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膜片鉗基本參數(shù)
  • 品牌
  • Patch Clamp
  • 型號
  • 型號齊全
膜片鉗企業(yè)商機

這一設(shè)計模式似乎幾十年都沒有改變過,作為一個有著近20年膜片鉗經(jīng)驗的科研工作者,記得自己進入實驗室次看到的放大器就差不多是這樣,也不覺得還會有什么變化。直到筆者在19年訪問歐洲的一個同樣做電生理的實驗室的時候,發(fā)現(xiàn)了這樣一款獨特的放大器,讓筆者眼前一亮,這款放大器從前置放大器出來的線竟然就直接連接在了電腦上,當(dāng)筆者問他們放大器和數(shù)模呢?他們說,你看到的就是全部了,所以的部件都包含在了這個前置放大器中。在青蛙肌細胞上用雙電極鉗制膜電位的同時,記錄到ACh啟動的單通道離子電流,從而產(chǎn)生了膜片鉗技術(shù)。德國腦片膜片鉗電生理技術(shù)

德國腦片膜片鉗電生理技術(shù),膜片鉗

ePatch的一些設(shè)計亮點還包括:可以在軟件中用數(shù)據(jù)記錄實驗,不用帶專門的實驗筆記本,也不用擔(dān)心這個筆記本上記錄的內(nèi)容找不到對應(yīng)的數(shù)據(jù),系統(tǒng)會一一對應(yīng)。電壓電流刺激模式的編輯就更蠢了。很多模塊可以直接拖拽,并配有樣圖,讓你對自己編輯的程序一目了然。實時全電池參數(shù)估計,包括強大的密封電阻、膜電容、膜電阻等重要參數(shù)在線分析功能,包括電壓鉗模式下的I/Vgraph、eventdetection、FFT,電流鉗模式下的APthresholddetection、APfrequency、APslope等數(shù)據(jù)可以多種格式保存。如果你是程序員,可以支持使用Matlab進行數(shù)據(jù)分析。如果沒有這樣的經(jīng)歷,就沒有問題。數(shù)據(jù)可以保存為Clampfit,以便直接分析。美國多通道膜片鉗高阻抗封接封接(seal)是膜片鉗記錄的關(guān)鍵步驟之一。

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1976年德國馬普生物物理化學(xué)研究所Neher和Sakmann在青蛙肌細胞上記錄記錄到AChjihuo的單通道離子電流1980年Sigworth等用負壓吸引,得到10-100GΩ的高阻封接(Giga-sea1),降低了記錄時的噪聲1981年Hamill和Neher等引進了膜片游離技術(shù)和全細胞記錄技術(shù)1983年10月,《Single-ChannelRecording》一書問世,奠定了膜片鉗技術(shù)的里程碑。膜片鉗技術(shù)原理膜片鉗技術(shù)是用玻璃微電極接觸細胞,形成吉歐姆(GΩ)阻抗,使得與電極前列開口處相接的細胞膜的膜片與周圍在電學(xué)上絕緣。

ePatch雖然設(shè)備非常小巧,但功能完備,傳統(tǒng)膜片鉗設(shè)備能做的實驗,用ePatch幾乎都能做。具有voltage-clamp,current-clamp,zerocurrent-clamp三種模式,自動電極電壓飄移補償,C-fast-C-slow-R-series-P/N補償,Bridgebalance補償?shù)裙δ堋?梢宰鋈毎涗浺部梢宰鰡瓮ǖ烙涗?,膜片鉗技術(shù)常做的離子通道電流,突觸后電流,動作電位檢測等實驗都能輕松實現(xiàn)。公司還為此開發(fā)了友好的控制和記錄軟件,筆者上手接觸了一下,發(fā)現(xiàn)跟AXON的軟件類似,并且程序編輯更為簡單易用。所記錄到的數(shù)據(jù)可以直接使用Clampfit進行分析,可以說對于使用過AXON設(shè)備的膜片鉗工作者來說,上手毫無難度。膜電位Vm由高輸入阻抗的電壓跟隨器所測量。

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在心血管藥理研究中的應(yīng)用,隨著膜片鉗技術(shù)在心血管方面的廣泛應(yīng)用,對血管疾病和藥物作用的認(rèn)識不僅得到了不斷更新,而且在其病因?qū)W與藥理學(xué)方面還形成了許多新的觀點。正如諾貝爾基金會在頒獎時所說:“Neher和Sadmann的貢獻有利于了解不同疾病機理,為研制新的更為的藥物開辟了道路”。目前在離子通道高通量篩選中主要是進行樣品量大、篩選速度占優(yōu)勢、信息量要求不太高的初級篩選。近幾年,分別形成了以膜片鉗和熒光探針為基礎(chǔ)的兩大主流技術(shù)市場。將電生理研究信息量大、靈敏度高等特點與自動化、微量化技術(shù)相結(jié)合,產(chǎn)生了自動化膜片鉗等一些新技術(shù)。在膜電位改變時,在電場的作用下,重新分布導(dǎo)致通道的關(guān)閉,同時有電荷移動,稱為門控電流。單通道膜片鉗產(chǎn)品介紹

在細胞膜的電學(xué)模型中,膜電容和膜電導(dǎo)構(gòu)成了一個并聯(lián)回路。德國腦片膜片鉗電生理技術(shù)

高阻封接問題的解決不僅改善了電流記錄性能,還隨之出現(xiàn)了研究通道電流的多種膜片鉗方式。根據(jù)不同的研究目的,可制成不同的膜片構(gòu)型。(1)細胞吸附膜片(cell-attachedpatch)將兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細胞膜表面上,形成高阻封接,在細胞膜表面隔離出一小片膜,既而通過微管電極對膜片進行電壓鉗制,分辨測量膜電流,稱為細胞貼附膜片。由于不破壞細胞的完整性,這種方式又稱為細胞膜上的膜片記錄。此時跨膜電位由玻管固定電位和細胞電位決定。因此,為測定膜片兩側(cè)的電位,需測定細胞膜電位并從該電位減去玻管電位。從膜片的通道活動看,這種形式的膜片是極穩(wěn)定的,因細胞骨架及有關(guān)代謝過程是完整的,所受的干擾小。德國腦片膜片鉗電生理技術(shù)

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