ArcticZymes Technologies有兩條產(chǎn)品線,分別針對(duì)分子診斷和生物藥物生產(chǎn)兩個(gè)領(lǐng)域。在分子診斷領(lǐng)域,產(chǎn)品有蝦堿酶(SAP)、UNG酶、等溫?cái)U(kuò)增酶(IsoPol)、連接酶、蛋白酶、內(nèi)切核酸酶及外切核酸酶等,涉及核酸抽提、擴(kuò)增及測(cè)序等應(yīng)用。在生物藥物生產(chǎn)領(lǐng)域,全球創(chuàng)新的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases, SANs)系列產(chǎn)品以其獨(dú)特優(yōu)勢(shì),在細(xì)胞基因藥物及RNA藥物生產(chǎn)中表現(xiàn)出更好的性能。其中,鹽活性核酸酶SANs系列產(chǎn)品包含兩款產(chǎn)品,分別是SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶;兩款酶的差別在于發(fā)揮酶活的鹽濃度范圍分別是生理鹽濃度范圍和400-600mM高鹽濃度范圍。ArcticZymes Technologies旨在是研究和開發(fā)具有獨(dú)特特性的酶。安徽上海倍篤生物中鹽核酸酶70950-160
細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式,其中病毒遞送更為常用。在病毒遞送路徑中,腺相關(guān)病毒(AAV)和慢病毒(Lentivirus)是常用的兩種載體;差別是病毒基因組的存在形式,AAV的基因組一般不整合到染色體中,以游離形式存在于染色體之外,且一般會(huì)表達(dá)數(shù)年之久;而慢病毒的基因組則會(huì)整合到染色體達(dá)到長(zhǎng)期持續(xù)表達(dá)的目的。此外,其它用于基因藥物的病毒載體有單純皰疹病毒(HSV)、痘苗病毒(Vaccina Virus)、痘病毒(Poxviruses)。河南培養(yǎng)基條件中鹽核酸酶70950生理鹽濃度下,M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優(yōu)于常用核酸酶,對(duì)HCD的去除有些本質(zhì)區(qū)別。
大多數(shù)研究級(jí)別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應(yīng)用的,濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化,然后溶解在配方緩沖液中。一種改進(jìn),特別是純度方面的改進(jìn),基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如,Kutner等評(píng)估了組合純化/濃縮方法。蔗糖緩沖的超速離心結(jié)合陰離子交換層析獲得了88.2%的收率,而相反的組合則獲得了77.6%的收率。在兩種方法中,濃縮都超過了100倍,病毒滴度都超過了1010TU/ml(VSV-g包被的慢病毒)。
?通過三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系生產(chǎn)病毒載體,會(huì)引入宿主細(xì)胞DNA殘留(HCD)、蛋白殘留(HCP)、工藝雜質(zhì)(如antibiotics、核酸酶等外源物質(zhì))等污染,存在潛在的致瘤性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般允許生物制品中存在10ng/dose以下的殘留DNA。此外,根據(jù)雜質(zhì)來源、工藝以及產(chǎn)品類型不同,也會(huì)對(duì)HCD限度做不同要求。為了達(dá)到這個(gè)要求,一般通過核酸酶處理和色譜聯(lián)用的方法。一般在細(xì)胞培養(yǎng)液裂解/收獲、澄清收獲及超濾濃縮等環(huán)節(jié)加入核酸酶處理,需要工藝摸索來確認(rèn)處理方式。M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽濃度下具有較高活性,較適合鹽濃度為125-250 mM。
ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來源于深海microbes中,具有一些共同的特性。1. 熱不穩(wěn)定性,使酶產(chǎn)品相對(duì)容易失活,簡(jiǎn)化工作流程,方便自動(dòng)化過程;2. 低溫活性,即在低溫或常溫下具有更高活性,縮短酶與底物的孵育時(shí)間,提高反應(yīng)速度及效率;3. 耐鹽特性,是指大部分酶產(chǎn)品能耐受較高的鹽濃度,拓寬反應(yīng)體系范圍選擇,在特殊體系的應(yīng)用場(chǎng)景下具有更為出色的性能表現(xiàn);4. 獨(dú)特特性,極限酶類產(chǎn)品能夠在非常規(guī)條件下進(jìn)行酶促反應(yīng),讓一些反應(yīng)從不可能變?yōu)榭赡?。相比全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD酶切成更小片段,破壞核小體結(jié)構(gòu)。福建ArcticZymes中鹽核酸酶70950-150
在已有工藝中,不需做任何調(diào)整,用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸酶,且去除HCD效率更高;安徽上海倍篤生物中鹽核酸酶70950-160
ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,為生物工藝領(lǐng)域提供了革新性、更高效的方案來解決大規(guī)模生產(chǎn)中核酸殘留問題。此前,受限于鹽濃度和核酸酶活性的負(fù)調(diào)控效應(yīng),行業(yè)在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡,更多的是讓工藝選擇適應(yīng)酶。此后,行業(yè)可以根據(jù)工藝具體需求而選擇更合適的酶產(chǎn)品,既能達(dá)到理想的去除效果,又能輕松控制酶用量及綜合成本,真正實(shí)現(xiàn)讓酶適應(yīng)工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業(yè)提供更高效率的解決方案。安徽上海倍篤生物中鹽核酸酶70950-160
對(duì)于含包膜的病毒載體,如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽...
【詳情】細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域的進(jìn)展使得對(duì)高質(zhì)量基因轉(zhuǎn)移技術(shù)的需求急劇增加,包括高質(zhì)量慢病毒載體(LV)的大規(guī)模生...
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【詳情】慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括:膜過濾澄清,隨后切向流過濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外,需用核酸...
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【詳情】倫敦大學(xué)學(xué)院(UCL)的工藝開發(fā)團(tuán)隊(duì),在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)...
【詳情】對(duì)于含包膜的病毒載體,如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽...
【詳情】在生物工藝流程中,需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,也需要在生產(chǎn)流程中去除...
【詳情】基因藥物常用的AAV載體有三種生產(chǎn)方法,分別是三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系和包裝細(xì)胞體系。其...
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