電壓鉗技術(shù)是由科爾發(fā)明的,并在20世紀初由霍奇金和赫胥黎完善。其設(shè)計的主要目的是證明動作電位的產(chǎn)生機制,即動作電位的峰值電位是由于膜對鈉的通透性瞬間增加。但當(dāng)時還沒有直接測量膜通透性的方法,所以用膜電導(dǎo)來測量離子通透性。膜電導(dǎo)測量的基礎(chǔ)是電學(xué)中的歐姆定律,如膜Na電導(dǎo)GNa與電化學(xué)驅(qū)動力(Em-ENa)的關(guān)系,膜電流INaGNa=INa/(Em-ENa)。因此,可以通過測量膜電流,然后利用歐姆定律來計算膜電導(dǎo)。然而,膜電導(dǎo)可以通過使用膜電流來計算。這個條件是通過電壓鉗技術(shù)實現(xiàn)的。下一張幻燈片中右邊的兩張圖顯示了squid的動作電位和動作電位過程中膜電流的變化,這是霍奇金和赫胥黎在半個世紀前用電壓鉗記錄的。他們的實驗證明了參與動作電位的離子電流由三種成分組成:Na、K、Cl。對這些離子流進行了定量分析。這項技術(shù)為闡明動作電位的本質(zhì)和離子通道的研究做出了巨大貢獻。這一技術(shù)的發(fā)現(xiàn)和基因克隆技術(shù)并架齊驅(qū),給生命科學(xué)研究帶來了巨大的前進動力。德國多通道膜片鉗研究
膜片鉗是一種用于研究生物膜電生理特性的技術(shù),它可以在單細胞或組織切片上記錄膜電位的變化。這種技術(shù)可以用來研究細胞膜中的離子通道、離子泵以及神經(jīng)元的電活動等。在膜片鉗實驗中,研究者會將單細胞或組織切片放置在一個稱為膜片電極的微小玻璃管中。這個電極會緊密地貼合在細胞或組織的表面,形成一個高阻抗的界面,使得研究者可以精確地測量細胞膜電位的變化。膜片鉗實驗的結(jié)果通常以電流-時間曲線(i-t曲線)的形式呈現(xiàn)。這些曲線可以顯示出在給定的時間內(nèi)通過特定通道的電流強度,從而幫助研究者了解通道的性質(zhì)和功能。除了測量電流外,膜片鉗還可以用來記錄膜電位的變化。這些變化可以反映出細胞對于各種刺激的反應(yīng),例如神經(jīng)元的興奮或抑制。因此,膜片鉗是一種非常有用的工具,可以幫助研究者深入了解細胞和組織的生理學(xué)特性。總的來說,膜片鉗是一種強大的電生理技術(shù),可以用來研究細胞膜中的離子通道和離子泵的功能,以及神經(jīng)元的電活動等。它對于理解細胞和組織的生理學(xué)特性,以及開發(fā)新的藥物和zhi療策略都具有重要的意義。進口單電極膜片鉗價格想要深入了解離子通道?膜片鉗技術(shù)是您不可或缺的研究工具!
1980年,Sigworth、Hamill、Neher等在記錄電極內(nèi)施加負壓吸引,得到了10~100GΩ的高阻封接(gigaseal),降低記錄噪聲,實現(xiàn)了單根電極既鉗制膜電位又記錄單通道電流。獲1991年Nobel獎。1955年,Hodgkin和Keens應(yīng)用電壓鉗(Voltageclap)在研究神經(jīng)軸突膜對鉀離子通透性時發(fā)現(xiàn)放射性鉀跨軸突膜的運動很像是通過許多狹窄空洞的運動,并提出了"通道"的概念。1963年,描述電壓門控動力學(xué)的Hodgkin-Hx上模型(簡稱H-H模型)榮獲譜貝爾醫(yī)學(xué)/生理學(xué)獎。1976年,Neher和Sakmann建立膜片鉗(Patchclamp)按術(shù)。1983年10月,《Single-ChannelRecording》一書問世,奠定了膜片鉗技術(shù)的里程碑。1991年,Neher和Sakmann的膜片鋪技術(shù)榮獲諾貝爾醫(yī)學(xué)/生理學(xué)獎。
膜片鉗是一種用于研究生物膜電生理特性的技術(shù),它能夠測量細胞膜通道和受體的電生理活動,以及藥物對它們的影響。膜片鉗技術(shù)的基本原理是將細胞膜的電生理活動轉(zhuǎn)化為微弱電流信號,然后通過放大器和記錄設(shè)備進行測量和記錄。在膜片鉗實驗中,細胞膜被固定在鉗制電極上,同時另一個電極用于刺激或記錄電信號。通過這種方式,可以測量細胞膜上各種通道和受體的電生理活動,例如鈉離子通道、鉀離子通道、氯離子通道、鈣離子通道等。膜片鉗技術(shù)具有高靈敏度和高分辨率的特點,可以檢測到非常微小的電流變化。此外,它還可以在單細胞水平上研究電生理活動,提供有關(guān)通道和受體功能和調(diào)節(jié)的詳細信息。因此,膜片鉗技術(shù)被廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)、心血管藥理學(xué)、藥物篩選等領(lǐng)域。總之,膜片鉗技術(shù)是一種強大的工具,用于研究生物膜電生理特性和藥物對它們的影響。通過使用膜片鉗技術(shù),科學(xué)家可以更深入地了解細胞膜上通道和受體的功能和調(diào)節(jié)機制,為新藥研發(fā)和疾病zhi療提供重要的信息。典型的單通道電流呈一種振幅相同而持續(xù)時間不等的脈沖樣變化。
高阻封接技術(shù)還明顯降低了電流記錄的背景噪聲,從而戲劇性地提高了時間、空間及電流分辨率,如時間分辨率可達10μs、空間分辨率可達1平方微米及電流分辨率可達10-12A。影響電流記錄分辨率的背景噪聲除了來自于膜片鉗放大器本身外,主要還是信號源的熱噪聲。信號源如同一個簡單的電阻,其熱噪聲為σn=4Kt△f/R式中σn為電流的均方差根,K為波爾茲曼常數(shù),t為溫度,△f為測量帶寬,R為電阻值。可見,要得到低噪聲的電流記錄,信號源的內(nèi)阻必需非常高。如在1kHz帶寬,10%精度的條件下,記錄1pA的電流,信號源內(nèi)阻應(yīng)為2GΩ以上。電壓鉗技術(shù)只能測量內(nèi)阻通常達100kΩ~50MΩ的大細胞的電流,從而不能用常規(guī)的技術(shù)和制備達到所要求的分辨率。膜片鉗技術(shù)實現(xiàn)了小片膜的孤立和高阻封接的形成。可升級膜片鉗蛋白質(zhì)分子水平
探索離子通道的舞動,膜片鉗是您的科學(xué)利器!德國多通道膜片鉗研究
膜片鉗在通道研究中起著重要的作用。膜片鉗技術(shù)可以直接觀察和區(qū)分單個離子通道電流及其開閉時間,區(qū)分離子通道的離子選擇性,同時發(fā)現(xiàn)新的離子通道和亞型,在記錄單細胞電流和全細胞電流的基礎(chǔ)上,進一步計算細胞膜上的通道數(shù)和開放概率。也可用于研究某些細胞內(nèi)或細胞外物質(zhì)對離子通道的開閉和通道電流的影響。同時用于研究細胞信號的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)和細胞分泌機制。結(jié)合分子克隆和定點突變技術(shù),膜片鉗技術(shù)可用于研究離子通道的分子結(jié)構(gòu)與生物學(xué)功能的關(guān)系。膜片鉗技術(shù)也可用于分析藥物對其靶受體的作用位點。例如,神經(jīng)元煙堿受體是配體門控離子通道,膜片鉗全細胞記錄技術(shù)可以通過記錄煙堿誘發(fā)電流,直接反映神經(jīng)元煙堿受體活動的全過程,包括受體與其激動劑和拮抗劑的親和力、離子通道開閉的動態(tài)特征、受體的***等。用膜片鉗全細胞記錄技術(shù)觀察拮抗劑對煙堿受體興奮的量效曲線的影響,以確定其作用的動態(tài)特征。然后根據(jù)拮抗劑對受體***的影響分析,拮抗劑的作用是否是電壓依賴性和使用依賴性的,我們可以從功能上區(qū)分拮抗劑對煙堿受體的不同作用位點,即判斷拮抗劑是作用于受體的激動劑識別位點、離子通道還是其他變構(gòu)位點。德國多通道膜片鉗研究