前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡(jiǎn)單易懂，用戶無需具備專業(yè)知識(shí)也能夠輕松上手使用。美國人精子分析DSL

通過結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低］。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較，其結(jié)果為：采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動(dòng)精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)（授精I(xiàn)VF）的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。綿羊精子分析WOB計(jì)算機(jī)輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測(cè)方法，確保檢測(cè)過程的準(zhǔn)確性和可靠性?。

精子檢測(cè)是通過一系列檢測(cè)方法來評(píng)估男性生育能力的指標(biāo)之一。而檢測(cè)方法的選擇直接影響到檢測(cè)的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性。目前，常用的檢測(cè)方法有手動(dòng)計(jì)數(shù)法、顯微鏡計(jì)數(shù)法、電子顯微鏡計(jì)數(shù)法、精子運(yùn)動(dòng)軌跡分析法等。手動(dòng)計(jì)數(shù)法是通過顯微鏡手動(dòng)計(jì)算精液中精子數(shù)量的方法，該方法簡(jiǎn)單易行，但因操作者技能不同，容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法，該方法比手動(dòng)計(jì)數(shù)法更加準(zhǔn)確，但需要專業(yè)的技能和經(jīng)驗(yàn)。電子顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法，該方法非常準(zhǔn)確，但需要昂貴的設(shè)備。精子運(yùn)動(dòng)軌跡分析法是通過計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)軌跡來判斷精子活力和數(shù)量的方法，該方法不僅準(zhǔn)確性，而且可以直觀地顯示精子的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，但需要較為復(fù)雜的技術(shù)。除了以上常見的檢測(cè)方法，還有一些新興的檢測(cè)方法，如流式細(xì)胞術(shù)、全自動(dòng)分析系統(tǒng)等。這些檢測(cè)方法雖然在檢測(cè)精子數(shù)量、活力等方面具有一定優(yōu)勢(shì)，但由于技術(shù)上的限制和設(shè)備的昂貴，目前還沒有得到廣泛應(yīng)用。在選擇檢測(cè)方法時(shí)，需要考慮檢測(cè)的目的、檢測(cè)的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性等因素。同時(shí)，需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)，避免因設(shè)備不足或技術(shù)不過關(guān)等因素導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差。

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長者，可呈淡黃色，若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級(jí)：0級(jí)：不活動(dòng)；1級(jí)：精子原地?cái)[動(dòng)；2級(jí)：有中等的前向運(yùn)動(dòng)；3級(jí)：前向運(yùn)動(dòng)活躍，快速直線運(yùn)動(dòng)。正常的精子活動(dòng)力為2~3級(jí)的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論，應(yīng)對(duì)精子數(shù)量活力活動(dòng)率液化時(shí)間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**、夢(mèng)遺等情況，還應(yīng)禁煙戒酒，忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。在精子研發(fā)的歷程中，計(jì)算機(jī)輔助精子檢測(cè)經(jīng)歷了黑白圖像機(jī)、彩色圖像檢測(cè)。目前先進(jìn)的是熒光精子圖像檢測(cè)。

在精子形態(tài)學(xué)檢查中，通過CASA系統(tǒng)對(duì)精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析，有些特征（細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇，這樣就會(huì)引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測(cè)得的結(jié)果一致性較差[10]。4結(jié)論和展望計(jì)算機(jī)輔助**分析具有較好的可靠性、重復(fù)性和穩(wěn)定性，與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡目測(cè)估計(jì)相比，更具有快速方便、對(duì)比性強(qiáng)、便于交流等明顯優(yōu)點(diǎn)[11]，常規(guī)**檢查無法測(cè)定精子微細(xì)運(yùn)動(dòng)特點(diǎn)，顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優(yōu)越性。王益鑫亦發(fā)現(xiàn)，部分手工**檢查正常的不育患者，進(jìn)行**全自動(dòng)分析及生化檢測(cè)，均發(fā)現(xiàn)明顯異常[12]。因此，CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗(yàn)方面具有重要的實(shí)際應(yīng)用意義。CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的參數(shù)，這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動(dòng)特性。香港魚精子分析W.H.O 6

所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn)，嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。美國人精子分析DSL

人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容，更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存；對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序；所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng)，以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位，傳感器應(yīng)連接警報(bào)器，可通過實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無菌的液氮。美國人精子分析DSL