對于涉及完整Fab或Fc抗體片段的應用,需要在抗體鉸鏈處進行消化。木瓜蛋白酶和 Lys-C 等傳統(tǒng)酶可用于生成 Fab 片段,但非特異性酶活性需要仔細優(yōu)化,以極大限度地降低多個消化位點的風險。Genovis的SmartEnzymes IgG 蛋白酶 GingisKHAN 和 FabALACTICA 具有一個消化位點,可從人 IgG1 生成均質(zhì)的 Fab 和 Fc 抗體片段。生成的片段可用于結晶和高階結構 (HOS) 的 NMR 研究、結合研究等。在這里,我們提出了獲得完整Fab和Fc抗體片段的不同策略。所得片段顯示 GingisKHAN 的有效消化,用于生成完整的 Fab 片段或從依那西普上的融合 TNFR 結構域中分離 Fc。由于 GingisKHAN 的特異性消化依賴于 IgG 的天然折疊,因此在變性條件下特異性受到負面影響。為了使用SDS-PAGE分析消解效率,在加入SDS上樣緩沖液之前,停止在分析樣品中加入碘乙酰胺的反應。Genovis同時提供IdeS酶的純化試劑盒。使用胰島素氧化β鏈來比較GingisREX和ArgC的酶特異性。安徽GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
在Genovis,我們的策略是幫助客戶進行中級(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法,我們發(fā)現(xiàn),與簡單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級方法具有優(yōu)勢。通過執(zhí)行中級描述,您可以生成從完整的質(zhì)量實驗中獲得的所有信息,具有額外的優(yōu)勢。在對抗體進行完整質(zhì)量分析時,很難明確地識別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進,可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實驗可以執(zhí)行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識別修改,而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個結構域,這是你在完整水平上無法做到的。安徽GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶可用于研究特定Fc區(qū)域的質(zhì)量屬性,有助于研究GS連接子的修飾。
經(jīng)過多年的經(jīng)驗積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細胞、細胞基因藥物等領域的需求。其中,細胞基因藥物領域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢測產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術、QED抗體對、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。
Genovis是一家瑞典生物技術公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學術界。我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供。
大多數(shù)zhiliao性抗體都攜帶人IgG1骨架,雙特異性和多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性,例如單價結合、二硫鍵擾亂和配對Fc糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和Lys-C的酶消化,這需要優(yōu)化以極大限度地減少過度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的FabDELLO與IdeS酶具有不同的特異性,它在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并產(chǎn)生完整的Fab和Fc片段。為了證明FabDELLO的特異性活性,通過非還原SDS-PAGE消化和分析了IgG1和Fc融合蛋白的選擇。所有底物均實現(xiàn)了完全消化,包括具有其他困難的LALA和LFLE突變的IgG1。FabDELLO酶在底物上的精確和有效性能驗證了其在生物制藥開發(fā)中的用途。這包括FabRICATOR固定化柱和CaptureSelect Fc純化柱,用于亞基的親和純化。北京FabRICATORIdeS蛋白酶
瑞典生物技術公司Genovis提供IdeS蛋白酶等,用于mAb、ADC藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。安徽GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設計,但在無法實現(xiàn)自動化的情況下,在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后,樣品可直接轉移到LC-MS的自動進樣器進行快速色譜分析,或轉移到其他分析方法進行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險,并提高通量。安徽GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并在兩小時內(nèi)生成均質(zhì)的Fab和F...
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【詳情】Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對IgG進行柱上消化的...
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【詳情】與IdeS不同,在蛋白質(zhì)zhiliao藥物的質(zhì)量控制過程中,詳細分析和識別質(zhì)量屬性非常重要。對于具有...
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