化鉀(KI):1.00mg/L-鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O):0.10mg/L-硫酸鋅(ZnSO4·7H2O):1.00mg/L-硫酸銅(CuSO4·5H2O):0.20mg/L-氯化鈷(CoCl2·6H2O):0.10mg/L-硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O):15.00mg/L-EDTA二鈉(Na2EDTA·2H2O):20.00mg/L-肌醇(myo-Inositol):1000.00mg/L-鹽酸硫胺素(Thiaminehydrochloride):5.00mg/L-鹽酸吡哆醇(Pyridoxinehydrochloride):0.50mg/L-煙酸(Nicotinicacid):5.00mg/L-蔗糖(Sucrose):20000.00mg/L**配制方法**:1.用600ml滅菌后的蒸餾水溶解脫水培養(yǎng)基,用少量蒸餾水沖洗殘余培養(yǎng)基粉末。2.輕輕攪動使培養(yǎng)基完全溶解。3.加入所有熱穩(wěn)定添加劑。通常將卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的粉成分溶解于蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后高壓蒸汽滅菌15分鐘。NAC瓊脂預裝培養(yǎng)皿
TSFA含有胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、瓊脂和脫脂奶粉等成分,為嗜冷菌提供碳源、氮源、維生素和生長因子。尿素瓊脂(pH7.2)預裝培養(yǎng)皿
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。