胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn)和用途:1.**成分**:該培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉幫助維持滲透壓。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性增菌培養(yǎng),也可用于MPN值測定和消毒劑消毒效果的測試。4.**添加劑**:在使用時(shí),需要添加多粘菌素B以抑制雜菌的生長,促進(jìn)目標(biāo)微生物蠟樣芽孢桿菌的生長。多粘菌素B的添加量根據(jù)產(chǎn)品說明進(jìn)行,例如每100ml培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培養(yǎng)基添加1支多粘菌素B(2.25萬單位)。5.**制備方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后冷卻至50℃左右,加入多粘菌素B,混勻后無菌分裝于滅菌試管中備用。6.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在30℃下培養(yǎng)48小時(shí),應(yīng)觀察到良好的生長和溶液混濁,以驗(yàn)證培養(yǎng)基的有效性。
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測和分離細(xì)菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調(diào)節(jié)pH至7.2,過濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細(xì)菌的脲酶檢測。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細(xì)菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)。5.**觀察指標(biāo)**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當(dāng)細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶分解尿素產(chǎn)生氨時(shí),培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細(xì)菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期三年。7.**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)在無菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在檢測和研究能夠分解尿素的細(xì)菌方面。改良BPLS瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿在冷凍保存過程中,使用保護(hù)劑如甘油、血清、糖類等,可以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害 。
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)是一種專門用于培養(yǎng)支原體的培養(yǎng)基,它包含精氨酸作為生長因子,適用于那些需要精氨酸才能生長的支原體,如口腔支原體等。以下是該培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:通常包含豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖、L-精氨酸和酚紅等成分。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末,按照說明書比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸餾水中。-加熱溶解并調(diào)節(jié)pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至室溫后,無菌操作下加入滅活小牛血清或馬血清(通常為200mL)和青霉素(通常為80萬單位)。-混勻后分裝到無菌試管中備用。3.**用途**:主要用于藥品和生物制品中支原體的檢測,特別是口腔支原體的培養(yǎng)和檢測。4.**培養(yǎng)條件**:通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)7-14天。5.**觀察指標(biāo)**:培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,支原體生長時(shí)會(huì)因代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基的pH值,導(dǎo)致顏色變化。例如,口腔支原體分解精氨酸產(chǎn)堿,使培養(yǎng)基顏色由橙色變?yōu)榧t色。6.**質(zhì)量控制**:通過接種已知的質(zhì)控菌株來驗(yàn)證培養(yǎng)基的靈敏度和有效性。
PK瓊脂培養(yǎng)基,也稱為Pikovskaya'sAgar,是一種用于檢測解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的原理基于解磷微生物在生長過程中能夠?qū)⒉蝗苄缘牧姿猁}轉(zhuǎn)化為可溶性形式,從而使得培養(yǎng)基中的磷酸鈣溶解,導(dǎo)致培養(yǎng)基的透明度發(fā)生變化。**配方組成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸鈣:5.0g-硫酸銨:0.5g-氯化鉀:0.2g-硫酸鎂:0.1g-硫酸錳:0.0001g-硫酸亞鐵:0.0001g-瓊脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸餾水重懸31.3g培養(yǎng)基。2.不斷攪動(dòng)并加熱,煮沸1分鐘使培養(yǎng)基完全溶解。3.121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘。4.冷卻至50°C時(shí),分裝15ml培養(yǎng)基到每個(gè)無菌培養(yǎng)皿中。**培養(yǎng)條件**:-通常在35°C下培養(yǎng)48小時(shí)。**觀察指標(biāo)**:-在PK瓊脂培養(yǎng)基上生長的解磷微生物菌落周圍的培養(yǎng)基由不透明變透明,通過觀察培養(yǎng)基的透明度變化來判斷微生物是否具有解磷能力。**保存條件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事項(xiàng)**:-避免吸入和皮膚接觸。這種培養(yǎng)基在土壤微生物學(xué)、植物病理學(xué)和環(huán)境微生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,特別是在研究植物-微生物相互作用以及微生物對(duì)土壤養(yǎng)分循環(huán)的貢獻(xiàn)方面。血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)可用于觀察細(xì)菌生長引起的溶血現(xiàn)象,這有助于細(xì)菌的鑒定。
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點(diǎn)和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長,通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動(dòng)導(dǎo)致的。5.**儲(chǔ)存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲(chǔ)存。CAS培養(yǎng)基包含鉻天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化銨、鐵離子等成分,這些成分與微生物分泌的鐵載體反應(yīng)。普通啤酒瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
哥倫比亞肉湯為非選擇性培養(yǎng)基,大多數(shù)微生物都能在其上生長良好,因此常用于微生物的初步分離和培養(yǎng)。改良BPLS瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
NGKG瓊脂基礎(chǔ)是一種用于食品中蠟樣芽孢桿菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化鈉、甘氨酸、苯酚紅和瓊脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持滲透壓;甘氨酸提供氮源;苯酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。2.**pH調(diào)節(jié)**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加物**:在冷卻至50℃左右時(shí),需要加入20%卵黃液100mL(卵黃液制備:取無菌卵黃液20mL,生理鹽水80mL,混勻)。卵黃液提供卵磷脂,產(chǎn)卵磷脂酶的細(xì)菌可水解卵磷脂,使其菌落周圍形成一個(gè)白色的沉淀環(huán)。5.**抗生物質(zhì)**:每200mL培養(yǎng)基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革蘭氏陰性細(xì)菌生長。6.**用途**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)主要用于食品中蠟樣芽孢桿菌的分離培養(yǎng)。7.**培養(yǎng)特征**:在30℃±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)后,典型的蠟樣芽孢桿菌在NGKG瓊脂基礎(chǔ)上表現(xiàn)為淺紅色菌落,邊緣不規(guī)則,有卵磷脂沉淀環(huán)。8.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來驗(yàn)證培養(yǎng)基的質(zhì)量。 改良BPLS瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿