嗜鹽菌選擇性瓊脂是一種專門用于分離和培養(yǎng)嗜鹽菌的培養(yǎng)基,其特點和應(yīng)用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化鈉:40.0g/L-結(jié)晶紫:0.0005g/L-瓊脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生長。-高含量的氯化鈉創(chuàng)造高滲環(huán)境,有利于嗜鹽菌的生長,同時抑制不耐高鹽的細菌。-結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽性菌的生長。-瓊脂作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體。-高pH值有助于抑制部分雜菌的生長。3.**配制方法**:-稱取77.0g培養(yǎng)基粉末,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中。-分裝后,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**使用方法**:-將培養(yǎng)基傾注成平板,待凝固后使用。-接種樣品后,放置于36±1℃恒溫培養(yǎng)箱中需氧培養(yǎng)18-24小時。5.**細菌生長特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:無色菌落,較濕潤。-溶藻弧菌ATCC17749:無色菌落。-金黃色葡萄球菌ATCC25923:抑制生長。6.**微生物靈敏度試驗**:-按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時。-回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基中含有去氧膽酸鹽,這是一種天然的膽酸鹽,能夠抑制大多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長。牛津瓊脂平板
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)是一種專門設(shè)計用于分離和培養(yǎng)單核細胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來分離其他類型的細菌,盡管其選擇性成分主要針對李斯特氏菌。**特點**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,特別是非李斯特氏菌的生長。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時,會水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎(chǔ)主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長,利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周圍的培養(yǎng)基呈黃色。
PK瓊脂培養(yǎng)基,也稱為Pikovskaya'sAgar,是一種用于檢測解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的原理基于解磷微生物在生長過程中能夠?qū)⒉蝗苄缘牧姿猁}轉(zhuǎn)化為可溶性形式,從而使得培養(yǎng)基中的磷酸鈣溶解,導致培養(yǎng)基的透明度發(fā)生變化。**配方組成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸鈣:5.0g-硫酸銨:0.5g-氯化鉀:0.2g-硫酸鎂:0.1g-硫酸錳:0.0001g-硫酸亞鐵:0.0001g-瓊脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸餾水重懸31.3g培養(yǎng)基。2.不斷攪動并加熱,煮沸1分鐘使培養(yǎng)基完全溶解。3.121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘。4.冷卻至50°C時,分裝15ml培養(yǎng)基到每個無菌培養(yǎng)皿中。**培養(yǎng)條件**:-通常在35°C下培養(yǎng)48小時。**觀察指標**:-在PK瓊脂培養(yǎng)基上生長的解磷微生物菌落周圍的培養(yǎng)基由不透明變透明,通過觀察培養(yǎng)基的透明度變化來判斷微生物是否具有解磷能力。**保存條件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。這種培養(yǎng)基在土壤微生物學、植物病理學和環(huán)境微生物學等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,特別是在研究植物-微生物相互作用以及微生物對土壤養(yǎng)分循環(huán)的貢獻方面。
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)(PalcamAgarBase)是一種用于分離單核細胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的特點如下:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、檸檬酸鐵銨、七葉苷、氯化鋰、酚紅和瓊脂等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為李斯特氏菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,從而提高對李斯特氏菌的選擇性。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**配制方法**:通常稱取71.9g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。使用時,冷卻至50℃,加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌培養(yǎng)皿。6.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時,會水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮氣及5%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長良好。對于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時,需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標細菌能夠在抑制雜菌的同時良好生長。例如,改良愛德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對營養(yǎng)要求較高的細菌,如鏈球菌。在實驗室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個多步驟的過程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進行生化試驗和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準確地識別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。VRBA中的溴青紫紅是一種指示劑,具有抑菌和變色作用。Todd-Hewitt瓊脂平板
去氧膽酸鹽瓊脂含有去氧膽酸鹽,可以選擇性地抑制一些腸道細菌的生長,從而使一些其他的細菌能容易地生長。牛津瓊脂平板
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時,使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營養(yǎng)要求不是特別高的細菌,如溶血性鏈球菌及其他營養(yǎng)要求較高的細菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細菌可以很好地生長,通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細菌的代謝活動導致的。5.**儲存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲存。牛津瓊脂平板