月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡稱LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細菌生長需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細菌的生長。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗方法**:稱取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時,大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細菌無氣泡。5.**微生物靈敏度試驗**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時,觀察結(jié)果。VRBA中的溴青紫紅是一種指示劑,具有抑菌和變色作用。三糖鐵(TSI)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,TTB)是一種用于分離和富集沙門氏菌的選擇性富集培養(yǎng)基。它通常包含胰酪蛋白胨、動物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣、硫代硫酸鈉等成分。這種培養(yǎng)基通過提供特定的營養(yǎng)和抑制劑,有助于沙門氏菌的生長,同時抑制其他雜菌。以下是一些關(guān)于連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-動物組織消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-膽鹽(BileSalts):1.0g-碳酸鈣(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸鈉(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化鉀(PotassiumIodide):根據(jù)具體配方調(diào)整2.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入去離子水或蒸餾水。-加熱煮沸以確保所有成分完全溶解。-分裝至適宜的容器中,并進行高壓滅菌。3.**使用說明**:-接種樣品后,培養(yǎng)基可以在35°C或43°C下培養(yǎng)12至24小時。-培養(yǎng)后,可以將培養(yǎng)物接種到其他選擇性培養(yǎng)基上,如XLD瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂、SS瓊脂等,以進一步分離和鑒定沙門氏菌。VRBA預(yù)裝培養(yǎng)皿NAC瓊脂培養(yǎng)皿在微生物學(xué)實驗室中使用,其制備簡單,操作方便,能夠有效地抑制細菌的生長。
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基(LactoseBileFermentBroth)是一種用于微生物學(xué)檢測的培養(yǎng)基,主要用于檢測和分離大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌。以下是其主要特點和用途:1.**成分**:通常包含蛋白胨、乳糖、牛膽鹽和溴甲酚紫等。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,牛膽鹽用于抑制革蘭氏陽性細菌的生長,溴甲酚紫作為pH指示劑,酸性時呈黃色,堿性時呈紫色。2.**pH值**:一般調(diào)節(jié)至7.4±0.2(25℃)。3.**用途**:用于多管發(fā)酵法測定藥品、食品、飲用礦泉水、一次性使用衛(wèi)生用品中大腸菌群的存在。4.**檢驗原理**:大腸菌群能夠發(fā)酵乳糖產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化,并且可能產(chǎn)生氣體。5.**使用方法**:稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或去離子水,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。然后,將樣品接種到培養(yǎng)基中,進行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。6.**質(zhì)量控制**:通過接種特定的質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌,來驗證培養(yǎng)基的選擇性和生長促進效果。7.**儲存條件**:通常需要在避光、干燥的環(huán)境中儲存,并在用后立即旋緊瓶蓋,以保持其穩(wěn)定性。
pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖溶液,具有以下特點:1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細胞和生物分子的生理條件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強度**:PBS具有一定的離子強度,可以模擬細胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細胞懸浮和洗滌,不會引起細胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對實驗的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細胞培養(yǎng)基兼容,常用于細胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實驗、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無菌性**:實驗用的PBS通常需要經(jīng)過高壓滅菌或過濾除菌處理,以保證實驗的無菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實驗器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對簡單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來改變緩沖能力。通過調(diào)整成分比例,改良的Letheen瓊脂培養(yǎng)基提高了對不同微生物的適應(yīng)性,增強了其抑菌效果和生長因子。
大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基(TrypticSoyBroth,TSB)是一種通用的微生物培養(yǎng)基,應(yīng)用于細菌的培養(yǎng),特別是在藥品抑菌劑效力檢測中用于細菌檢測。以下是其特點介紹:1.**成分**:TSB培養(yǎng)基含有胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、葡萄糖、磷酸氫二鉀和氯化鈉。胰酪胨和大豆木瓜蛋白酶消化物提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓。2.**pH值**:TSB培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)整至7.3±0.2(25℃),適合多種微生物的生長。3.**用途**:TSB培養(yǎng)基適用于的細菌培養(yǎng),包括需氧菌和厭氧菌。它特別用于消毒劑消毒效果的測試、蠟樣芽孢桿菌的多管發(fā)酵法測定、溶血性鏈球菌選擇性增菌培養(yǎng)等。4.**制備方法**:將TSB培養(yǎng)基粉末稱量后溶解于蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸以幫助溶解,然后進行高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:在使用TSB培養(yǎng)基時,應(yīng)進行微生物靈敏度試驗,以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準。6.**儲存條件**:TSB培養(yǎng)基應(yīng)在干燥、避光的條件下儲存,通常在室溫下保存。7.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下,TSB培養(yǎng)基的有效期通常為三年
大腸桿菌產(chǎn)酸,因此在EMB上形成帶有金屬光環(huán)的典型顏色,而其他非產(chǎn)酸菌則顯示不同的表現(xiàn)。三糖鐵(TSI)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BrilliantGreenLactoseBileBroth,簡稱BGLB)是一種用于微生物學(xué)檢驗的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的確證試驗。以下是其主要特點和相關(guān)信息:1.**成分**:BGLB培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛膽粉和煌綠。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,牛膽粉和煌綠則用于抑制非腸桿菌科細菌的生長。2.**配方**:每升培養(yǎng)基中通常包含10.0g蛋白胨、10.0g乳糖、20.0g牛膽粉和0.0133g煌綠,pH值調(diào)節(jié)至7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗原理**:蛋白胨提供微生物生長所需的碳氮源;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;煌綠是一種具有抑菌能力的染料,牛膽粉和煌綠抑制非腸桿菌科細菌。4.**使用方法**:稱取40.0gBGLB培養(yǎng)基,加入1000ml蒸餾水中,煮沸溶解,分裝到有玻璃小倒管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。5.**質(zhì)量控制**:通過接種特定的質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌ATCC25922、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、糞腸球菌ATCC29212等,進行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。大腸埃希氏菌和弗氏檸檬酸桿菌在BGLB培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出生長,而糞腸球菌則應(yīng)不生長或生長微弱。三糖鐵(TSI)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿