EEM培養(yǎng)基(Eagle'sMinimumEssentialMedium)是一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,由HarryEagle研發(fā)。它是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的細(xì)胞培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng),包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。EEM培養(yǎng)基的特點(diǎn)是含有較低的碳酸氫鈉含量,適用于5%CO2條件下的細(xì)胞培養(yǎng)。如果培養(yǎng)條件中CO2濃度高于5%,則需要增加碳酸氫鈉的含量。**成分**:EEM培養(yǎng)基包含Earle'ssalts、L-谷氨酰胺、丙酸鈉和碳酸氫鈉等。它還含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,以及其他必要的營(yíng)養(yǎng)成分。**用途**:EEM培養(yǎng)基適用于多種細(xì)胞系的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、各種成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、人腫瘤細(xì)胞等。它也可用于選擇轉(zhuǎn)染DHFR的陰性細(xì)胞。**保存條件**:建議在2-8°C避光條件下保存。**產(chǎn)品外觀**:通常為紅色透明液體,無沉淀。**培養(yǎng)基保質(zhì)期**:在正確的保存條件下,培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為12個(gè)月。**質(zhì)量控制**:培養(yǎng)基的質(zhì)量控制包括觀察培養(yǎng)基是否有變色、結(jié)塊或成粒、不溶等現(xiàn)象,以及液體培養(yǎng)基是否有pH變化、沉淀物出現(xiàn)、溶液變渾濁或變色等情況。配制方法:通常,EEM培養(yǎng)基會(huì)以無菌即用的形式提供,但如果需要自行配制,應(yīng)按照制造商提供的配方和方法進(jìn)行。
月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡(jiǎn)稱LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測(cè)食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗(yàn)原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細(xì)菌生長(zhǎng)需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細(xì)菌的生長(zhǎng)。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗(yàn)方法**:稱取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時(shí),大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細(xì)菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細(xì)菌無氣泡。5.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí),觀察結(jié)果。MD預(yù)裝培養(yǎng)基培養(yǎng)皿大腸桿菌在DC培養(yǎng)基上產(chǎn)生典型的反應(yīng),表現(xiàn)為產(chǎn)生黑色素沉淀。
Endo培養(yǎng)基,也稱為遠(yuǎn)藤氏瓊脂或EndoAgar,是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的檢測(cè)。以下是Endo培養(yǎng)基的一些基本信息:**配方**:Endo培養(yǎng)基的典型配方包含蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、亞硫酸鈉和堿性品紅等成分,以及作為凝固劑的瓊脂。具體的配方比例可能根據(jù)不同的供應(yīng)商有所變化。**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至7.3±0.1(25℃)。**用途**:Endo培養(yǎng)基用于大腸菌群的檢測(cè),特別是在水質(zhì)檢測(cè)中,如生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。**使用方法**:通常稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的蒸餾水或去離子水中,并添加無水乙醇,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,將培養(yǎng)基搖勻以防瓊脂沉積,備用。**培養(yǎng)基特性**:Endo培養(yǎng)基中的亞硫酸鈉和品紅對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌有弱抑制作用。乳糖發(fā)酵型大腸桿菌和大腸菌群在該培養(yǎng)基上產(chǎn)生乙醛和酸,乙醛與亞硫酸品紅化合物反應(yīng),釋放出品紅,使菌落和周圍培養(yǎng)基變紅色。對(duì)于大腸桿菌,該反應(yīng)可能過于強(qiáng)烈,使得品紅結(jié)晶析出,給予菌落長(zhǎng)久性的金色金屬光澤。**儲(chǔ)存條件**:Endo培養(yǎng)基通常需要在密封、陰涼干燥處保存,避免攝入、呼入和皮膚接觸。
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BrilliantGreenLactoseBileBroth,簡(jiǎn)稱BGLB)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的確證試驗(yàn)。以下是其主要特點(diǎn)和相關(guān)信息:1.**成分**:BGLB培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛膽粉和煌綠。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,牛膽粉和煌綠則用于抑制非腸桿菌科細(xì)菌的生長(zhǎng)。2.**配方**:每升培養(yǎng)基中通常包含10.0g蛋白胨、10.0g乳糖、20.0g牛膽粉和0.0133g煌綠,pH值調(diào)節(jié)至7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:蛋白胨提供微生物生長(zhǎng)所需的碳氮源;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;煌綠是一種具有抑菌能力的染料,牛膽粉和煌綠抑制非腸桿菌科細(xì)菌。4.**使用方法**:稱取40.0gBGLB培養(yǎng)基,加入1000ml蒸餾水中,煮沸溶解,分裝到有玻璃小倒管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。5.**質(zhì)量控制**:通過接種特定的質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌ATCC25922、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、糞腸球菌ATCC29212等,進(jìn)行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。大腸埃希氏菌和弗氏檸檬酸桿菌在BGLB培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出生長(zhǎng),而糞腸球菌則應(yīng)不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)微弱。通過調(diào)整成分比例,改良的Letheen瓊脂培養(yǎng)基提高了對(duì)不同微生物的適應(yīng)性,增強(qiáng)了其抑菌效果和生長(zhǎng)因子。
伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點(diǎn)介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長(zhǎng)。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時(shí)加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個(gè)月。
TTC的顯色作用可以使大腸埃希菌等產(chǎn)生紅色的菌落。慶大霉素瓊脂培養(yǎng)皿
四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)是一種用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)的生化培養(yǎng)基,其基礎(chǔ)特點(diǎn)如下:1.**用途**:主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。2.**添加劑**:每瓶培養(yǎng)基需配套添加碘液和0.1%煌綠水溶液使用,具體為每105ml培養(yǎng)基添加1支HB4086a碘液和1支HB4086b0.1%煌綠水溶液。3.**成分**:主要成分包括蛋白胨5.0g/L、牛膽鹽1.0g/L、碳酸鈣10.0g/L、硫代硫酸鈉30.0g/L,pH值為8.4±0.2(25℃)。4.**檢驗(yàn)原理**:蛋白胨提供碳源、氮源和維生素,碳酸鈣中和細(xì)菌產(chǎn)酸及吸收有毒代謝產(chǎn)物,硫代硫酸鈉和四硫磺酸鈉結(jié)合抑制腸道共生菌,牛膽鹽和煌綠抑制大腸群菌和其他革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。5.**用法**:稱取46.0g培養(yǎng)基,溶解于1000ml純化水中,121℃高壓滅菌15分鐘。臨用前,每1000ml培養(yǎng)基中加入碘試液20ml和亮綠試液10ml,混勻后分裝備用。6.**質(zhì)量控制**:在42±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),使用傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌等質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn)。7.**產(chǎn)品規(guī)格**:市面上有250g的產(chǎn)品規(guī)格,價(jià)格為90元,保質(zhì)期為三年。慶大霉素瓊脂培養(yǎng)皿