膜片鉗技術(shù)是當(dāng)前研究細胞膜電流及離子通道的蕞重要的技術(shù)。從技術(shù)層面來解釋的話,膜片鉗技術(shù)(patchclamp)是指利用鉗制電壓或者電流的方法(通常為鉗制電壓)來記錄細胞膜離子通道電活動的微電極技術(shù)。膜片鉗技術(shù)的原理為:使用一個一頭尖一頭粗的錐狀玻璃管,管中設(shè)有微電極,管的前列直徑約1.5~3.0μm,通過負壓吸引使前列口與細胞膜形成千兆歐姆級的阻抗封接,前列口內(nèi)的細胞膜區(qū)域與周圍其他區(qū)域形成了電學(xué)分隔,然后人工鉗制此片區(qū)域細胞膜的電位,即可達到對膜片上離子通道電流的監(jiān)測與記錄。由于膜片鉗檢測的是PA級的微電流信號,因此需要特殊的放大器及模數(shù)轉(zhuǎn)換器。進口膜片鉗實驗操作
膜片鉗技術(shù)(patchclamptechniques)是采用鉗制電壓或電流的方法對生物膜上離子通道的電活動進行記錄的微電極技術(shù)。1989年,Blanton將腦片電生理記錄與細胞的膜片鉗記錄結(jié)合起來,建立了腦片膜片鉗記錄技術(shù)(patchclamponinvitrobrainslices),這為在細胞水平研究反射中樞系統(tǒng)離子通道或受體在神經(jīng)環(huán)路中的生理和藥理學(xué)作用及其機制提供了可能性。離體的腦組織能夠在一定的溫度、酸度和滲透壓、通氧狀態(tài)等條件下存活并保持良好的生理狀態(tài)。與急性分離的或培養(yǎng)的神經(jīng)元相比,離體腦片中的神經(jīng)元更接近生理狀態(tài):基本保持了在體情況下的細胞形態(tài),神經(jīng)細胞之間及神經(jīng)細胞與非神經(jīng)細胞之間的很多固有聯(lián)系,以及較為正常完整的突觸回路、受體分布、遞質(zhì)釋放及其信息傳遞等功能。進口膜片鉗實驗操作屯流鉗素向細胞內(nèi)注入刺激電流,記錄膜電位對刺激電流的反應(yīng)。
膜片鉗技術(shù)是一種細胞內(nèi)記錄技術(shù),是研究離子通道活動的蕞佳工具,也是應(yīng)用蕞廣的電生理技術(shù)之一。該技術(shù)通過施加負壓將微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)的前端與細胞膜緊密接觸,形成GΩ以上的阻抗,使電極開口處的細胞膜與其周圍膜在電學(xué)上絕緣。被孤立的小膜片面積為μm量級,內(nèi)中只有少數(shù)離子通道。玻璃微電極中含有一根浸入電解溶液中的導(dǎo)線,用于傳導(dǎo)離子。在此基礎(chǔ)上對該膜片施行電壓鉗位(即保持跨膜電壓恒定),如果單個離子通道被包含在膜片內(nèi),則可對此膜片上的離子通道的電流進行監(jiān)測記錄。通過觀測單個通道開放和關(guān)閉的電流變化,可直接得到各種離子通道開放的電流幅值分布、開放幾率、開放壽命分布等功能參量,并分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關(guān)系。還可把吸管吸附的膜片從細胞膜上分離出來,以膜的外側(cè)向外或膜的內(nèi)側(cè)向外等方式進行實驗研究。這種技術(shù)對小細胞的電壓鉗位、改變膜內(nèi)外溶液成分以及施加藥物都很方便。
實驗溶液浸溶細胞溶液和微電極玻璃管內(nèi)的填充液成分對全細胞膜片鉗記錄也是很重要的內(nèi)容,這關(guān)系到封接的容易程度、細胞存活狀態(tài)及膜電位的狀態(tài)等。在實驗記錄過程中,尤其是神經(jīng)生物學(xué)實驗,需要迅速更換細胞浸溶液濃度以免受體敏感性降低(desensitization)或需要模擬快速突觸反應(yīng)的壽命。原則上細胞的浸溶液成分或玻璃管內(nèi)填充液成分應(yīng)該與細胞外或細胞內(nèi)間質(zhì)的成分相似,實際研究中,為了探討某些通道或電位特性,對這些實驗溶液的成分或濃度會作必要調(diào)整,沒有哪種溶液是理想的。解鎖細胞秘密,膜片鉗帶您探尋離子通道的奧秘!
現(xiàn)在這塊全新的芯片被放置在了跟前置放大器大小類似的小盒子中,便成就了這款全球較小的膜片鉗放大器ePatch。體積大幅縮減只是一個表面,由于細胞電信號在被電極記錄到后,直接進入了芯片,以較短的路徑直接從模擬信號轉(zhuǎn)變成了數(shù)字信號,在很大程度上減少了環(huán)境及電路噪音對信號的影響,所以這款放大器便可以輕易獲取非常高質(zhì)量且穩(wěn)定的電生理信號。ePatch體積只為42*18*78mm,重量200g,整套設(shè)備的大小只相當(dāng)于傳統(tǒng)膜片鉗設(shè)備的前置放大器,可以輕松地放入衣服口袋。用USB接口連接電腦后即可使用,無需額外電源,連接和使用都極為簡便。沒有了占地方的放大器,數(shù)模轉(zhuǎn)換器以及相互連接的眾多電線,電源線等等,我們的膜片鉗又進一步減小了體積。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實驗結(jié)果,專業(yè)團隊,7*62小時隨時人工在線咨詢.膜片鉗,帶您進入細胞膜電生理的奇妙世界!芬蘭可升級膜片鉗市場價
膜片鉗技術(shù),讓離子通道研究變得更加準(zhǔn)確與高效!進口膜片鉗實驗操作
膜片鉗技術(shù)發(fā)展至今,已經(jīng)成為現(xiàn)代細胞電生理的常規(guī)方法,它不僅可以作為基礎(chǔ)生物醫(yī)學(xué)研究的工具,而且直接或間接為臨床醫(yī)學(xué)研究服務(wù)。目前膜片鉗技術(shù)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)(腦)科學(xué)、心血管科學(xué)、藥理學(xué)、細胞生物學(xué)、病理生理學(xué)、中醫(yī)藥學(xué)、植物細胞生理學(xué)、運動生理等多學(xué)科領(lǐng)域研究。隨著全自動膜片鉗技術(shù)(Automaticpatchclamptechnology)的出現(xiàn),膜片鉗技術(shù)因其具有的自動化、高通量特性,在藥物研發(fā)、藥物篩選中顯示了強勁的生命力。進口膜片鉗實驗操作