酪蛋白瓊脂是一種專門用于微生物學(xué)研究的培養(yǎng)基,尤其適用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酪蛋白瓊脂的基礎(chǔ)成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、瓊脂和溴百里香酚蘭。其中,酪蛋白作為主要的氮源和蛋白分解能力的指示劑,牛肉浸粉提供額外的氮源和維生素,氯化鈉維持滲透壓平衡,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,溴百里香酚蘭作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃),以保證細(xì)菌在比較好pH環(huán)境下生長。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到1升蒸餾水中,加熱至完全溶解,然后進(jìn)行滅菌處理。冷卻至適當(dāng)溫度后倒入培養(yǎng)皿中,待凝固后用于微生物的培養(yǎng)。5.**培養(yǎng)特征**:在酪蛋白瓊脂上,蠟樣芽孢桿菌能產(chǎn)生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周圍的培養(yǎng)基形成透明圈。這種透明圈的形成是鑒定蠟樣芽孢桿菌的重要依據(jù)。同時,溴百里香酚蘭的顏色變化(由綠變藍(lán))也有助于觀察結(jié)果。6.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來驗證培養(yǎng)基的質(zhì)量。木糖明膠培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明膠、木糖、磷酸氫二鈉和酚紅等。BPL瓊脂平板
SlantzandBartley培養(yǎng)基是一種專門設(shè)計用于分離和計數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于水和食品樣本中的腸球菌檢測。以下是它的一些特點:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氫鉀、疊氮鈉和瓊脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供細(xì)菌生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),葡萄糖作為碳源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,疊氮鈉作為抑菌劑抑制革蘭氏陰性菌的生長,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉對革蘭氏陰性菌具有抑制作用,確保培養(yǎng)基的選擇性。4.**應(yīng)用**:開始設(shè)計用于通過膜過濾技術(shù)檢測和計數(shù)腸球菌,但也證明作為直接涂布培養(yǎng)基同樣有效。5.**配制方法**:通常稱取41.5g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至沸騰以溶解瓊脂,高壓滅菌20分鐘。滅菌后冷卻至45-50°C,并分裝進(jìn)培養(yǎng)皿。6.**質(zhì)量控制**:通過特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試,確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長。例如,腸球菌ATCC29212在該培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長,而大腸桿菌ATCC25922則應(yīng)被抑制。7.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在15-30°C的陰涼干燥處。配制好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2-8°C。BPL瓊脂平板PK瓊脂培養(yǎng)基的制備通常包括將干燥的培養(yǎng)基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養(yǎng)皿中。
葡萄糖肉湯培養(yǎng)基(DextroseBroth)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,它主要含有蛋白胨、牛肉膏粉、氯化鈉和葡萄糖等成分。這種培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.3±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。**特點介紹**:1.**營養(yǎng)成分**:葡萄糖肉湯培養(yǎng)基含有的蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子,氯化鈉維持滲透壓,而葡萄糖則提供碳源。2.**應(yīng)用范圍**:它適用于營養(yǎng)要求高的細(xì)菌培養(yǎng),特別是用于一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢測和腸桿菌科細(xì)菌的葡萄糖產(chǎn)氣試驗。3.**制備方法**:一般操作是稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到一定量的蒸餾水或去離子水中,加熱攪拌煮沸至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。4.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試,可以確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長。例如,乙型溶血性鏈球菌ATCC21059在該培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長,而大腸埃希氏菌ATCC25922則用于測試培養(yǎng)基的特異性。葡萄糖肉湯培養(yǎng)基因其營養(yǎng)均衡和制備簡單,被用于微生物實驗室進(jìn)行細(xì)菌的分離、鑒定和培養(yǎng)研究。
甘氨酸培養(yǎng)基是一種專門用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點主要包括:1.**培養(yǎng)基成分**:甘氨酸培養(yǎng)基通常包含布氏肉湯、瓊脂和甘氨酸。其中,甘氨酸是該培養(yǎng)基的關(guān)鍵成分,通常添加量為10.0克/升。2.**pH調(diào)節(jié)**:甘氨酸培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行滅菌處理,通常采用121℃高壓滅菌15分鐘。4.**用途**:甘氨酸培養(yǎng)基主要用于彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗,如GB標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的。它特別適用于空腸彎曲菌和大腸彎曲菌的分離和培養(yǎng),因為這些細(xì)菌對甘氨酸有耐受性。在微需氧環(huán)境下,于42℃培養(yǎng)48小時后,若培養(yǎng)基表面出現(xiàn)云霧狀現(xiàn)象,則為陽性結(jié)果。5.**培養(yǎng)特征**:在甘氨酸培養(yǎng)基上,空腸彎曲桿菌能夠產(chǎn)生灰色、濕潤、平鋪的菌落,并且可能帶有金色金屬光澤。6.**制備方法**:將甘氨酸培養(yǎng)基的粉末成分溶解在適量的蒸餾水中,加熱以幫助溶解,然后進(jìn)行滅菌處理。在冷卻至大約50°C時,可以進(jìn)行倒平板或分裝試管。7.**儲存條件**:甘氨酸培養(yǎng)基通常需要在干燥、避光的條件下儲存,以保持其有效性。明膠的凝固點在28℃左右,受運(yùn)輸過程的溫度及震蕩影響,出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀,此為正常現(xiàn)象。
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮氣及5%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長良好。對于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時,需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標(biāo)細(xì)菌能夠在抑制雜菌的同時良好生長。例如,改良愛德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌。在實驗室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個多步驟的過程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進(jìn)行生化試驗和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準(zhǔn)確地識別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。TSFA含有胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、瓊脂和脫脂奶粉等成分,為嗜冷菌提供碳源、氮源、維生素和生長因子。MiddleBrook7H10瓊脂培養(yǎng)皿
GAM肉湯用于厭氧菌的培養(yǎng),是一般培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。它營養(yǎng)豐富,使用時無需加血,適用于各類厭氧菌的增菌 。BPL瓊脂平板
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實驗的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶嶒灧褪痔住?準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。