溶菌酶營(yíng)養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)研究的培養(yǎng)基,特別是在鑒定某些細(xì)菌對(duì)溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:溶菌酶營(yíng)養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,這些成分為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。此外,還需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一種能夠水解細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,主要用于檢測(cè)細(xì)菌對(duì)溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃),以保證細(xì)菌在比較好pH環(huán)境下生長(zhǎng)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝于燒瓶中,每瓶99ml,高壓滅菌后冷卻至50℃左右時(shí),每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混勻后分裝無菌試管,每管2.5ml,備用。5.**用途**:溶菌酶營(yíng)養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗(yàn),如GB4789.14-2014標(biāo)準(zhǔn)所述。它可以用來鑒定細(xì)菌是否能夠在溶菌酶存在的情況下生長(zhǎng),從而幫助鑒別不同的細(xì)菌種類。6.**添加劑**:每瓶培養(yǎng)基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶營(yíng)養(yǎng)肉湯中。PK瓊脂培養(yǎng)基可能含有特定的選擇性添加劑,以促進(jìn)某些微生物的生長(zhǎng),同時(shí)抑制其他不需要的微生物。NAP培養(yǎng)皿
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時(shí)瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測(cè)的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長(zhǎng)情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)輕型唾液鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是使用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)進(jìn)行細(xì)菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養(yǎng)基**:-稱取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。2.**接種樣本**:-將待測(cè)樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅?將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養(yǎng)**:-將接種后的培養(yǎng)皿置于35-37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48小時(shí)。4.**觀察菌落生長(zhǎng)**:-觀察培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落,注意菌落的顏色、形態(tài)和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍(lán)色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)。6.**進(jìn)行生化試驗(yàn)**:-對(duì)純化后的菌株進(jìn)行一系列的生化試驗(yàn),如糖發(fā)酵試驗(yàn)、CAMP試驗(yàn)、膽汁七葉苷試驗(yàn)等,以進(jìn)一步鑒定菌種。7.**結(jié)果分析**:-根據(jù)菌落特征和生化試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合菌株的形態(tài)學(xué)特征,進(jìn)行菌種的鑒定。8.**報(bào)告結(jié)果**:-將鑒定結(jié)果整理成報(bào)告,包括菌株的名稱、數(shù)量和相關(guān)的生化特性。
DCR培養(yǎng)基是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,它支持植物細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)和發(fā)育。以下是DCR培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-包含大量元素(如硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、微量元素(如硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、碘化鉀等)、鐵鹽(如硫酸亞鐵、EDTA二鈉)和有機(jī)物(如鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、甘氨酸、肌醇)。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末1428.68mg/L,溶于1000ml蒸餾水或去離子水中。-加入1ml/L的1000×鈣濃縮液。-使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至5.8-6.2。-115℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:-主要用于植物組織培養(yǎng),包括細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)和發(fā)育。4.**保存條件**:-2-8°C保存。5.**注意事項(xiàng)**:-避免吸入、攝入或皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)嚴(yán)格按配方配制。-pH調(diào)節(jié)不宜過高或過低。-培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)進(jìn)行無菌檢查。6.**特別說明**:-不適宜制備高濃度母液,會(huì)有沉淀產(chǎn)生。DCR培養(yǎng)基的配方是完全定義的,不含動(dòng)物衍生成分,從而減少了潛在的影響和免疫反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。這種培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在研究植物細(xì)胞重編程、干細(xì)胞和組織工程等領(lǐng)域。BHI培養(yǎng)基可用于從臨床標(biāo)本中進(jìn)行需氧細(xì)菌的初步分離,也可用于培養(yǎng)單增李斯特菌、葡萄球菌等。
胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基,主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試實(shí)驗(yàn)。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:TSSB基礎(chǔ)的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化鈉、無水磷酸氫二鉀、葡萄糖和瓊脂等。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化鈉5.0克、無水磷酸氫二鉀2.5克、葡萄糖2.5克和瓊脂12.0克。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加脫纖維羊血使用,以提供紅細(xì)胞,檢測(cè)微生物溶血特性。5.**檢驗(yàn)原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培養(yǎng)基中作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供菌體生長(zhǎng)所需的碳源、氮源、維生素及礦質(zhì)元素等;無水磷酸二氫鈉作為pH緩沖體系;瓊脂作為凝固劑;脫纖維羊血提供紅細(xì)胞,檢測(cè)微生物溶血特性。6.**用法**:稱取本品42.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃時(shí),加入5-10ml無菌脫纖維羊血,混勻后傾注平板,備用。7.**質(zhì)量控制和典型特征**:在30-32℃培養(yǎng)18-24小時(shí),蠟樣芽孢桿菌典型特征為在菌落周圍呈現(xiàn)β型完全溶血的溶血環(huán)。通常將卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的粉成分溶解于蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后高壓蒸汽滅菌15分鐘。Aliz-gal Agar預(yù)裝培養(yǎng)皿
哥倫比亞肉湯的pH值通常控制在7.3至7.5之間,為微生物生長(zhǎng)提供適宜的酸堿環(huán)境 。NAP培養(yǎng)皿
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值對(duì)李斯特氏菌的生長(zhǎng)有影響。李斯特氏菌的適生長(zhǎng)pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值相匹配。在這個(gè)pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長(zhǎng)并表現(xiàn)出其特有的生物學(xué)特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)至關(guān)重要,因?yàn)樗梢杂绊懀?.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內(nèi)活性高。2.**細(xì)胞膜功能**:pH值的變化可能會(huì)干擾細(xì)胞膜的完整性和功能,影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會(huì)改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長(zhǎng)和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)中的pH值是通過添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會(huì)抑制李斯特氏菌的生長(zhǎng),或者導(dǎo)致其他非目標(biāo)微生物過度生長(zhǎng),影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)能夠準(zhǔn)確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實(shí)驗(yàn)室人員需要仔細(xì)控制和監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基的pH值。NAP培養(yǎng)皿