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鈣成像基本參數(shù)
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鈣成像企業(yè)商機(jī)

麻省理工學(xué)院和波士頓大學(xué)的研究人員近研究使用一種熒光探針,能夠在大腦細(xì)胞處于電活動(dòng)狀態(tài)時(shí)點(diǎn)亮,可以立即對(duì)小鼠大腦中多個(gè)神經(jīng)元的活動(dòng)進(jìn)行成像。麻省理工學(xué)院的腦科學(xué)和認(rèn)知科學(xué)神經(jīng)技術(shù)教授、兼生物工程學(xué)教授EdwardBoyden表示,只需要使用簡(jiǎn)單的光學(xué)顯微鏡,即可實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)技術(shù)。神經(jīng)科學(xué)家可以將大腦內(nèi)電路的活動(dòng)進(jìn)行可視化,并將其與特定行為聯(lián)系起來(lái)?!叭绻胙芯恳环N行為或疾病,就需要對(duì)神經(jīng)元群體的活動(dòng)進(jìn)行成像,讓這些神經(jīng)元群網(wǎng)絡(luò)中協(xié)同工作?!盉oyden說(shuō)。鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)鈣離子產(chǎn)生各種各樣的胞內(nèi)信號(hào)。上海制作鈣成像產(chǎn)品介紹

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對(duì)于成像和長(zhǎng)時(shí)間成像,較重要的是要保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。熒光團(tuán)受激發(fā)光光照后產(chǎn)生的氧化物質(zhì)與蛋白質(zhì)、核酸和脂肪等發(fā)生反應(yīng),熒光信號(hào)降低的同時(shí)(光致退色)也降低了細(xì)胞壽命(光線損傷)。在光照過(guò)程中氧化劑的產(chǎn)生,主要決定于熒光團(tuán)的光化學(xué)性質(zhì)和光照劑量,因此減少光照劑量成為解決上述問(wèn)題的途徑之一。光漂白(Photobleaching)指在光的照射下熒光物質(zhì)所激發(fā)出來(lái)的熒光強(qiáng)度隨著時(shí)間推移逐步減弱乃至消失的現(xiàn)象。熒光成像的質(zhì)量很大程度上依賴于熒光信號(hào)強(qiáng)度,提高激發(fā)光強(qiáng)度固然可以提高信號(hào)強(qiáng)度,但激發(fā)光的強(qiáng)度不是可以無(wú)限提高的,當(dāng)激發(fā)光的強(qiáng)度超過(guò)一定限度時(shí),光吸收就趨于飽和,并不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子,這就是光漂白現(xiàn)象。在顯微技術(shù)中,光漂白使得觀測(cè)變得很復(fù)雜,因?yàn)樗鼤?huì)造成破壞,使螢光團(tuán)無(wú)法繼續(xù)放光,從而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。江蘇熒光顯微鈣成像聯(lián)系方式長(zhǎng)時(shí)間追蹤相同細(xì)胞,進(jìn)行可重復(fù)的科學(xué)研究對(duì)自由行為動(dòng)物進(jìn)行慢性鈣成像研究。

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鈣離子成像技術(shù)(Calciumimaging)是指利用鈣離子指示劑監(jiān)測(cè)組織內(nèi)鈣離子濃度的方法,常用于神經(jīng)系統(tǒng)的研究,指示神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,提示神經(jīng)元活動(dòng)。其原理在于借助鈣離子濃度與神經(jīng)元活動(dòng)之間的嚴(yán)格對(duì)應(yīng)關(guān)系,利用特殊的熒光染料或者蛋白質(zhì)熒光探針(鈣離子指示劑,<spanlang=EN-US>Calciumindicator),將神經(jīng)元中鈣離子的濃度通過(guò)熒光強(qiáng)度表現(xiàn)出來(lái),并被顯微鏡捕捉,從而達(dá)到監(jiān)測(cè)神經(jīng)元活動(dòng)的目的。鈣離子在神經(jīng)元功能中起著重要的作用:它們作為細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)可觸發(fā)響應(yīng),如改變基因表達(dá)和突觸囊泡中神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。由于細(xì)胞內(nèi)有離子泵在各種信號(hào)刺激下選擇性地運(yùn)輸這些離子,胞內(nèi)鈣濃度是高度動(dòng)態(tài)的。鈣成像利用鈣離子流的優(yōu)勢(shì),在活神經(jīng)細(xì)胞上直接可視化鈣信號(hào)。

近年來(lái)出現(xiàn)了通過(guò)植入性的microscope或microlens進(jìn)行freelymoving動(dòng)物鈣成像的技術(shù)。如光纖成像法:使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動(dòng)物大腦,從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號(hào)被光纖收集,然后通過(guò)相機(jī)成像。動(dòng)物頭部只需植入GRINlens,方便活動(dòng),而且可以同時(shí)植入多個(gè)lens來(lái)觀察不同的腦區(qū)之間的聯(lián)系和相互作用。還有直接植入動(dòng)物大腦的微型熒光顯微鏡,將GRINlens直接植入皮層下的海馬,下丘腦,丘腦等區(qū)域,可以監(jiān)測(cè)深部腦區(qū)的神經(jīng)元活動(dòng)。這種微型顯微鏡的重量只有幾克,不會(huì)影響動(dòng)物自由活動(dòng),可以提供800μm600μm視野和1.50μm橫向分辨率。通過(guò)鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)當(dāng)神經(jīng)元活動(dòng)的時(shí)候,胞內(nèi)鈣離子濃度能上升 10 - 100 倍。

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傳統(tǒng)的寬場(chǎng)熒光顯微鏡由于光散射的影響,只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像,共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行在體成像的時(shí)候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比。例如,用雙光子顯微鏡對(duì)海馬樹(shù)突棘的鈣離子信號(hào)進(jìn)行成像,研究神經(jīng)元突觸后長(zhǎng)時(shí)程降低(Wangetal.,2000);觀察在體小鼠運(yùn)動(dòng)皮層神經(jīng)元在嗅覺(jué)選擇任務(wù)中刺激相關(guān)電位(Komiyamaetal.,2010)等等。不過(guò),這些實(shí)驗(yàn)還是需要對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉和固定,而神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域很多研究更希望能夠?qū)ψ杂苫顒?dòng)的動(dòng)物進(jìn)行研究。近年來(lái)出現(xiàn)了通過(guò)植入性的microscope或microlens進(jìn)行在體freelymoving動(dòng)物鈣成像的技術(shù)。使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動(dòng)物大腦,從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號(hào)被光纖收集,然后通過(guò)Inscopix顯微鏡成像。動(dòng)物頭部只需植入GRINlens,方便活動(dòng)。鈣成像系統(tǒng)在自由行為動(dòng)物上對(duì)鈣離子動(dòng)態(tài)進(jìn)行單細(xì)胞分辨率級(jí)別的持久成像。深圳細(xì)胞鈣離子鈣成像價(jià)格多少

專業(yè)的鈣成像顯微鏡使得鈣成像變的直接。上海制作鈣成像產(chǎn)品介紹

研究顯示NL189BLA神經(jīng)元通過(guò)投射到CEA來(lái)控制探索行為中動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)速度和瞬時(shí)停滯。隨著進(jìn)一步的探索,該神經(jīng)元群體的活性以經(jīng)驗(yàn)依賴性的方式增加,而NL189BLA神經(jīng)元的暫時(shí)性功能喪失會(huì)導(dǎo)致瞬間停滯的yi zhi,而且這些行為停滯與焦慮和恐懼無(wú)關(guān)。動(dòng)物在這些停滯點(diǎn)開(kāi)始和終止探索性旅程并在停滯后會(huì)改變頭部朝向和運(yùn)動(dòng)軌跡方向,因此在熟悉的位置進(jìn)行短暫停滯可能是替代性嘗試錯(cuò)誤行為的決策。這些結(jié)果揭示杏仁核作為新穎性/熟悉性檢測(cè)器以及行為效應(yīng)器環(huán)路的共同作用,其具有基于探索行為期間的空間經(jīng)驗(yàn)來(lái)驅(qū)動(dòng)或yi zhi自發(fā)運(yùn)動(dòng)的能力,這對(duì)于動(dòng)物在自然界中安全有效的探索未知環(huán)境是十分必要的。上海制作鈣成像產(chǎn)品介紹

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